8. marts, 2017, 12:29 Ekspertartikler: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547
En kvalitativ analyse af polymerasekædereaktionen - PCR for hepatitis C bestemmer tilstedeværelsen eller fraværet af HCV i kroppen. Under laboratoriebetingelser undersøges strukturen af RNA, som vil omfatte virussen. I tilfælde af detektion af virus C er det nødvendigt at gennemgå et behandlingsforløb, da leverens forsømte tilstand vil medføre alvorlige konsekvenser. PCR af høj kvalitet udføres efter genopretning for at bekræfte fraværet af antistoffer. Udpeget og til rutinemæssig inspektion. Med en lav koncentration af det forårsagende middel i blodet kan PCR (kvalitativ) muligvis ikke registrere noget, fordi diagnostiksystemet har sine egne følsomhedstærskler. I tilfælde af sygdoms første fase eller den milde form udføres PCR ved ultradiagnostik på ekstremt følsomt udstyr.
Hvad er RNA-virus?
Betegnelsen RNA i hepatitis C-viruset (eller hepatitis C-virus-RNA) er selve leversygdommen. Virus C binder sig til den sunde celle i kroppen ved at trænge ind indeni. Over tid, spredt gennem hele kroppen, er det kun nødvendigt at komme ind i blodet. Som et resultat trænger patogenet i leveren, smelter sammen med sine celler og virker hårdt. Leverceller (hepatocytter) arbejder under indflydelse, undergår ændringer, og derved dør de. Jo længere virus C er i leveren, desto større dør antallet af celler. Over tid udvikler farlige sygdomme, hvilket fører til malign degeneration og død.
Infektion af leveren med denne type virus kan ikke manifestere sig eksternt. I mange år eller årtier føles en inficeret person helt sund, og kun en tilfældig undersøgelse afslører oftest patologi. Ved donering af blod til hepatitis undersøges en del af RNA-kæden (ribonukleinsyre), som er en del af det humane gen (DNA). Resultaterne af laboratorieprøver bør ikke anvendes til selvbehandling, da dette kun er en indikator. Det præcise billede og yderligere diagnose er bedre bestemt af lægen.
Når det er færdigt: indikationer for forskning
Ved bekræftelse af HCV udføres PCR-analyse (polymerasekædereaktion). PCR-undersøgelser hjælper med at finde årsagsmidlet i RNA-strukturen og ordinere en effektiv terapi. Udpeget i følgende tilfælde:
- påvisning af tegn på betændelse i leveren
- screening undersøgelser for forebyggelse;
- undersøgelse af personer i kontakt
- diagnose af hepatitis af blandet oprindelse (bestemmelse af hovedpatogenet);
- bestemmelse af reproduktionsaktiviteten af viruset i kronisk form
- levercirrhose
- at bestemme effektiviteten af den foreskrevne behandling.
Der er en kvalitativ såvel som kvantitativ analyse af PCR. Kvantitativ PCR viser procentdelen af RNA med virusbærere i blodet, og kvalitativ indikerer viral tilstedeværelse eller fravær. En positiv indikator for kvalitet (tilstedeværelse af Hepatitis C RNA) har også behov for kvantitativ forskning. Et højt niveau af koncentration af det forårsagende middel til hepatitis C er forbundet med risikoen for dets overførsel, det vil sige infektion af andre. Lavt tal er bedre behandles. Mængden af RNA-vira i blodet er ikke relateret til intensiteten af sygdommen. PCR-analyse gøres også i tilfælde af interferonbehandling for at ordinere behandlingens varighed og kompleksitet.
Funktioner af højkvalitets PCR analyse for hepatitis C
En kvalitativ analyse er tildelt en polymerasekædereaktionsindikator for alle patienter, der har antistoffer mod hepatitis C i deres blod. De, der har været syge og genvundet, skal genoptage testen. Det anbefales at tage en analyse for hepatitis B, så i tilfælde af en positiv konklusion og for hepatitis D. Også kvalitativt analyseret reaktion skal udføres i forbindelse med andre blodprøver. Analyser viser et komplet billede af viral spread.
Fra testresultaterne vil kun en positiv test for hepatitis C være synlig eller negativ, dvs. tilstedeværelsen eller fraværet af en virus. Hvis udgangen er "detekteret", er viruset og fortsætter med at være aktivt. Betegnelsen "ikke detekteret" angiver fraværet af en virus eller dens lille mængde. Med denne indikator skal man huske på, at diagnostiske systemers analytiske følsomhed er forskellig, og at RNA hepatitis C stadig kan være i blodet, men ikke manifesteret i analysen.
En særlig følsom PCR-metode afslører ultra hepatitis C selv i små mængder. En fluorescenshybridiseringsundersøgelse anvendes, hvilket er mange gange højere end standard PCR-systemer. Metoden anvendes i flere tilfælde:
- mistænkte skjulte former for hepatitis C;
- PCR-diagnostik bekræftede ikke patogenet, men der er antistoffer;
- i tilfælde af nyttiggørelse
- at opdage tidlig infektion.
Dekodningsanalyse
PCR-dekodningen af HCV påvirker den endelige beslutning, når der laves en diagnose, især med ultrametoden. Den største ulempe ved denne undersøgelse er streng overholdelse af sterile betingelser for prøven og materialerne. En lille afvigelse viser nogle gange unøjagtige analytiske konklusioner, komplicerer diagnoser og efterfølgende behandling. Analyse af PCR til bestemmelse af hepatitis RNA viser ikke altid selvtillid et billede af sygdommen, undertiden er unøjagtigheder tilladt og i begge retninger.
Diagnosticering af hepatitisvirus, det anbefales at anvende en omfattende undersøgelse.
Norm for indikatorer
Fraværet af JgM antistoffer mod viral hepatitis C i resultaterne af undersøgelsen betragtes som normen i analysen af polymerasekædereaktionen. Samtidig viser resultaterne af serologisk analyse tilstedeværelsen af antistoffer mod virus C, og dette ligger også inden for det normale område. En kvalitativ definition viser ikke intensiteten af sygdommen, den afslører kun årsagsforbindelsen for hepatitis C i RNA. Denne analyse gentages efter behandling for at bekræfte den faktiske genopretning.
afvigelser
Hvis JgM antistoffer mod HCV RNA er til stede, indikerer dette en udviklingsinfektion. Sygdommen på samme tid fortsætter akut eller kronisk, manifesteret i forskellige stadier. Hvis der registreres et fald i antallet af antistoffer, vil analysen indikere, at resultaterne af behandlingen blev opnået under genopretning. Der er yderst sjældne tilfælde af falske positive resultater i diagnostik. De findes hos kvinder under graviditet og hos mennesker med andre smitsomme sygdomme.
PCR diagnostik for hepatitis C
Hepatitis C er en betændelse i levercellerne, der opstår som følge af infektion med HCV-viruset (hepatitis C) ved kontakt med blodet af en inficeret person. Den genetiske kode for HCV-flaviviruset bæres af et RNA (ribonuclsyre) molekyle indeholdt i virusets struktur. Dette livstruende fænomen udmærker sig ved hemmeligholdelse i den første fase af patologien. Tidsintervallet mellem infektion og symptompåvirkningen (immunsystemets reaktion) kan være fra en måned til seks måneder. Som regel tager sygdommen en kronisk form og er svær at helbrede.
Moderne medicin giver dig mulighed for at diagnosticere patologi med mindre leverskade. De mest almindelige og effektive diagnostiske metoder omfatter PCR-analyse. Overvej i denne artikel, hvad det er, og hvilke former der findes.
Hvad er undersøgelsen
PCR-analyse for hepatitis C er en laboratorieundersøgelse, der registrerer flavirus, det genetiske materiale af ribonukleensyre (RNA). Det bestemmer antallet af RNA molekyler i blodet, kvaliteten af det biologiske materiale, den genetiske type HCV flavirus.
PCR-metoden for hepatitis C gør det muligt at registrere minimumsværdien af flavirus før dannelsen af antistoffer som regel kort efter infektion.
Undersøgelsen omtales ofte som RNA-analyse, da den detekterer ribonukleinsyrepartikler med en størrelse på 30-60 nm indeholdt i flavaviruset.
Undersøgelsen udføres som følger: På en tom mave giver patienten blod fra en vene, som derefter testes ved forskellige metoder:
- Real-time PCR udføres på en lukket automatiseret måde og har en lavere grænse for detektion af RNA-virus, svarende til 15 IE / ml;
- COBAS AMPLICOR med en følsomhed på 50-100 IE / ml.
Jo højere tærsklen for følsomheden af den diagnostiske teknik er, jo større er chancerne for at finde det laveste virusindhold i det biologiske materiale, der er under undersøgelse.
Hvilke typer analyser bruger
En analyse, der har været anvendt i flere årtier, hedder PCR-hepatitis, og det kan detekteres ret let og hurtigt. I medicin er der to metoder til reaktionen, fundamentalt forskellige fra hinanden:
- kvalitative metode afslører tilstedeværelsen i det biologiske materiale af den genetiske kilde til en bestemt virus;
- kvantitativ analyse måler antallet af genetiske stoffer, som gør det muligt at bestemme scenen i patologien eller vurdere effektiviteten af det terapeutiske kursus
- genotyping bestemmer hvilken type virus der er til stede i kroppen.
Generelt hjælper en blodprøve med at identificere viremias natur og patogenens genetiske type. Forskningen udføres som regel 1 gang afhængigt af graden af følsomhed i diagnosesystemet. Om nødvendigt udføres retesting ved anvendelse af et ultrasensitivt reagens.
PCR af høj kvalitet
Hvad er højkvalitets PCR RNA for hepatitis C? Essensen af reaktionen ligger i nærvær af hepatitis-RNA-sekvensen, og reaktionen er kun mulig i nærvær af virale proteiner med lignende etymologi i ELISA. I sammenligningsprocessen detekteres belastningen og mulig skade på leverområdet.
Et særpræg ved denne metode er evnen til at detektere selv tilstedeværelsen af et separat gen.
Det skal bemærkes, at patienten efter at have modtaget resultaterne af PCR- og ELISA-testene kræver en passende behandling, uanset hvad det endelige immunoassayresultat var. Positiv indikerer infektion, og PCR-negativ angiver et reduceret antal viruspartikler i forhold til følsomhedsniveauet.
Der er flere forhold, som påvirker produktionen af en negativ PCR og ELISA:
- mangel på passende materialeindsamlingsbetingelser
- den resulterende analyse indeholder kontaminering;
- i tilfælde af en tidlig injektion af heparin til patienten.
Patienten behøver ikke at følge visse regler for blodprøvetagning til PCR-analyse. I dette tilfælde afhænger kvaliteten af denne analyse af den medicinske professionel, der udfører proceduren. Evnen til at fastslå sygdommens tilstedeværelse (især i den akutte form) fremkommer inden for få uger efter infektion.
Kvantitativ analyse
En kvantitativ test anbefales til påvisning af viral belastning umiddelbart inden dannelsen af yderligere terapi og kroppens reaktion. Processen med blodprøveudtagning udføres på samme måde som med højkvalitets PCR og ELISA, den eneste betingelse er fraværet af muligheden for at ryge patienten før proceduren.
Med hensyn til de egenskaber, der er opnået ved undersøgelsen af data, er den øgede belastning kendetegnet ved indikatorer fra 800000 IE / ml, lav - 400000 IE / ml. Tilstedeværelsen af et virus i patientens krop er angivet ved PCR for hepatitis er ikke en negativ kvalitativ test.
Denne form for forskning gør det muligt at bestemme, hvor farlig patienten er for de mennesker omkring ham. For eksempel viser identifikation af et højt niveau en øget infektivitet hos patienten. Desuden bidrager analysens resultater til at formulere den mest effektive behandling og bestemme, hvor meget den eksisterende behandling anses for effektiv.
Testets hurtige negative respons indikerer succesen for den valgte teknik, og den langsomme indikerer behovet for justeringer og brugen af mangesidig behandling.
Processen med at tage analyseproceduren afhænger af den specifikke dag i sygdomsforløbet. Den første bestemmelse udføres den første dag efter at patienten er optaget på hospitalet, så gentages proceduren 4, 12 og 24 uger efter at have taget medicin.
En kvantitativ analyse viser således, hvilken behandling der er den mest effektive, varigheden af den tilgængelige behandling og patientens fare i forhold til andre mennesker.
genotypebestemmelse
I undersøgelsen af materialeanalyse er det vigtigt at bestemme nøjagtigheden af virusgenotypen, som finder sted. I øjeblikket er der 11 sorter af hepatitis C-viruset, som igen indeholder visse underarter.
Alle disse arter reagerer forskelligt på forskellige behandlinger, med individuelle sorter, der er absolut resistente overfor mange lægemidler.
Genotypen gør det muligt at bestemme og vise levertilstanden. Det er ikke ualmindeligt, at resultaterne "ikke skrives" i resultaterne, hvilket betyder at viruset i patientens blod ikke påvises af dette testsystem. Dette kan detekteres, hvis en bestemt genotype ikke stemmer overens med denne zone. I en sådan situation tages analysen gentagne gange, og et mere følsomt system bruges til at studere materialet.
Ultrafølsom metode
Den ultrasensitive metode er nødvendig i visse tilfælde, når diagnosen hepatitis ikke kan udføres ved andre metoder, og når man skal tage en analyse, bestemmes den behandlende læge:
- hvis du har mistanke om forekomsten af hepatitis C-virus hos patienter med et skjult udvalg af sygdommen
- tilstedeværelsen af antistoffer mod hepatitis C-viruset, ikke bekræftet ved PCR-diagnostik;
- for at bestemme kvaliteten af effektiviteten af den valgte behandlingsmetode og bekræfte elimineringen af sygdommen.
Sensibiliteten af denne metode er meget højere end de almindeligt anvendte, men denne metode udelukker ikke at opnå falske resultater, både positive og negative. I en sådan situation er det vigtigt at kontrollere procedurens kvalitet og muligheden for kontaminering af selve materialet.
Forklaring af PCR-analyse
Afkodningen af analysen udføres på basis af de præsenterede materialer, mens laboratorieforskningsresultaterne indbefatter visse data beskrevet ovenfor.
Transkriptet kan inkludere en positiv PCR-polymerasekædereaktion og en negativ ELISA i analysen, hvilket betyder at patienten ikke har tegn på hepatitis C i blodet, men tidligere har han overført den akutte form af sygdommen. Som regel bruger man sig til at anvende PCR testindikatorer ved diagnosticering.
Sammenfattende ovenstående kan det konkluderes, at under analysen er det vigtigt at overholde alle regler og anbefalinger, således at de opnåede resultater er så nøjagtige som muligt, og på grundlag af de opnåede data er det muligt at bestemme effektiviteten af den anvendte terapi og den yderligere chance for fuld genopretning.
Gennemførelse af en PCR-analyse for hepatitis C og afkodning af resultaterne
Hepatitis C PCR-analyse er en undersøgelse, hvis hovedformål er at identificere årsagsmaterialets genetiske materiale. Analysen afslører sygdomsfremkaldende middel ved anvendelse af polymerasekædereaktionen. Denne diagnose har en høj grad af nøjagtighed, specificitet til at detektere fravær eller tilstedeværelse af en viral infektion.
Essensen af diagnosen
For at udføre en PCR-analyse til bestemmelse af hepatitis C-viruset fra en patient tages venøs blod, hvilket potentielt indeholder RNA (ribonukleinsyre) HCV af det ønskede virus.
PCR-testen for hepatitis C indebærer en procedure for tilsætning til patientens blodpartikler:
- primere (korte kunstigt syntetiserede regioner af det nødvendige gen);
- specielt enzym (RNA polymerase).
Efter prøveudtagning sendes det biologiske materiale til forskning til laboratoriet. En del af blodet er nødvendigt til direkte PCR-analyse, den anden sendes til test af ELISA. Enzymet er i stand til på kort tid at øge antallet af genetisk materiale af patogenens virus. I et specielt apparat udføres flere cykler af varme- og køleprocesser. I det sidste trin sammenlignes det opnåede materiale med virusets gener, og der konkluderes om tilstedeværelsen eller fraværet af patologi i patientens krop.
Essensen og udførelsen af PCR analyse i laboratoriet. Filmet af SiberianMedicalLaboratory.
Typer af forskning
Der er 3 typer diagnostik, som gør det muligt at bestemme tilstedeværelsen af hepatitis C-virus i kroppen:
- genotypebestemmelse;
- kvalitet;
- kvantitativ.
Kvalitativ metode
Diagnose af hepatitis C med en kvalitativ metode er anvendelig for patienter, i hvilke antistoffer mod virus påvises i blodprøven. I tilfælde af tilstedeværelsen af den akutte fase af HCV RNA kan sådanne diagnostiske foranstaltninger bestemme tilstedeværelsen af sygdommen inden for 1-2 uger efter infektion. I løbet af denne periode kan antistoffer mod hepatitis C endnu ikke udvikles.
Kvantitativ metode
En kvantitativ diagnostisk metode anvendes til at bestemme virusets koncentration i blodprøver. En sådan test for viremia (grad af koncentration) gør det muligt at bestemme antallet af enheder af viralt RNA nøjagtigt. Slutresultatet udtrykkes i det tilsvarende volumen. Hvis vi taler om kvantitativ analyse, måles indikatorerne i 1 ml (1 cub. Cm).
Den virale belastningsparameter betyder sygdommens infektionsniveau, det vil sige afspejler graden af "infektiøsitet" af patienten. I praksis betyder det, at jo højere koncentrationen af viruset i blodet er, desto større er chancerne for patienten for at inficere andre med hepatitis C. En kvantitativ forskningsmetode giver dig også mulighed for at fastslå kvaliteten og effektiviteten af behandlingen.
genotypebestemmelse
Genotyping afslører mutationer af sygdomsfremkaldende middel. Før der ordineres en behandlingsplan, bestemmes virusgenotypen: Behandlingens kvalitet og varighed afhænger af den. For eksempel er effektiviteten ved behandling af sygdom af type I-type 60%, i tilfælde af II, III-type - ca. 80%.
Fordele ved Hepatitis PCR-analyse
Blandt de vigtigste fordele ved proceduren er:
- Muligheden for tidlig diagnose. PCR-analyse er i stand til at påvise tilstedeværelsen af et virus i de tidlige stadier af infektion.
- Lav fejlresultater. Den studerede biologiske ressource giver dig mulighed for at diagnosticere en sektion af genetisk materiale, der er karakteristisk for kun én type virusinfektion. Denne omstændighed gør det muligt at forhindre falske diagnostiske resultater.
- Høj grad af følsomhed. PCR-analyse er i stand til at påvise RNA af viruset i små mængder, hvilket også gør det muligt at spore latente infektioner i tide.
Indikationer for
Test for PCR for hepatitis C er nødvendigt, hvis det foreligger:
- at have kontakt med syge mennesker, hvilket kan føre til infektion;
- symptomer på levercirrhose (udvidelse af milten, ukarakteristiske ændringer i leverens størrelse, påvisning af venøs plexus på underlivet under huden);
- positive resultater af ELISA;
- øget aktivitet af AST og ALT (manifesteret i den biokemiske analyse af blod);
- behovet for at kontrollere antiviral terapi
- den indledende fase af behandlingen for behovet for at etablere en viral belastning;
- gennemførelse af det afsluttende stadium af terapi for at udelukke mulige tilbagefald
- patienten har hepatitis B for at udelukke udviklingen af en blandet leverskade.
Sådan forbereder du dig på bloddonation til PCR-forskning
Forberedelse til PCR-analyse omfatter følgende anbefalinger:
- blod bliver taget om morgenen;
- analysen udføres på tom mave, så det er tilrådeligt at tage en pause mellem den sidste fødeindtagelse på 8-10 timer;
- et par dage før diagnosen bør udelukkes fede, krydrede og stegte fødevarer, alkoholholdige drikkevarer og rygning;
- en dag før analysen bør man afholde sig fra tung fysisk anstrengelse, udelukke klasser i gymnastiksalen eller swimmingpoolen.
Analyseresultater: normer og afvigelser
Analysen selv er ikke langsigtet, og den højt kvalificerede specialist hepatolog eller infektionssygdomme dekrypterer resultaterne af PCR for hepatitis C. På baggrund af analysens resultater diagnosticeres patienten.
For at korrekt dechiffrere resultaterne af undersøgelsen tages der hensyn til indikatorerne
- biokemisk analyse af blod;
- ultralyddata;
- biopsi resultater.
Fortolkning af kvantitativ analyse
Når man opnår resultaterne af PCR-kvantitativ analyse, tages følgende indikatorer i betragtning:
Diagnose med PCR til hepatitis C
Ikke alle ved, hvorfor de bruger den PCR diagnostiske metode til hepatitis C. En af de mest almindelige grupper af sygdomme er smitsomme sygdomme i mave-tarmkanalen. Maven (sår), tarmene (colitis, enteritis) og leveren (hepatitis) påvirkes mest.
Blandt alle ovennævnte organer pålægges den største byrde på leveren. I legemet er leverens rolle ekstremt vigtig:
- Næsten alle metaboliske reaktioner finder sted i leveren (det er her alle former for vitale komponenter dannes, som gør det muligt for kroppen at fungere fuldt ud).
- Leveren er det vigtigste afgiftningsorgan. Med hjælp (især gennem galde) fjernes mange substrater, der kan forårsage forgiftning og føre til alvorlige konsekvenser.
Desværre overvåger mange mennesker ikke deres helbred, hvorfor leveren begynder at lide. Hepatitis af forskellige ætiologier (viral, giftig) udvikles normalt.
Definition af hepatitis
Viral hepatitis indtager et vigtigt sted blandt leversygdomme. Sværhedsgraden af sygdomsforløbet, behandlingens kompleksitet sætter dem først og fremmest blandt patologien af dette organs anden karakter.
Al hepatitis er opdelt i akut og kronisk. Hepatitis A og B er klassificeret som akut. Blandt den kroniske hepatitis C kommer først.
Denne sygdom er forårsaget af hepatitis C-viruset. Et karakteristisk træk er, at sygdommen kan vare i lang tid uden nogen kliniske manifestationer.
Det overføres hovedsageligt gennem blodet. Med blodstrømmen kommer virussen i leveren, hvor den begynder at formere sig i sine celler. Som følge af virionsakkumulering opstår ødelæggelsen af den inficerede hepatocyt. Som reaktion herpå begynder antistoffer at blive produceret, som begynder at angribe resterne af hepatocytter. På grund af dette udvikles en pulje mod leverceller over tid, hvilket forværrer sygdommens forløb.
På grund af det faktum, at sygdommen er mild asymptomatisk eller asymptomatisk, og kliniske tegn kun forekommer, når cellerne er signifikant påvirket, kræver denne sygdom oprettelsen af diagnostiske metoder til at opdage dets tilstedeværelse og træffe passende foranstaltninger.
Diagnose af hepatitis C: kvalitative og kvantitative analyser
I øjeblikket anvendes der til diagnosticering af hepatitis C sådanne metoder som leverbiopsi og immunogram.
De giver dig mulighed for direkte at bestemme tilstedeværelsen af inficerede hepatocytter (leverbiopsi) eller specifikke antistoffer mod berørte celler (immunogram). Der er dog en metode, der giver dig mulighed for pålideligt at bestemme tilstedeværelsen af selve viruset. Dette er PCR-polymerasekædereaktion.
Essensen af denne metode ligger i, at der under visse omstændigheder forekommer produktion af RNA-kæder. Dette skyldes, at der er fragmenter af en viral partikel i blodet eller den pågældende biopsi. Når man forbinder dem med nogle molekyler i mediet, forekommer syntese af kæder komplementære til viralt RNA. I deres efterfølgende analyse og sammenligning med den kendte nukleotidsekvens af hepatitis C-viruset er det muligt at bestemme om viruset er til stede i kroppen, og om leverskade er til stede.
PCR udføres efter påvisning af specifikke antistoffer mod hepatitisvirus i blodet. Efter testen er resultatet - RNA er "detekteret" eller "ikke detekteret". Lejlighedsvis kan han sige "ikke nok materiale" - i dette tilfælde er retesting for hepatitis C nødvendigt.
Hvis antallet af virale partikler er mindre end det krævede minimumsbeløb, så kan vi sige, at der ikke er hepatitis, og minimal mængde genetisk materiale kunne være "forvirret" på grund af efterligning af genetisk materiale eller nogle nukleotidsekvenser, der kunne falde sammen med virussen.
- Med PCR kan der observeres et negativt resultat, når der faktisk er viruspartikler i blodet, men de er så små (infektion opstod for nylig, eller der var forudgående analyse af langvarig og intensiv antiviral terapi), at testsystemet simpelthen ikke kunne bestemme deres koncentration normalt. RNA - "ikke registreret."
- Hvis PCR har et positivt resultat, er der så mange viruspartikler i blodet, at deres antal overskrider testsystemets lavere følsomhedstærskel. I dette tilfælde er der stor risiko for at udvikle en smitsom proces (eller den er allerede til stede på et ret avanceret stadium). Normalt er en høj mængde virus allerede en indikation for behandling og efterfølgende levertransplantation.
Nogle gange kan en test blive falsk positiv eller falsk negativ.
Et falsk negativt PCR-resultat af hepatitis observeres i det tilfælde, hvor nogle komponenter er til stede i reaktionsmediet, der hæmmer dannelsen af kopier af den virale partikel. På grund af dette er det ikke muligt at opnå et ægte billede af blodets tilstand, hvilket bidrager til virusets passage og sygdommens fremgang. Tilstedeværelsen af heparin i blodet kan også påvirke reaktionen (ved at reducere blodets relative viskositet). Forkert fortolkning af analysen er mulig, selvom betingelserne for transport og opbevaring af det undersøgte materiale ikke blev opfyldt.
Falske positive resultater, når hepatitis C diagnosticeres, resulterer PCR oftest, når røret eller arbejdsmiljøet er forurenet. Derudover kan positive resultater observeres med tilstedeværelsen af hepatitisvirus fra andre grupper (på grund af krydsreaktion).
Kvalitativ analyse af PCR til påvisning af hepatitis C
Tilstedeværelsen i blodet af et stort antal kryoglobuliner har også direkte indflydelse på PCR's adfærd. På grund af dette er det afgørende at bestemme deres koncentration i blodet, før de testes for hepatitis C for at opdage forvrængning af resultatet i forvejen og forhindre det.
Efter disse tests bliver det klart, om der er virale partikler i blodet. Ved bestemmelse af dem anbefales det at starte straks antiviral terapi for at bremse procesens progression. I modsætning til hepatitis B er der ingen fuldstændig kur mod hepatitis C; sygdommen går kun ind i latent stadium og begynder at gå langsommere. Leverskader er uundgåeligt. I sidste fase af processen, når leveren ikke længere kan klare sin funktion, kan det kræve sin transplantation.
Behandlingen udføres hovedsageligt med to lægemidler - interferon og ribavirin.
Beviste deres effektivitet ved at bremse processen med nederlag af hepatocytter. Undervejs er infusionsterapi nødvendigvis ordineret for at lette leverets arbejde.
Alle patienter, der har set en stigning i antallet af virale partikler i blodet, er nødvendigvis registreret hos en hepatolog. Adskillige gange om året anbefales det at gennemgå en forebyggende undersøgelse for at bestemme procesens progression og rettidig påvisning af indikationer for transplantation. Derudover er det muligt at anvende hepatoprotektorer, selvom lægernes meninger er forskellige. Nogle mener, at disse stoffer giver dig mulighed for at suspendere processen og beskytte de stadig upåvirkede hepatocytter; andre er overbeviste om, at der ikke er nogen mening at tage dem, og intensiv antiviral terapi bør udføres.
Hepatitis C tilhører således kategorien af sygdomme, hvis identifikation giver nogle vanskeligheder. Forbedring af diagnostiske metoder samt tidlige forebyggende undersøgelser vil reducere forekomsten af denne sygdom. Også vigtigt er forebyggelsen af denne sygdom. Man bør omhyggeligt undgå kontakt med blod, nægte at tage stoffer, først da vil denne sygdom blive udryddet. Det vigtigste i forebyggelse og behandling er patientens bevidste holdning til deres helbred.
PCR-undersøgelse af hepatitis C: typer, indikationer, transkription
Viral hepatitis C er en alvorlig sygdom, der opstår med leverskader. I 80% af patienterne bliver det kronisk. Viruset multiplicerer i leveren celler - hepatocytter - og forårsager deres død. Døde væv erstattes af bindevævsfibre, fibrose udvikler sig.
Efterhånden som fibrose udvikler sig, er leveren ikke i stand til at udføre sine funktioner, levercirrhose begynder, hvilket er farligt for dets komplikationer: forøget tryk i portalvejsystemet, gastrointestinal blødning, svækket blodkoagulation, mentale forandringer på grund af skade på hjernekernerne ved giftige produkter.
Årsagen til sygdommen er infektion med en virus fra familien Flaviviridae, som tilhører typen af RNA-vira. Dette betyder, at det genetiske materiale, ved hvilket patogenerne af patogenet syntetiseres, kodes i ribonukleinsyremolekylet. Infektion forekommer gennem blod, seksuelt og fra en gravid kvinde til fosteret. Desværre kan en tilstrækkelig stor tid passere mellem infektion og begyndelsen af antistofproduktion - fra to uger til seks måneder. Dette tillader ikke at bestemme infektionen med ELISA og begynde behandling på et tidligt stadium.
Hvad er PCR-analyse?
PCR er en metode til molekylær analyse, som gør det muligt at detektere patogenets genetiske materiale allerede i den første uge efter infektion ved hjælp af polymerasekædereaktion. Undersøgelsen har høj specificitet, nøjagtighed og giver ikke blot mulighed for at bestemme tilstedeværelsen eller fraværet af virussen, men også dens koncentration og genotype.
Til undersøgelsen tages en patients blod, hvor virus RNA muligvis kan være placeret. Primerne tilsættes til de kunstigt syntetiserede regioner af det ønskede gen af lille længde, og RNA polymerase er et specielt enzym, der gentagne gange øger mængden af patogenets genetiske materiale. Ved hjælp af et specielt apparat udføres flere varme- og kølecykler. Derefter analyseres materialet og sammenlignes med kendte gener af viruset, på grundlag af hvilket der konkluderes om tilstedeværelsen eller fraværet af infektion.
Typer af PCR-analyse for hepatitis C
Der er tre typer af PCR-analyser:
- Kvalitativ analyse af PCR. Den første fase af undersøgelsen. Det giver dig mulighed for at identificere virusets genetiske materiale i blodet.
Kvantitativ analyse af PCR. Tillader dig at bestemme viral belastningen - koncentrationen af patogenens genetiske materiale i en milliliter blod. Denne undersøgelse udføres inden behandlingsstart, og derefter i den første, fjerde, tolvte og (hvis kurset er lang) 24-ugers behandling for at vurdere dets effektivitet.
Indikationer for PCR-analyse for hepatitis C
PCR-undersøgelsen er ordineret i følgende tilfælde:
- kontakt med en syg person, hvor infektion kan forekomme
- positiv enzymimmunoassay;
- tegn på levercirrhose: en ændring i leverens størrelse, en forstørret milt, udseendet af en subkutan venøs plexus på underlivet;
- Udseendet af symptomer på leverskader: smerter i højre underliv, gulning af huden;
- øget aktivitet af ALT og AST i den biokemiske analyse af blod;
- inden behandlingen påbegyndes for at bestemme viral belastning
- at overvåge effektiviteten af antiviral terapi
- efter behandling for at kontrollere tilbagefald
- i nærvær af diagnosticeret hepatitis B, for at udelukke blandet leverskade.
Forklaring af PCR-undersøgelser på hepatitis C
Afkodning af PCR-analyse og enzymimmunoassay for hepatitis C bør udføres af en specialist på hepatolog eller infektionssygdomme. Analyse af resultaterne af PCR er nødvendig i kombination med data om biokemisk analyse af blod, biopsi og ultralyd. Kun en kvalificeret læge vil være i stand til at analysere forskningsresultaterne og på grundlag af dem foreskrive den korrekte behandling.
Dekodning af kvalitativ analyse.
I det analyserede biologiske materiale fandt patogenens genetiske materiale. Infektion bekræftet.
Infektionen er fraværende, eller mængden af patogen-RNA er under følsomhedsgrænsen.
Afkodning af kvantitativ analyse.
Normal sats for raske mennesker. Det betyder, at testmaterialet ikke indeholder Hepatitis C RNA, eller dets koncentration er under undersøgelsens følsomhedstærskel.
RNA-koncentrationen er under kvantificeringsområdet. Disse resultater fortolkes meget omhyggeligt, korrelerer dem med data fra andre undersøgelser, ofte genstudier.
Niveauet af viral belastning ved en given koncentration anses for lav. Normalt betyder et fald i mængden af virus, at terapien er vellykket.
Mere end 8 * 10 ^ 5 IE / ml
Niveauet af viral belastning ved en given koncentration anses for høj.
Mere end 2,4 * 10 ^ 7 IE / ml
Mængden af RNA er over den øvre grænse for kvantificeringsområdet. Det er umuligt at drage konklusioner om graden af viral belastning med dette resultat. Normalt i sådanne tilfælde gentages testen med fortynding af en blodprøve.
Afkodning af genotyping.
RNA af en bestemt genotype detekteret
Hepatitis C-virus af en bestemt genotype og subtype blev påvist i biomaterialet. Resultatet er kodet i romertal og latinske bogstaver, for eksempel - 1a, 2b. I alt er der syv genotyper og syvogtres subtyper, men i Rusland er der kun tre første typer.
Hepatitis C virus RNA detekteret
RNA blev fundet i blodet af en sjælden genotype for Rusland, som ikke kan tilskrives den første, anden eller tredje type. Mere forskning er nødvendig.
Dette resultat indikerer at patienten er sund, eller at mængden af patogen-RNA'et er for lille.
Det er muligt, at PCR-analyse for hepatitis C er negativ, og enzymbundet immunosorbentassay genkender antistoffer mod viruset. Det betyder, at patienten havde akut hepatitis C og genvundet alene. Ca. 20 tilfælde af infektion resulterer i spontan opsving, hvis patientens krop har tilstrækkelig modstand mod infektionen.
Selv om PCR er meget nøjagtigt, kan dets resultater blive forvrænget i følgende situationer:
- blod blev transporteret til laboratoriet under uhensigtsmæssige betingelser, temperaturen blev overtrådt;
- biomaterialeprøven var kontamineret;
- der var resterende spor af heparin og andre antikoagulantia i blodet;
- Undersøgere viste sig at være hæmmere - stoffer, der nedsætter eller stopper polymerasekædereaktionen.
Fordelene ved PCR over andre metoder
- Diagnose i de tidlige stadier. PCR detekterer det genetiske materiale af det forårsagende middel. Ved hjælp af immunofluorescensanalyse kan kun immunoglobuliner identificeres - stoffer, som kroppen producerer som reaktion på en infektion. I tilfælde af hepatitis C infektion kan mellemrummet mellem infektionen og begyndelsen af immunresponset være flere uger og måneder, på dette tidspunkt vil ELISA være ineffektivt. PCR vil give et svar i den første uge efter infektion.
Lav sandsynlighed for fejl. I det undersøgte materiale bestemme området for genetisk materiale, som er karakteristisk for kun en type patogener. Dette eliminerer falske resultater. Når ELISA-fejl er mulige, da samme type antistof kan frigives mod forskellige vira, kaldes sådanne antistoffer tværsantistoffer.
Sådan forbereder du dig på bloddonation til PCR-forskning
Til PCR-analyse af hepatitis C opsamles venøst blod. Normalt tages to portioner blod fra patientens vener ad gangen: den første sendes til PCR og den anden ved ELISA. Dette gøres for at nøjere vurdere, hvor meget en patient er inficeret med en virus, og hvordan immuniteten kæmper imod det.
Normalt er patienten forpligtet til at overholde følgende regler:
- en blodprøve tages om morgenen;
- Intervallet mellem det sidste måltid og bloddonationen skal være otte til ti timer;
- to eller tre dage før analysen er det nødvendigt at opgive stegte og fede fødevarer og alkohol;
- i 24 timer før analysen skal patienten undgå fysisk anstrengelse: bære ikke vægt, gå ikke til gymnastiksalen eller swimmingpoolen.
PCR kvantitativt for hepatitis C
Hepatitis C-viruset kan formere sig i blodlegemer og forårsage lymfoproliferative sygdomme. På grund af flere mutationer svækker kroppens immunforsvar, genotyper og subtyper af viruset. Med den korrekte og rettidige bestemmelse af en bestemt type afhænger effektiviteten af antiviral terapi. Faren for infektion er, at sygdommen er asymptomatisk. Kun 15 procent af 100 kan opleve kvalme og opkastning, vægttab og feber.
Hepatitis C virus detektion
Standardhastigheden for hepatitis C er i størrelser fra 40 til 60 nm, med de fleste lipider, leverskader som følge af et akut eller kronisk forløb af sygdommen. Hepatitis C, nemlig RNA-viruset fra Togaviridae-familien, er ekstremt resistent, overføres ved blodtransfusion eller brugen af ikke-sterile genstande, utilstrækkelige hygiejneforsyninger mv. Kvantitativ analyse giver dig mulighed for at undersøge blodet og identificere den genetiske struktur af det inficerede virus.
Til hepatitis C og dens genotyper blev bestemt, foretage en kvantitativ analyse. Afhængigt af analysatoren kan bestemme de tre niveauer af forekomsten af RNA-virus.
Undertyper kan producere forskellige modifikationer, så analysatorens specificitet og følsomhed skal være hundrede procent. Udover at detektere sygdommen hos en patient er det nødvendigt at bestemme graden af dens sværhedsgrad. Nogle laboratorier har ikke alle data om RNA-virus dekodning, der er mulighed for falsk positivt svar.
Forskning på hepatitis C vil være mere præcis, når man studerer disse indikatorer:
AlAT, AsAT; Alkalisk skjold; LDH.
Ved at henlede opmærksomheden på resultaterne af disse indikatorer og kroppens generelle tilstand vises et resultat, der viser graden af infektion, formen og antallet af hepatitis C-celler i blodet. Dette bidrager til helingsprocessen og effektiviteten af antiviral terapi.
Typer af analyse for hepatitis C
En multidimensionel kædereaktion (PCR) giver en ide om antallet af DNA-partikler i patientanalyser taget under korrekt identifikation af det infektiøse middel.
Årsagsmidler til smitsomme sygdomme kan forekomme. En infektion i leveren, som hepatitis C, kan behandles i vores tid, når den påvises rettidigt. Hvis en virus er mistænkt, udføres PCR-analyse.
Da lang tid symptomerne på viruset kan maskeres, kan en person ikke mærke sygdommens begyndelse. Men med en grundig undersøgelse i 60-70% af tilfældene opdages hepatitis C, den første analyse, som er ELISA, følger PCR diagnosen. Analysen udføres i visse perioder for at bestemme sygdomsstadiet og foreskrive den passende behandling. At undvære det, uden at anvende alle disse procedurer, er det muligt at blive vaccineret mod hepatitis.
Analysen, herunder PCR-diagnostik, giver et billede af sygdommen, hvor aktiv virussen er i forskellige udviklingsperioder.
For det første er der en kvalitativ analyse, der kun bekræfter hypotesen om infektionen, og derefter en kvantitativ bestemmelse af belastningen på leveren. Den ideelle løsning ville være et negativt resultat for hepatitis C i patientens genetiske materiale.
Kvalitativ og kvantitativ analyse
Der er kvalitativ og kvantitativ analyse. Essensen af den første er, at den bestemmer forekomsten af infektion i blodet. Og det betyder, at virussen inficerer sunde leverceller. Når der findes antistoffer mod hepatitis C hos en patient, udføres en kvalitativ test straks. Den hastighed, som resultatet skal give, er "ikke detekteret i blodet". Ved bestemmelse af koncentrationen af en virus er der behov for at kende følsomheden af diagnosesystemet, da folk, der undergår antiviral terapi, kan foretage analysen. Analysatorens følsomhed bør ikke være mindre end 50 IE / ml.
Når der opdages en virus, foretages en kvantitativ analyse, det vil sige den virale belastning, som bestemmer virusets koncentration i blodet og sygdommens sværhedsgrad.
Viral RNA, som er i en vis mængde blod, defineres som normen i en hastighed på 1 ml pr. 1 cm kubisk. Efter kvantificering af viral belastning er det muligt at bedømme infektionsgraden i det stadig uinficerede miljø. Så snart koncentrationen af hepatitis C stiger i blodet, er det nødvendigt at isolere fra miljøet.
Det er vigtigt i de tidlige stadier at opdage graden af koncentration af hepatitis for at bestemme tempoet i rehabilitering. Hvis hyppigheden af hepatitis C overskrides med mere end 800.000 IE / ml, anses den for høj med en stigning på op til en million kritisk. Hvis det kvantitative interval er mindre end 400 tusind IE / ml, anses det, at infektion af de omkringliggende vil være mindre sandsynligt. Denne figur gør det klart, at hepatitis C er til stede i kroppen i meget små doser. Analysen kunne ikke bestemme den kvantitative værdi af virusets RNA-partikler, så den blev genudnævnt flere gange for nøjagtigheden af diagnosen.
Resultater af kvantitativ analyse
Opgaven med at bestemme mængden af viral belastning i patientens blod er identifikation af graden af infektion hos andre.
Hepatitis C test
giver dig mulighed for at vurdere effektiviteten af antiviral terapi, niveauet af infektiøsitet og antallet af inficerede væv.
Det er vigtigt at forhindre sygdomens fremgang, tage forebyggende foranstaltninger i tide, ordinere den korrekte behandling baseret på PCR-diagnostik. Hvis resultaterne af virusbelastningen ifølge resultaterne er mindre end 400 tusind IE / ml, så kan koncentrationen være minimal, hvilket indikerer en mulig fuld genopretning. Normen for et positivt resultat er fraværet af infektion.
Resultaterne af PCR-analysen:
Et positivt svar betyder en infektion i det biologiske materiale. Analysen tillader at bestemme det nøjagtige antal inficerede celler. Et negativt svar angiver fraværet af infektion, som omhyggeligt søges i kroppen.
Metoden til kvantitativ bestemmelse af hepatitis C er nøjagtig og informativ, udført på udstyr med høj følsomhed. Dekryptere resultaterne af analysen giver dig mulighed for at finde ud af om infektionen og dens specificitet, for at se det mindste antal inficerede celler på meget følsomme analysatorer.
False-positive eller modsatte resultater er sjældent givet af analysen, oftere sker dette i immunanalysestudier.
Hepatitis C er en af de mest farlige og vanskelige at diagnosticere virussygdomme. Til bestemmelse af sygdommen anvendes PCR-metoden for hepatitis C. Dette er en ny højteknologisk teknik, der gør det muligt at undersøge genetisk materiale for eksistensen af liv i de mindste partikler (molekyler) og de mindste mængder. Hepatitisvirus er meget vedholdende, det kan i lang tid leve i miljøet og er veletableret i menneskekroppen.
Hvad er PCR?
I dag er der et stort antal forskellige sygdomme. Og ikke et mindre antal metoder til deres beslutsomhed. Da infektionsmidler har lært at slå rod i miljøet og udvikle sig let, bruges de nyeste teknologier til at diagnosticere dem. Polymerasekædereaktion (PCR) er en hurtigere og mere præcis metode, der søger at finde sygdomsfremkaldende middel ved at øge delen af hepatitisvirus DNA i prøven signifikant. Om ham skriver ofte: leder efter en nål i en høstak og bygger derefter en stak nåle.
Typer af PCR-metode
Kvalitativ test vil hjælpe med at bestemme forekomsten af hepatitis C-virus i kroppen.
Allokere kvalitativ og kvantitativ analyse af hepatitis. For at afgøre om viruset er i kroppen, og dem, der har fundet antistoffer mod hepatitis C, udfører test af høj kvalitet. Afkodningsanalyse giver resultatet: "positivt"; "Negative". Negativ betydning betyder: enten en person er sund eller der ikke er nok agenter i blodet, og de kan ikke findes. Derfor er det værd at foretage en re-undersøgelse efter et stykke tid.
Et positivt resultat indikerer eksistensen af en infektion. Dette er næsten altid den nøjagtige værdi. Fejlagtige resultater afhænger normalt af den menneskelige faktor (ukorrekt opbevaring eller manglende overholdelse af procedurens regler). Når satsen er, er resultatet negativt. Før testning er der ingen særlige regler, skal du bare tage blod fra en vene.
Hvis det findes, udfør en kvantitativ analyse (viral belastning) - den giver numeriske værdier: hvor meget RNA af hepatitisvirus er på dette tidspunkt i det foreskrevne volumen af det undersøgte materiale. Med den aktive udvikling af infektion kan det detekteres 1-2 uger i en inficeret person. Blod er også normalt undersøgt, fordi agenser cirkulerer frit i den.
Egenskaber ved kvantitativ PCR analyse
Kvantitativ PCR hjælper dig med at vælge den mest effektive behandling af hepatitis C.
Forskellen i kvantitativ analyse er, at ikke alt det går. Kvalitativ - bestemmer tilstedeværelsen og kvantitativ - hjælper med bekræftelse af konklusionen "hepatitisvirus", prognosen for sygdomsforløbet og bestemmelse af behandlingsforløbet. Hvor effektiv terapien er, er antallet af RNA'er før og under behandlingen. Også med dets hjælp bestemme udnævnelsen af doser af stoffer.
Som regel produceres den inden behandlingens begyndelse. De vigtigste indikationer kan være:
bestemmelse af viral belastning og kontrol af antiviral terapi, højkvalitets PCR fundet antistoffer af hepatitis C, find akut og kronisk hepatitis C, eksistensen af blandet hepatitis ved planlægning af behandling, hvis en kvalitativ undersøgelse stadig finder sygdommens tilstedeværelse efter den tolvte uge af behandlingen.
Se også, hvilken viral belastning i hepatitis: lav terapi udføres med held; øget - behandlingen er ikke effektiv og skal ændres.
Hvad udføres på forskellige stadier af sygdommen?
Analysen vil hjælpe med at overvåge resultaterne af terapi i alle stadier af behandlingen.
I forskellige faser af sygdommen udføres en undersøgelse for at give en gennemgang af fordelene ved behandling og planlægning af dens varighed. Med gode reaktioner på terapi er det forkortet. Ellers vil ved langsom tilbagetrækning af virussen forlænges. PCR for hepatitis gør 1,4, 12, 24 ugers behandling. Når indikatorer ikke falder efter 12 uger, konkluderer de, at terapi ikke er egnet til denne organisme. Denne analyse bruges til at bestemme, hvor aktiv infektionen er, og hvor sandsynlig det er at overføre det. For eksempel er der under graviditeten risiko for at inficere en baby. Efter terapi identificere risikoen for gentagelse af sygdommen.
udskrift
Efter undersøgelsen kan analysen dechifrere ikke i tal, men med ordene: "under måleområdet" og "ikke detekteret". Kvantitativ PCR er mere kvalitativ følsom. Konklusionen "ikke registreret" kan sige, at infektionen ikke blev fundet. "Under måleområdet" - testen fandt ikke viruset, men det er i en lille værdi. I denne situation skal du lave en anden undersøgelse.
Viral belastning er bestemmelsen af antallet af infektiøse RNA i en foreskrevet mængde blod (1 ml = 1 kubikmeter kvantitativt). Formuleret i internationale målinger IE / ml. Separat laboratorier angiver kopier / ml. Forskellige testsystemer kan dechiffrere oversættelsen af komponenter i internationale værdier på deres egen måde. Tabel 1. Dekryptering af kvantitativ analyse af virus RNA
Diagnose af hepatitis omfatter en række tests for at bestemme tilstedeværelsen af en virus i blodet. En måde at opdage en sygdom på er en forskningsmetode som PCR for hepatitis C. Hvad er det, hvorfor er analysen af PCR for hepatitis lige så vigtig som den udføres og afkodes?
Hvad er det
Polymerasekædereaktion eller PCR anvendes til at diagnosticere mavesår, colitis, enteritis. Men den største fordel er, at det hjælper med at opdage i kroppen både hepatitis C-viruset og antistoffer mod det, som har evnen til ikke at forårsage reaktioner i immunsystemet på grund af deres evne til at mutere.
Undersøgelsen og dens essens ligger i skabelsen af visse betingelser under hvilke kædereaktionen af hepatitis RNA forekommer. Hvis der i sammenligning med nukleotidsekvensen af hepatitis C-viruset findes tilfældigheder, hvilket tyder på, at der er viruspartikler i blodet, og der opstår desintegrationsprocesser i leveren. Hvis mængden af virus er under et bestemt niveau, laves en negativ diagnose, og hvis højere, en positiv en.
Der findes to typer blodprøver ved hjælp af PCR-metoden til hepatitis: kvantitativ analyse og kvalitativ analyse.
Kvantitativ PCR, som nævnt ovenfor, bestemmer koncentrationen af RNA i hepatitisviruset. Desuden er han i stand til at give information om intensiteten med hvilken patologien udvikler sig og effektiviteten af den foreskrevne behandling. En kvantitativ analyse af hepatitis C er yderst vigtig, fordi det løser modstand mod virkningen af antivirale lægemidler og giver dig mulighed for at justere behandlingen.
Når patienten gennemgår et behandlingsforløb, hjælper PCR med at bestemme den videre rækkefølge af aftaler. I nogle tilfælde er behovet for yderligere undersøgelser. For eksempel, hvis niveauet af ALP er forøget (men ikke mere end 2 gange inden for seks måneder), og transskriptionen af analysen indikerer en viral belastning over 105 IE / ml, ordineres patienten en biopsi. Hvis en kvantitativ analyse af PCR afslører svær inflammation og fibrose, ordineres patienten et behandlingsforløb med antivirale lægemidler.
I situationer hvor et stort antal virale partikler kombineres med et højt ALT, skal patienten straks behandles uden yderligere diagnostiske foranstaltninger.
Tag denne test og find ud af, om du har leverproblemer.
Kun kvalificerede og erfarne specialister kan tyde kvalitativt i kvantitativ analyse af blod til hepatitis, og moderne teknologier hjælper med at gøre dette med en lav koncentration af viruset i blodet.
Kvalitativ analyse af PCR er rettet mod at bestemme og bekræfte den faktiske tilstedeværelse af viruset i kroppen. Det udføres, når antistoffer mod hepatitis opdages i blodet. Det er en kvalitativ analyse af hepatitis, der garanterer nøjagtigheden af resultatet med 100% og giver dig mulighed for at foretage en diagnose i de tidlige stadier af sygdommen, hvilket gør det muligt at starte kampen mod hepatitis allerede i de første uger efter infektion og øger chancerne for fuldstændig opsving (i tilfælde af sygdomstype B).
Fordele ved PCR
I undersøgelsen ved hjælp af PCR og dechifrering af en blodprøve for hepatitis, kan du også bestemme patogenens genotype. I alt er der 6 genotyper af viruset og et stort antal subtyper, men i vores region er 1, 2 og 3 genotyper blevet almindelige.
Andre fordele ved denne type diagnose er:
- høj nøjagtighed af de opnåede indikatorer og lav sandsynlighed for fejl i dem
- høj følsomhed over for virale partikler i blodet
- muligheden for at identificere flere patogener på én gang
- diagnose af intracellulære patogene mikroorganismer med høj antigenvariation;
- At arbejde med dekodningsanalysen for hepatitis gør det muligt at opdage skjulte strøminfektioner.
Hvem er udpeget
Følgende kategorier af mennesker skal passere PCR-analysen for hepatitis:
- gravide kvinder;
- sundhedspersonale;
- potentielle blod- og organdonorer;
- dem, der har karakteristiske tegn på sygdommen
- HIV-inficerede individer;
- misbrugere;
- promiskuøse sexarbejdere.
Hvordan udføres analysen og er det nødvendigt at forberede sig på det
Blodprøveudtagning til PCR udføres fra en vene. Som regel sker dette om morgenen, før personen har spist, for efter at have spist et måltid skal mindst 8 timer passere. I ekstreme tilfælde kan blod tages til undersøgelse om dagen eller om aftenen, men tidsgabet mellem analyse og fødeindtag skal være mindst 5 timer.
Den menneskelige faktor kan kvantitativt påvirke resultaterne: deres nøjagtighed i nogle tilfælde falder fra 100% til 95%, derfor er det nødvendigt at forberede sig på bloddonation på forhånd. Kvaliteten af biomaterialet til analyse vil være hensigtsmæssigt, når patienten følger følgende regler:
- før du donerer blod, kan du kun drikke rent vand
- to dage før undersøgelsen er det nødvendigt at nægte at acceptere stegte og fede fødevarer samt alkoholholdige drikkevarer
- en dag før besøget på laboratoriet bør stoppe med at tage medicin. Hvis dette ikke er muligt, er det afgørende at underrette laboratorietekniker og den behandlende læge;
- dagen før du skal undgå stressede situationer og fysisk anstrengelse
- ultralyd, røntgen og instrumentale undersøgelser bør ikke udføres kort før bloddonation;
- i en time før analysen skal du afstå fra at ryge
- 20 minutter før du donerer blod, skal du blive distraheret, roen ned og trække vejret ud.
Hvis et barn under 5 år passerer undersøgelsen, skal forældrene sørge for, at han drikker kogt vand hvert 10. minut i en halv time, før man tager biomaterialet.
Dekryptering af de modtagne data
Afkodningen af analysen kan repræsenteres i ord (i tilfælde af en kvalitativ undersøgelse), for eksempel "ikke detekteret" eller "under ændringsområdet". I det første tilfælde indikerer dette, at infektionen ikke blev registreret. I det andet - at viruset er til stede, men i små mængder. Denne situation kræver genforskning.
Viral belastning bestemmes af mængden af infektiøs RNA og kaldes IE / ml eller kopier / ml.
En normal indikator (norm) for en kvantitativ analyse for hepatitis C er intervallet fra 1,8x102 til 2,4x107 IE / ml.
Koncentrationen af virus i blodet kan være:
- lav: fra 600 IE / ml til 3x10 4 / ml;
- medium: fra 3x10 4 IE / ml til 8x10 5 IE / ml;
- høj: mere end 8x10 5 IE / ml.
Kvantitativ og kvalitativ analyse af PCR for hepatitis tillader at bestemme tilstedeværelsen af viruset i kroppen og niveauet af dets koncentration. En multidimensionel kædereaktion er i stand til at diagnosticere sygdommen i sine tidlige stadier, men for dette er det nødvendigt, at patienter så hurtigt som muligt vender sig til lægeinstitutioner for hjælp og nøje følger henstillingerne fra den behandlende læge.
Hepatitis C-viruset kan formere sig i blodlegemer og forårsage lymfoproliferative sygdomme. På grund af flere mutationer svækker kroppens immunforsvar, genotyper og subtyper af viruset. Med den korrekte og rettidige bestemmelse af en bestemt type afhænger effektiviteten af antiviral terapi. Faren for infektion er, at sygdommen er asymptomatisk. Kun 15 procent af 100 kan opleve kvalme og opkastning, vægttab og feber.
Hepatitis C virus detektion
Standardhastigheden for hepatitis C er i størrelser fra 40 til 60 nm, med de fleste lipider, leverskader som følge af et akut eller kronisk forløb af sygdommen. Hepatitis C, nemlig RNA-viruset fra Togaviridae-familien, er ekstremt resistent, overføres ved blodtransfusion eller brugen af ikke-sterile genstande, utilstrækkelige hygiejneforsyninger mv. Kvantitativ analyse giver dig mulighed for at undersøge blodet og identificere den genetiske struktur af det inficerede virus.
Til hepatitis C og dens genotyper blev bestemt, foretage en kvantitativ analyse. Afhængigt af analysatoren kan bestemme de tre niveauer af forekomsten af RNA-virus.
Undertyper kan producere forskellige modifikationer, så analysatorens specificitet og følsomhed skal være hundrede procent. Udover at detektere sygdommen hos en patient er det nødvendigt at bestemme graden af dens sværhedsgrad. Nogle laboratorier har ikke alle data om RNA-virus dekodning, der er mulighed for falsk positivt svar.
Forskning på hepatitis C vil være mere præcis, når man studerer disse indikatorer:
Ved at henlede opmærksomheden på resultaterne af disse indikatorer og kroppens generelle tilstand vises et resultat, der viser graden af infektion, formen og antallet af hepatitis C-celler i blodet. Dette bidrager til helingsprocessen og effektiviteten af antiviral terapi.
Typer af analyse for hepatitis C
En multidimensionel kædereaktion (PCR) giver en ide om antallet af DNA-partikler i patientanalyser taget under korrekt identifikation af det infektiøse middel.
Årsagsmidler til smitsomme sygdomme kan forekomme. En infektion i leveren, som hepatitis C, kan behandles i vores tid, når den påvises rettidigt. Hvis en virus er mistænkt, udføres PCR-analyse.
Da lang tid symptomerne på viruset kan maskeres, kan en person ikke mærke sygdommens begyndelse. Men med en grundig undersøgelse i 60-70% af tilfældene opdages hepatitis C, den første analyse, som er ELISA, følger PCR diagnosen. Analysen udføres i visse perioder for at bestemme sygdomsstadiet og foreskrive den passende behandling. At undvære det, uden at anvende alle disse procedurer, er det muligt at blive vaccineret mod hepatitis.
Kvalitativ og kvantitativ analyse
Der er kvalitativ og kvantitativ analyse. Essensen af den første er, at den bestemmer forekomsten af infektion i blodet. Og det betyder, at virussen inficerer sunde leverceller. Når der findes antistoffer mod hepatitis C hos en patient, udføres en kvalitativ test straks. Den hastighed, som resultatet skal give, er "ikke detekteret i blodet". Ved bestemmelse af koncentrationen af en virus er der behov for at kende følsomheden af diagnosesystemet, da folk, der undergår antiviral terapi, kan foretage analysen. Analysatorens følsomhed bør ikke være mindre end 50 IE / ml.
Når der opdages en virus, foretages en kvantitativ analyse, det vil sige den virale belastning, som bestemmer virusets koncentration i blodet og sygdommens sværhedsgrad.
Viral RNA, som er i en vis mængde blod, defineres som normen i en hastighed på 1 ml pr. 1 cm kubisk. Efter kvantificering af viral belastning er det muligt at bedømme infektionsgraden i det stadig uinficerede miljø. Så snart koncentrationen af hepatitis C stiger i blodet, er det nødvendigt at isolere fra miljøet.
Det er vigtigt i de tidlige stadier at opdage graden af koncentration af hepatitis for at bestemme tempoet i rehabilitering. Hvis hyppigheden af hepatitis C overskrides med mere end 800.000 IE / ml, anses den for høj med en stigning på op til en million kritisk. Hvis det kvantitative interval er mindre end 400 tusind IE / ml, anses det, at infektion af de omkringliggende vil være mindre sandsynligt. Denne figur gør det klart, at hepatitis C er til stede i kroppen i meget små doser. Analysen kunne ikke bestemme den kvantitative værdi af virusets RNA-partikler, så den blev genudnævnt flere gange for nøjagtigheden af diagnosen.
Resultater af kvantitativ analyse
Opgaven med at bestemme mængden af viral belastning i patientens blod er identifikation af graden af infektion hos andre.
Resultaterne af PCR-analysen:
- Et positivt svar betyder en infektion i det biologiske materiale. Analysen tillader at bestemme det nøjagtige antal inficerede celler.
- Et negativt svar angiver fraværet af infektion, som omhyggeligt søges i kroppen.
Metoden til kvantitativ bestemmelse af hepatitis C er nøjagtig og informativ, udført på udstyr med høj følsomhed. Dekryptere resultaterne af analysen giver dig mulighed for at finde ud af om infektionen og dens specificitet, for at se det mindste antal inficerede celler på meget følsomme analysatorer.
False-positive eller modsatte resultater er sjældent givet af analysen, oftere sker dette i immunanalysestudier.
Hepatitis C-virus er en virus, der indeholder et RNA-molekyle. Han er i stand til at undgå immunrespons af kroppen på grund af sin høje evne til at mutere. Der er seks hovedgenotyper af viruset og mange subtyper. I vores region fordeles 1, 2 og 3 genotyper hovedsageligt.
I 75-80% bliver sygdommen kronisk, hvilket forårsager leverfibrose, en tilstand, hvor levervæv erstattes af bindevæv. Fibrose fører igen til kræft eller cirrose. Hovedformen for overførsel af sygdommen er gennem blodet. Hvis en person har indikationer for afprøvning af hepatitis C, får han to grundprøver. Antistoffer mod viruset bestemmes, og i deres fravær menes det, at han ikke har hepatitis. Hvis der forekommer tilstedeværelse af antistoffer mod hepatitisvirus i blodet, udføres PCR-analyse.
RNA ved denne metode bestemmes i blodet inden for 10-12 dage efter infektion og indikerer, at viruset reagerer aktivt i kroppen. I løbet af denne periode er det simpelthen umuligt at opdage viruset på en anden måde, da det stadig ikke producerer specifikke antistoffer, og leverskader er ikke synlige med biokemiske test og biopsier.
Forskellige typer af PCR-undersøgelser
Polymerase kædereaktionsanalyse har visse fordele:
- I denne undersøgelse er viruset selv bestemt, og ikke dets metaboliske produkter. I dette tilfælde er det muligt at bestemme typen af patogen.
- Teknikken har høj specificitet på grund af det faktum, at kun en bestemt del af DNA bliver undersøgt, falder sandsynligheden for at få fejlagtige resultater.
- Det har en meget høj følsomhed, det er bestemt selv den mindste mængde virus i blodet.
Der er to hovedmetoder til at teste blod for hepatitis C ved hjælp af PCR: kvalitativ og kvantitativ analyse af PCR. Den kvalitative metode bruges til at bestemme om en virus er til stede. Enhver med antistoffer mod hepatitis er blevet detekteret i blodet, sådan en analyse udføres. Resultatet kan kun være af to typer: "detekteret" og "ikke detekteret", sidstnævnte værdi betragtes som normen.
Et positivt testresultat betyder, at fragmenter af virus-RNA'et blev fundet i prøven, hvilket igen indikerer at personen var inficeret med hepatitis. I tilfælde af et negativt resultat er to muligheder mulige: Der var ingen infektion eller koncentrationen er så lav, at den ikke er påvist ved denne teknik.
Den kvantitative metode adskiller sig væsentligt fra forskningen, i dets opgaver og i indikationer. Ikke alle patienter med hepatitis gennemgår en sådan analyse. Som andre har han visse mål. Bestemmelse af virusbelastning eller kvantitativ analyse af PCR for virus-RNA anvendes:
- til bestemmelse af virus-RNA i blodet og diagnosen "viral hepatitis";
- at forudsige kroniskhed af hepatitis og sygdomsforløbet;
- at overvåge antiviral behandling og beslutte om forlængelse, reduktion eller ændring i behandlingstaktik.
Undersøgelsen udføres i nærværelse af sådanne indikationer:
- Hepatitis C blev påvist ved en kvalitativ undersøgelse, og antistoffer blev påvist i blodet;
- med blandet hepatitis;
- hvis antiviral terapi er planlagt
- under og efter behandling for hepatitis C;
- i nærvær af kronisk og akut hepatitis C.
Prøven udføres for at estimere antallet af virusenheder i et givet volumen af en blodprøve på 1 cm3 eller 1 ml. Resultaterne er angivet i tal. Indikatorer anvendt: IE / ml, hvilket betyder international enhed pr. Milliliter og kopier pr. Ml, antallet af kopier af RNA i 1 ml af prøven. Jo højere kvantitative indikator for analysen er, jo større er sandsynligheden for overførsel af viruset til en anden person.
R-DNA er en forgrenet DNA-metode. Mere enkel og billig metode. Anvendes til flere prøver, har lav følsomhed, fra 500 IE / ml. Med sådan følsomhed er der en chance for ikke at identificere virussen, selv om den er til stede i blodet.
TMA er en transkriptionsforstærkningsmetode. Denne teknik registrerer nukleinsyrer i blodet. Det har lave omkostninger og høj følsomhed, fra 5-10 IE / ml. En forholdsvis ny teknik, der giver dig mulighed for at fremskynde og reducere omkostningerne ved testprocessen.
Resultaterne af den kvantitative analyse af definitionen af RNA-virus, præsenteret af laboratoriet, fortolkes som følger: