ELISA for viral hepatitis

9. marts, 2017, 16:25 Ekspertartikler: Nova Vladislavovna Izvochkova 0 3.608

For at detektere viral hepatitis i kroppen bruger medicin i vidt omfang et enzymimmunoassay baseret på påvisning af koncentrationen og typen af antigener ved anvendelse af antistoffer og enzymer. Det udføres i etaper, ved laboratorieundersøgelse, med høj nøjagtighed af indikationer. Afhængigt af mængden og klassen af antistoffer ændres farven og koncentrationen af enzymet, der anvender ELISA, og dermed lægen diagnosticerer sygdommen.

Hvad er ELISA?

Tilstedeværelsen af viral hepatitis i patientens krop bestemmes ved anvendelse af en serologisk metode til blodanalyse for tilstedeværelsen af HCV-virus og markører (organer og antistoffer) der angiver det. Enzymbundet immunosorbentassay (ELISA) undersøger forskellige vira, forbindelser med lav molekylvægt, makromolekyler, deres kvalitative og kvantitative indikatorer ved anvendelse af manifestationen af reaktionen på deres antigener. For at gøre dette skal du bruge enzymet som et mærke til signalregistrering. Det anvendes i stigende grad i medicin, fordi ELISA klart finder veldefinerede antigener, uden at forvirre dem med andre, har en høj følsomhed over for forekomsten af invasion af viral hepatitis.

Ulempen ved en sådan diagnose er manglende evne til at identificere årsagen til sygdommen, da metoden kun angiver reaktionen af kroppens immunsystem. Resultaterne af analysen påvirkes af den tidligere udførte vaccination. I 8 timer før analysen anbefales det at afholde sig fra at spise, nikotin, alkohol. Grundlaget for ELISA-testen er kroppens enzymatiske og immunrespons på virussen. Biologiske molekyler binder til cellen og dets elementer, mikroorganismer, registrerer virussen og arbejder derefter enzymer, der giver dig mulighed for at udtrykke immunresponset i en synlig og målbar parameter.

Indikationer for analyse

Viral hepatitis i kroppen kan forårsage kræft og levercirrose. Betydningen af rettidig diagnose er ubestridelig. Den primære diagnosemetode er ELISA-testen, som med stor nøjagtighed bestemmer tilstedeværelsen af HCV-viruset (IgM og IgG) og aktiviteten af dets sporstoffer. Mandatory tests for viral hepatitis pass:

Mennesker med risikogrupper (stofmisbrugere, personer med aids, medarbejdere hos læger og retshåndhævende institutioner).
Mennesker med akut eller kronisk hepatitis.
Gravide og planlægning graviditet kvinder.

ELISA anerkender sygdommen på ethvert tidspunkt. Resultaterne af analysen er i gennemsnit klar i 2 dage.

Kriterier der bestemmer betydningen af analyse

ELISA-test bestemmer tilstedeværelsen af antistoffer af klassen IgG, IgM, IgA. Ved diagnosticering af viral hepatitis er lægen ikke opmærksom på deres type, da tilstedeværelsen af en sådan manifestation af HCV-viruset allerede indikerer et akut eller kronisk stadium af sygdommen. I de tidlige stadier af sygdommen stiger niveauet af IgM (5 dage efter infektion); På den 15. - 20. dag optræder IgG antistoffer og kan forblive i humant blod i lang tid selv efter helbredelse; IgA - vises efter 10-14 dage, falder efter behandling.

Hvis IgG og IgA påvises efter brug af stoffer og deres niveau forbliver i samme hastighed - bæreren har en kronisk form for hepatitis. Et vigtigt kriterium for testen vil være en klar definition af den tilgængelige klasse af antistoffer og deres mængde. Baseret på dette kan du ikke kun vide om sygdommens tilstedeværelse, men også udviklingsstadiet. Påvisning af sådanne elementer i patientens blod gør det muligt at ordinere korrekt og rettidig behandling for at forhindre mere alvorlige konsekvenser.

Hvordan er det gjort?

Allokere direkte og ikke direkte ELISA test. Stadier direkte:

Indsamling af biologisk materiale og placering i specielle huller.
Inden for 15-30 minutter antigener er fastgjort til brøndens overflade.
Tilsætning af antistoffer til brøndene til antigenet fundet. Alle forlod i 1-5 timer.
Fjern ubundne antigener (hæld brøndens indhold).
Skyl brøndene med en særlig løsning.
Tilsæt enzymopløsning til brøndene. Lad i 30 minutter - 1 time.
Anvendelsen af kolorimetri (detektion af farve og koncentration af farven af brøndets indhold, sammenligning med indikatorer, der er direkte proportional med virusets koncentration).

Anvendelse til diagnose af indirekte ELISA vil give et mere præcist resultat.

Den indirekte ELISA-metode finder sted ved anvendelse af umærkede antistoffer til de fundne antigener og den efterfølgende tilsætning mærket til dem. Først tages blod fra patienten og spredes gennem brøndene i 15-30 minutter. (antistoffer er fastgjort med huller). Derefter introduceres umærkede antistoffer i dem i 1-5 timer (forbindelsen af antistoffer med antigener dannes - immunkomplekset). Derefter hældes faste mikroelementer fra brøndene og vaskes med en særlig løsning. I næste fase tilføjer laboratorietekniker mærket sporstoffer til brøndene i 15-30 minutter. (dette binder umærkede med mærket med dannelsen af det komplekse "antistof-antistof-antigen"). Ekstra (løs) fjernes igen under afløb og vask med opløsning. Næste er enzymet, der ændrer farve i 5-30 minutter. forbliver i hullerne, og farvedata sammenlignes med dataene i tabelindikatorerne. Indirekte ELISA er mere præcis.

Hvad viser en ELISA for viral hepatitis?

Immunoassay gør det muligt at påvise tilstedeværelsen af infektion (hepatitisvirus af enhver art, hiv, herpes, syfilis, cytomegalovirus, mæslinger, røde hunde, kussevirus, Epstein-Barr-virus), er en markør for autoimmune sygdomme, kræftceller. Indikerer krænkelse af reproduktive funktioner (ændringer i testosteron, prolactin, østradiol og progesteron), skjoldbruskkirtelfunktion, helminthedsangreb, klamydia. Effektivt til påvisning af ureaplasmose, kighoste, Dange virus, West Nile virus, Borrelia. Listen over definitioner er høj, indeholder mange elementer.

Bekræftelse af resultater

Bestemmelse af HCV-virusantigen med ELISA giver 98% nøjagtighed. Det bruges også til at retestere biologisk materiale med fuzzy tidligere indikatorer. Tilstedeværelsen af IgM antigener er ikke en indikator for akut hepatitis og kræver yderligere forskning. Når ELISA-testen gentages, falder resultaterne med 90-100%. I tilfælde af minimal uoverensstemmelse tages gennemsnitsværdien som indikator. For maksimal nøjagtighed hvad angår læger rådgive parallelt med at foretage en biokemisk analyse af blod. For at teste resultaterne efter enzymimmunoassayet kan du bruge andre diagnostiske metoder.

Forskning om viral hepatitis ved metoden ife

ELISA ved diagnosen viral hepatitis. Enzyme immunoassay kapaciteter

Specifik laboratoriediagnose af viral hepatitis er baseret på anvendelse af immunokemiske og molekylære biologiske forskningsmetoder. De vigtigste immunokemiske metoder er radioisotop eller radioimmun (RIA) og immunoassay (ELISA). Immunokemiske diagnostiske metoder er baseret på den specifikke interaktion af et antigen - et antistof med den efterfølgende identifikation af komplekset ved hjælp af særlige mærker. Det mest almindelige enzymimmunoassay.

De første rapporter om brugen af enzymimmunoassay. som en metode til bestemmelse af stoffer blev i 1971 samtidig offentliggjort af to forskningsgrupper - V. Van Weemen, A. Schuurs og E. Engvall, P. Perlmann. Enzymimmunassayet er baseret på følgende princip: På den faste fase, der hovedsagelig bruger overfladen af brøndene i en polystyrentablet, fastgøres antigenet af det infektiøse middel eller antistof (ofte en blanding af antistoffer) til antigener, der skal detekteres. Dette antigen eller antistoffer, der er fastgjort på den faste fase, kaldes immunosorbent.

Som et resultat af inkuberingen af immunosorbenten og testserumet i nærvær af et detekterbart middel bundet de til antigen-antistofkomplekset. Efter vaskningsproceduren, hvorunder ubundne antigener og antistoffer fjernes, udføres incubation med konjugatet. Som et konjugat til påvisning af HBsAg anvendes anti-HBs; i påvisning af antistoffer mod hepatitis C-viruset - antistoffer mod humane immunoglobuliner (antiviruskonjugat) mærket med peberrodperoxidase. Som et resultat af denne inkubation forekommer binding til de allerede eksisterende antigenkomplekser - antistoffet af det yderligere introducerede konjugat. Efter fjernelse af ubundet konjugat (vask), indføres substratet i brøndene. Ved anvendelse af et peroxidasekonjugat anvendes hydrogenperoxid som et substrat i kombination med en indikator, som oftest anvendes som orthophenylendiamin (OPD) eller tetramethylbenzidin (TMB). Resultatet estimeres fotometrisk.

Kvaliteten og pålideligheden af analytiske egenskaber ved enzymimmunoassaymetoden er kendetegnet ved et antal kriterier, der indbefatter følsomhed, specificitet, nøjagtighed og reproducerbarhed.

Følsomhed er den mindste mængde af et stof, som kan detekteres ved enzymimmunoassay. I dette tilfælde er den nederste grænse for følsomheden af denne metode koncentrationen af teststoffet i prøven, hvilket svarer til det mindste positive resultat af bestemmelsen, hvilket er statistisk signifikant forskelligt fra indikatorerne for bevidst negative prøver. Følsomheden af en IFTS afhænger af en række forhold, der er relateret både til testsystemets design (immunosorbentens affinitet, kvaliteten af ekstraktions- og buffersystemerne) og opløsningen og nøjagtigheden af registreringsmetoden.

Specificitet - evnen til at identificere nøjagtigt komponenterne til bestemmelse af hvilket dette enzymimmunoassay er designet. Specificiteten af ELISA bestemmes i høj grad af tværreaktionen af antistoffer eller antigener (dvs. sammensætningen anvendt som et immunosorbent) med nært beslægtede forbindelser såvel som sammensætningen af inkubationsmediet (matrixeffekt).

Korrektitet - korrespondancen mellem gennemsnitsværdien af resultaterne af gentagne bestemmelser af den samme kontrolprøve med den sande værdi af den målte parameter. Nøjagtigheden af bestemmelsen i ELISA afhænger af kvaliteten af testsystemet og kontrolprøven. For gode immunoassay test systemer er korrektitetsindikatorerne i området 90-110%. Den egenartede biomedicinske forskning i ELISA er umuligheden af at etablere den nøjagtige værdi, og derfor er gennemsnittet af flere ekspertlaboratorier taget som den sande værdi. Det statistiske kriterium for korrekthed er det aritmetiske gennemsnit og graden af dens afvigelse fra den sande værdi udtrykt som en procentdel.

Reproducerbarhed - Testsystemets evne til at vise de samme værdier med gentagne undersøgelser af samme prøve. Reproducerbarheden afhænger både af tilfældige fejl (fejl) under proceduren for indstilling af reaktionen og om kvaliteten af testsystemerne og nøjagtigheden af metoden til registrering af resultaterne. Det antages, at reproducerbarheden af de samme kontrolprøver af det samme selskab i forskellige laboratorier ikke bør overstige værdien af variationskoefficienten på 15%.

Der findes flere specifikke ELISA-ordninger til bestemmelse af virale hepatitismarkører: a) direkte enzymimmunoassay; b) indirekte enzymimmunoassay c) konkurrencedygtig hæmning c) "fælde" eller "capture" metode.

Af molekylære biologiske metoder til diagnosticering af viral hepatitis, polymerasekædereaktion og hybridisering anvendes mere almindeligt. Disse metoder, især PCR, gør det muligt at detektere meget små mængder af specifikt viralt DNA eller RNA og således dømme replikation og i nogle tilfælde replikationsaktivitet.

Hepatitis C blodprøve

Hepatitis C er en af de mest almindelige leversygdomme, der opstår, når de smittes med hepatitis C-viruset (HCV), som først kommer ind i kroppen, når det kommer i kontakt med blodet af en inficeret person. Der opstår kronisk og akut hepatitis C. Hos 70-80 procent af patienter med akut hepatitis C er der ingen symptomer på sygdommen, men i nogle tilfælde efter nogle tid efter infektion er der manifestationer af sygdommen, der udtrykkes i træthed, mavesmerter, appetitløshed, mørkdannelse urin, opkastning, kvalme, lynnedslag, gulsot, smerter i leddene. Symptomerne opstår som regel 6-7 uger efter infektion, men varigheden af tegn på sygdommens begyndelse varierer fra 2 uger til seks måneder. Hvis ovenstående symptomer opstår, skal du konsultere en smitsomme sygeplejerske og have en blodprøve for hepatitis C. Diagnose af hepatitis, der udføres i tide, kan registrere sygdommen i sine tidlige stadier og øge chancerne for genopretning betydeligt.

Når en hepatitis C-test er planlagt

Situationer, når en Hepatitis C-test er påkrævet:

under graviditet og familieplanlægning
patienter med symptomer på kronisk eller akut hepatitis
personen er i fare. Det drejer sig om læger, personer i fængsel, retshåndhævende myndigheder, folk, der bruger stoffer, har et stort antal seksuelle partnere, har aids, er i hæmodialyse og andre.

Forberedelse til hepatitis C-analyse

Særligt forberedelse til analyse af hepatitis C er ikke påkrævet. Til analyse tages blod fra en blodåre på en tom mave, samtidig skal mindst otte timer passere efter det sidste måltid.

Hepatitis C ELISA assays

Den første analyse, som regel foreskrevet til diagnosticering af hepatitis C - ELISA-test (enzymbundet immunosorbentassay). Hepatitis C ELISA-analyser gør det muligt at påvise tilstedeværelsen af antistoffer mod hepatitis C-viruset (anti-HCVAb) i blodet. Hvis resultatet af ELISA-testen er positivt, indikerer det forekomsten af kontakt af kroppen med hepatitis C-viruset. Men 40% af dem, der har en positiv ELISA, opdager ikke viruset i blodet. Dette fænomen kaldes et falsk positivt resultat. Også ved hjælp af ELISA kontrolleres donorblod.

RIBA for hepatitis C

RIBA-analysen for hepatitis C anvendes til at bekræfte et positivt ELISA-resultat. Den rekombinante immunoblottningsmetode (RIBA) er en mere præcis undersøgelse af tilstedeværelsen af antistoffer mod hepatitis C-viruset. Tilstedeværelsen af hepatitis C-virus i kroppen bestemmer heller ikke et positivt resultat, men bekræfter kun forekomsten af antistoffer.

Hepatitis C PCR test

For at detektere tilstedeværelsen af hepatitis C-virus i blodet (HCV RNA) og at foretage en diagnose, bruger de oftest analysen ved hjælp af polymerasekædereaktion (PCR). Denne undersøgelse gør det muligt at opdage med høj nøjagtighed tilstedeværelsen i blodet af selv en lille del af virussen. PCR-analyse for hepatitis C kan afsløre tilstedeværelsen af et virus allerede 5 dage efter infektion, længe før forekomsten af antistoffer. Når resultatet af PCR-analyse er positivt, betyder det, at der forekommer en aktiv infektion.

Der er sådanne variationer af PCR-analysen:

kvantitativ PCR, som gør det muligt at bestemme ikke kun faktumet af tilstedeværelsen af viruset, men også viral belastningen (mængden af viruset). Denne indikator er af stor betydning for at bestemme effektiviteten af behandlingen;
genotyping, der etablerer genotypen af hepatitis C-viruset, hvilket er vigtigt for at bestemme behandlingens varighed og taktik. Der er mere end 10 genotyper af hepatitis C-viruset, men for klinisk praksis er det nok at definere fem af de mest almindelige typer: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

Kvantitativ PCR-analyse udføres:

med en kvalitativ positiv test for tilstedeværelsen af hepatitis C-virus-RNA i serum;
til en nøjagtig vurdering af effektiviteten af behandlingen
at bestemme patientens behandlingstakt.

Der er intet direkte forhold mellem sværhedsgraden af hepatitis C og mængden af virus i blodet. Koncentrationen af virussen påvirker sygdommens infektivitet, dvs. jo større mængden af virus i patientens blod er, desto større er risikoen for overførsel af viruset, for eksempel gennem seksuel kontakt eller fra moder til barn. Effektiviteten af behandlingen afhænger også af virusets koncentration. Under behandlingen er en gunstig faktor en lav viral belastning, og en meget høj er ugunstig.

Genotypebestemmelse er udført:

med en kvalitativ positiv test for tilstedeværelsen af hepatitis C-virus-RNA i serum;
til en nøjagtig vurdering af effektiviteten af behandlingen
at bestemme patientens behandlingstakt
at forudsige kronisering af den infektiøse proces
at bestemme sygdommens progression.

Detektion af virusets genotype er af stor betydning for bestemmelsen af behandlingens varighed, hvilket er vigtigt, da interferon har en lang række bivirkninger og lav patienttolerance.

Dekodningsanalyse for hepatitis C

Normalt er virus-RNA, antistoffer mod dem og antigener helt fraværende. Tilstedeværelsen af antistoffer i blodet indikerer tilstedeværelsen af kronisk eller akut hepatitis C eller genopretningsperioden. Hvis HCV RNA er til stede i blodet, hvilket bestemmes ved PCR-analyse, indikerer dette tilstedeværelsen af en virus i blodet.

Med en forkert testteknik, transport og blodabnormaliteter kan PCR-analyse nogle gange vise falske positive resultater. Analyser af ELISA og RIBA i de tidlige stadier af sygdommen, når kroppen endnu ikke har produceret en tilstrækkelig mængde antistoffer, kan vise et falsk-negativt resultat.

Hvis der opnås positive resultater ved afkodning af testen for hepatitis C, er det nødvendigt at kontakte en infektionssygdomslæge og en gastroenterolog for yderligere diagnose og behandling.

Segmenterede neutrofiler sænket

Barnets blodplader er normale, forhøjet, sænket

Thyroid-stimulerende hormon TGT

Diagnose af hepatitis

Man kan ikke bestemme tilstedeværelsen af hepatitis i kroppen straks, da inkubationsperioden for sygdommen kan vare op til fire uger. Når de første tegn på sygdommen optræder, forekommer der radikale ændringer i blodets sammensætning i den berørte organisme: En biokemisk analyse rapporterer et alvorligt helbredsproblem og forekomsten af en patogen virus. Men for at lave en endelig diagnose er det ikke nok at donere blod til hepatitis, samt en detaljeret diagnose af hepatitis.

Laboratoriediagnose af hepatitis

Det er ønskeligt at udføre det efter slutningen af inkubationsperioden, således at lægen med den største præcision kan bestemme leversygdommen i kroppen. Ellers vil den foreskrevne behandling ikke give den ønskede terapeutiske virkning og endda forværre det fremherskende kliniske billede.

Diagnose af hepatitis A

Typisk begynder diagnosen af hepatitis A med et detaljeret spørgsmål om patienten og udnævnelsen af en række tests, der skal udføres hurtigst muligt. Dette er:

biokemisk blodprøve;
fuldføre blodtal
PCR-metode;
ELISA;
koagulation.

Hvis Botkin's sygdom skrider frem, så observeres et unormalt spring af bilirubin, AlAT og AsAT, thymolprøve i overensstemmelse med resultaterne af biokemisk blodanalyse. Desuden produceres specifik anti-HAV IgM, hvilket er en uoprettelig kendsgerning af tilstedeværelsen af hepatitis A.
Generelt bestemmes blodets analyse af nedbrydning af leukocytter, springet i ESR og lymfocytose. Og ikke desto mindre er den mest pålidelige PCR-metoden, som bestemmer indikatoren for RNA for den patogene virus.
Derudover undersøger lægen symptomerne på sygdommen, hvorefter den kan foretage en endelig diagnose og bryde igennem til den mest effektive behandling. Behovet for instrumentelt undersøgelse er yderst sjældent. Efter vellykket konservativ behandling under patientens indlæggelsesforhold og karantæne afventer en endelig tilbagesendelse, og hepatitis A genopstår ikke igen.

Diagnose af hepatitis B

For at bestemme forekomsten af hepatitis B-virus er det også muligt i henhold til resultaterne af laboratorietester, og for det første er det nødvendigt at donere blod til hepatitis. Af natur har den patogene virus tre hovedantigener - HBsAg, HBcAg og HBeAg, til hvilke antistoffer produceres i kroppen. Hovedtræk ved dette kliniske billede er ELISA - ELISA, som blot afslører specifikke markører for hepatitis B.
Umiddelbart bør det præciseres, at antigenet HBsAg fremkommer i blodet selv inden de første symptomer på hepatitis og pålideligt er bestemt i isterioden. En negativ test udelukker imidlertid ikke forekomsten af hepatitis B og kræver derfor anvendelse af en lige så effektiv polymerasekædereaktionsmetode (PCR).
Hvis du har mistanke om, at hepatitis B er obligatorisk, er en biokemisk blodprøve, som anbefales at passere i første omgang. Udførelse af en biopsi af leveren og ultralyd af peritoneale organer diskuteres individuelt, men når sygdommens historie er meget klar, er der ikke behov for kliniske undersøgelsesmetoder.

Lever-ekkogram i autoimmun hepatitis i stadiet af kronisk hepatitis

Diagnose af hepatitis C

For at gøre denne diagnose er det ikke nok at donere blod til hepatitis, da viruset kan sejre i kroppen i latent form. Og ikke desto mindre er de vigtigste laboratorietest alle de analyser, der præsenteres ovenfor, såvel som den ekstra ydeevne af en leverbiopsi. Denne mikroskopiske undersøgelse af biologisk materiale (i vores tilfælde et stykke levervæv) bestemmer omfanget af den patologiske proces og vævsfibrose. Materialprøveudtagning udføres under lokalbedøvelse, komplikationer af en sådan procedure er yderst sjældne i medicinsk praksis.
Hvis mistanke om hepatitis C er den vigtigste metode til klinisk undersøgelse et ultralyd af peritoneale organer. Årsagen er enkel: sygdommen manifesteres ofte af en visuel forandring i den berørte lever, ændringer i dets struktur og størrelse. På denne måde kan du bestemme:

størrelsen af leveren, milten, bugspytkirtlen og galdeblæren
patologiske ændringer i disse organer;
generel blodgennemstrømning i peritoneale organer
optimalt område til udførelse af en leverbiopsi.

Denne metode til klinisk undersøgelse bestemmer alle organets fokale patologier på mikroskopisk niveau. Hvis leveren er repræsenteret på skærmen i grå skala, kræves øjeblikkelig biopsi, da den grå farve visualiserer det berørte væv af det "menneskelige filter".

Forebyggelse af hepatitis

Da sygdommen ikke manifesterer sig straks, er det langt fra alle de kliniske billeder, der går videre til øjeblikkelig behandling. Patienten kan simpelthen ikke være opmærksom på eksistensen af en patogen virus i kroppen, som igen spredes hurtigt ind i blodbanen og inficerer sunde leverceller.
For at undgå en sådan tragisk skæbne anbefales det at overholde alle forebyggende foranstaltninger. En sådan årvågenhed vil reducere risikoen for sygelighed betydeligt og spare dig for alvorlige sundhedsmæssige problemer i fremtiden. De grundlæggende regler for forebyggelse er præsenteret nedenfor:

vask dine hænder efter gaden;
at underkaste forarbejdning af friske grøntsager og frugter af høj kvalitet;
at udføre alle forebyggende vaccinationer, der er angivet i den årlige kalenderplan
selektiv holdning til seksuelle partnere
undgå kontakt med syge mennesker;
Brug kun engangssprøjter og vær særlig opmærksom på blodtransfusionsstationer.

Det anbefales også at regelmæssigt (hver sjette måned) donere blod til hepatitis, for at sikre, at virussen ikke trænger ind i kroppen og ikke smitter de engang sunde leverceller. Hvis diagnosen er fastslået, skal den straks blive dispenserkonto og følge alle anbefalinger fra en specialist.

Publikationsforfatter:
Syropyatov Sergey Nikolaevich
Uddannelse: Rostov State Medical University (Rostov State Medical University), Institut for Gastroenterologi og Endoskopi.
gastroenterolog
Læge i Medicinsk Videnskab

ELISA-metode til påvisning af hepatitis

Moderne medicin er kendt for mange sygdomme i leveren. HCV (viral hepatitis C) er blandt de mest almindelige og farlige, fordi denne infektion ofte udvikler asymptomatisk og fører til kritiske komplikationer, selv døden. Det er derfor afgørende, at den tidlige diagnose af sygdommen, som udføres ved hjælp af forskellige metoder, herunder enzymbundet immunosorbentassay (ELISA) til påvisning af antistoffer mod viruset i blodet.

Erklæring om HCV infektion til diagnose af hepatitis

I laboratoriediagnostik til påvisning af hepatitis C (HCV infektion) anvendes to typer metoder:

Serologisk baseret på påvisning af antistoffer mod hepatitis C-viruset (anti-HCV), også kaldet ELISA (enzymbundet immunosorbentassay). Det sigter mod at detektere anti-HCV (IgM og IgG markører), der anvendes til screening og til diagnosticering af hepatitis C. Begge disse markører kan påvises i blodet (plasma) i forskellige kombinationer, hvilket kræver en ordentlig klinisk fortolkning. For at bekræfte tilstedeværelsen af anti-HCV udføres en RIBA-test (rekombinant immunoblot).
Molekylærbiologisk, rettet mod påvisning af RNA-virus. HCV RNA testen er ordineret til følgende kategorier af patienter:
- med identificeret anti-HCV;
- uden detekterede anti-HCV, men med etablerede epidemiologiske og kliniske data, der kræver udelukkelse af den akutte form af HCV.

RNA af viruset kan detekteres i blodet så tidligt som 14 dage efter infektion, det vil sige før forekomsten af anti-HCV, der forekommer i de første 2-3 måneder.

For endelig bekræftelse af diagnosen (især når kun en af de to markører for HCV-infektion er påvist), anbefaler eksperter, at gentagne tests af anti-HCV og HCV RNA efter en vis tid skal udføres.

Påvisning af hepatitis ved ELISA

Til gennemførelse af tidlig diagnosticering af viral hepatitis, især asymptomatiske, anicteriske former i serum påvises tilstedeværelsen af virale proteiner (antigener) eller antistoffer mod dem (produceret af immunsystemet, når virus ind i kroppen) ved hjælp af enzymbundet immunosorbentassay (ELISA). Dette er en universel metode til immunologisk diagnose, dens essens ligger i undersøgelsen af interaktionen mellem "antigen-antistof". Det er meget udbredt i mange lande i verden.

Bestemmelse af hepatitis ved hjælp af ELISA tillader ikke kun at etablere en nøjagtig diagnose, men også at vurdere sygdommens art samt at vælge en kompetent og effektiv behandling ved hjælp af traditionelle lægemidler (interferon, ribavirin), direkte lægemidler (Sofosbuvir, Daclatasvir) og deres generiske indiske og kinesiske produktioner.

Når det er muligt, suppleres diagnosen viral hepatitis med ELISA med PCR (polymerasekædereaktion), hvilket gør det muligt at bestemme tilstedeværelsen af hepatitisvirus i RNA.

Hvor præcist er enzymimmunoassaymetoden

Ifølge eksperter er nøjagtigheden af ELISA-metoden 95%, dvs. hos 95 ud af 100 patienter, der anvender enzymimmunoassay, kan forekomsten og mængden af HCV-antistoffer - IgM og IgG detekteres i blodet. Hvis resultatet er positivt, er det muligt at diagnosticere HCV-kontakt med kroppen (ikke selve viruset, nemlig tilstedeværelsen af antistoffer i blodet til det, hvilket kan være resultatet af en allerede overført sygdom).

På trods af den høje følsomhed af det enzymbundne immunosorbentassay (ELISA), kan der dog ikke konstateres virus hos 40% af patienterne med et positivt resultat, hvilket indikerer et tvivlsomt eller falsk positivt resultat.

For at bekræfte rigtigheden af ELISA-resultaterne anvendes RIBA-metoden (rekombinant immunoblotting) til mere præcist at studere detektion af antistoffer mod HCV.

Anti NCV kernetest

Effektive undersøgelser til bestemmelse af tilstedeværelsen af antistoffer mod hepatitisvirus omfatter en anti-HCV-kerne, som anvendes som en bekræftende test, når "usikre" resultater opnås.

Hvis anti-HCV-kerne er detekteret i serum ved en fortynding på 1: 1000, forventes et positivt resultat at blive diagnosticeret, dvs. sygdommen er til stede.

Hvis prøverne ved en fortynding på 1: 1000 er negative, ved en fortynding på 1: 200 positiv, er det nødvendigt at undersøge tilstedeværelsen af viralt RNA. I dette tilfælde er der sandsynligvis ingen HCV infektion.

Det er vigtigt at forstå, at antistoffer i kroniske former for HCV konstant detekteres, og ved eliminering (fjernelse fra kroppens celler) af viruset vedvarer de i 4-8 år eller mere. Tilstedeværelsen af anti-HCV indikerer derfor ikke altid infektion i kroppen og tillader ikke objektive konklusioner om aktiviteten af processen. For at opnå nøjagtige data om viral belastning, grad af leverskader, infektionens varighed og forskellen mellem akutte og kroniske sygdomsformer anbefales det at anvende definitionen af antistoffernes spektrum for forskellige HCV peptider. Det er også vigtigt at observere deres kvantitative og kvalitative dynamik.

ELISA analyse - fra screening for HbsAg til kompleks diagnostik

Med indførelsen af moderne teknologier inden for medicin vokser mulighederne for immunokemiske diagnostiske metoder, som hurtigt og præcist kan genkende sygdommen, når andre metoder er magtesløse. At forstå, at hepatitis B-viruset er i stand til at være i kroppen i en meget lav koncentration, hvor den ikke kan detekteres selv ved en så pålidelig metode som PCR, gør det nødvendigt at tage et nyt kig på problemet med diagnosticering af denne sygdom og at sætte pris på mulighederne for en immunoassay.

I dette materiale vil vi i detaljer analysere alt, der vedrører denne type laboratorieforskning. Du vil lære, hvad et enzymimmunoassay er, og hvordan det udføres, hvad det australske antigen er og hvordan det bestemmes, hvad de uforståelige forkortelser Hbs ag, Hbcor, i mellemtiden og deres rolle i at dechifrere analysen og også få mange nyttige og interessante oplysninger.

Artikelens indhold:

Generelle oplysninger om ELISA

ELISA (forkortet ELISA) er en laboratoriediagnostisk metode, der kan detektere både antigener og antistoffer fra en lang række infektioner, herunder hepatitis B. Nuværende viden om virusets egenskaber og egenskaberne ved kroppens immunrespons gør det ikke kun muligt at opdage infektionen, men også at identificere det stadium, effektivitet af vaccination og evaluering af effektiviteten af behandlingen.

Essensen af enzymimmunoassay

ELISA er baseret på reaktionen "antigen-antistof" eller rettere dens egenskaber.

Som reaktion på invasionen af et fremmed stof (antigen), som især er proteiner fra virussen, producerer kroppen beskyttende proteiner - antistoffer. Antistoffer indtræder i en kompleks reaktion med antigenet, der blokererer dets aktivitet.

Vi vil tale mere om antigener og antistoffer nedenfor, men nu skal vi bemærke, at for hvert antigen er der strengt individuelle eller som læger siger homologe antistoffer. Således vil vi, hvis vi vil opdage et specifikt antigen i blodet, bruge en diagnostisk tablet med antistoffer til det. Hvis der er et antigen i blodet, vil det reagere med antistoffer, der kan påvises på forskellige måder. Og omvendt. Hvis vi vil finde nogen antistoffer, så har vi brug for en tablet med det passende antigen.

Oftest er den diagnostiske værdi af bære kun de antistoffer, som du kan diagnosticere næsten enhver infektion. Imidlertid er den særprægede af hepatitis B-virus, at hovedrolle i diagnosen spilles af et af antigenerne - det australske antigen.

Hvordan er IFA

Overvej en typisk ELISA-procedure for et specifikt eksempel, når du vil identificere antistoffer mod patogenet.

Til diagnostik anvendes en tablet med 96 brønde, som er formættet med det tilsvarende antigen. Yderligere er proceduren som følger:

serum påføres alle celler;

homologe antistoffer reagerer med antigenet og fastgøres til pladen;

tablet vasket, fjernelse af ubindede antistoffer;

så introduceres en enzymatisk etiket i cellerne - et stof der reagerer med antistoffer og forårsager farvning af indholdet i cellen.

Dette er standard ELISA-proceduren med farvning, som f.eks. Anvendes i immunokromatografiske teststrimler.

ELISA er ikke begrænset til den kvalitative bestemmelse af antistoffer eller antigener af patogenet. Jo flere antistoffer er indeholdt i tableternes celler, desto mere intense farves opløsningen. Ved at sammenligne sin optiske densitet med kontrollen kan moderne udstyr ganske nøjagtigt beregne koncentrationen af antistoffer pr. Volumenmængde. Således udføres en kvantitativ ELISA, måleenheden for måling, hvor de oftest er enhederne af optisk densitet (EOP).

Immunokemiluminescerende analyse

I dag findes der flere dusin typer ELISA, som hver især har et foretrukket omfang. Den mest populære i diagnosen hepatitis B er immunokemiluminescerende analyse.

Den enzymatiske etiket til denne analyse er ikke chromatiner, som i standard ELISA, men specielle stoffer - fosfor, der forårsager komplekset at gløde i ultraviolet lys.

Ved hjælp af en speciel enhed - luminometer kan du nøjagtigt bestemme emissionsniveauet og som følge heraf koncentrationen af det ønskede stof.

Ved hjælp af ELISA-metoder bestemmer næsten alle eksisterende antigener af hepatitis B-viruset og antistoffer mod dem.

Hepatitis B virusantigener: Hbs, Hbe og Hbc

Udtrykket antigen (antigen) kommer fra to engelske ord: antistof - antistof og generator - producent. Under antigenet forstår man således ethvert stof, der forårsager dannelsen af antistoffer i kroppen. De mest almindelige antigener er proteinforbindelser.

I dag er tre antigener af hepatitis B-virus kendt: hbsag, hbc og hbe.

Australsk antigen

Proteinet, der er en del af den ydre skal af patogen hepatitis B, blev detekteret længe før opdagelsen af selve viruset. Dette antigen fik sit navn, fordi det først blev identificeret fra de oprindelige indbyggere i Australien. Imidlertid blev proteinet først betragtet som et antigen, men et helt normalt element af blod blandt de indfødte, og bevidstheden om dens forbindelse med leversygdomme kom lidt senere.

Langvarig konservering af antigenet i blodet og fraværet af antistoffer indikerer muligheden for dannelsen af HBeAg-positiv kronisk hepatitis B

I dag i den professionelle litteratur er navnet "australsk antigen" praktisk taget ikke fundet og er blevet erstattet af den internationale forkortelse - HbsAg (hepatitis b overflade antigen - hepatitis B overflade antigen). Derudover kan du finde forkortelser hbs antigen eller bare hbs. Enhver af disse forkortelser er acceptable og kan suppleres ved optagelse af HBV eller HBV - hepatitis B-viruset (hepatitis b-virus).

Hepatitis B-virusoverfladeantigenet har en bemærkelsesværdig egenskab, der gør den til en uundværlig diagnostisk markør - dens koncentration i blodet kan nå meget høje niveauer, op til halv milligram per milliliter blod. Det skyldes, at kun en lille del af den nye HBsAg, der dannes under reproduktionen af hepatitis B-virus, går til opbygningen af membranerne af nye virale partikler, og resten - cirkulerer frit i blodet. Som følge heraf kan antallet af hbs partikler i blodet overstige antallet af virioner hundredtusinder gange.

Denne funktion gør det australske antigen til den vigtigste markør i screeningsdiagnosen af hepatitis B, som findes i blodet så tidligt som 4-6 uger efter infektion. Som antistoffer dannes, erstattes overflademigenet gradvist af dem. Hvis HBsAg efter 6 måneder vedvarer, indikerer dette overgangen af infektionen til kronisk form.

For nylig, da det blev muligt at bestemme koncentrationen af hbs hbv, er dens rolle i diagnosen vokset endnu mere, da afhængigheden af antigenet kan skelne mellem kronisk hepatitis B (HBV) fra en sund bærestatus og overvåge effektiviteten af behandlingen.

Kerneantigener

I kernen af virussen - nucleocapsid - er proteiner der styrer reproduktionen af viruset HBcoreAg og HBeAg.

HBcoreAg, som også kan kaldes HBCore-antigen, hbc eller kerneantigen, kan kun findes i leverenes væv direkte i kernerne af hepatocytter. Dette antigen er ikke detekteret i blodet og har ingen diagnostisk værdi.

Strukturen af hepatitisvirus

HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - tværtimod spiller en vigtig rolle i diagnosen. HBeAg og HBcoreAg er nære slægtninge. De har en stor lighed mellem strukturen og afviger primært i molekylernes rumlige position. I modsætning til HBcore er HBe ikke en del af nukleokapsidvæggen og cirkulerer frit i blodet.

HBe's rolle i den infektiøse proces er endnu ikke tilstrækkelig klar, men egenskaberne ved dets adfærd og deres forhold til den smitsomme proces er allerede blevet tilstrækkeligt undersøgt. HBeAg angiver den aktive reproduktion af virussen og giver dig mulighed for pålideligt at bestemme fasen af kronisk CHB-HBeAg-positiv eller HBeAg-negativ.

HBe kan detekteres i blodet allerede i inkubationsperioden for akut hepatitis B virus (HBV), mens en høj koncentration af HBeAg i 3 uger sandsynligvis indikerer en trussel om kronisk proces. Koncentrationen af HBe er direkte relateret til indholdet af dansk partikler (såkaldte hepatitis B viruspartikler) - jo højere mængden af HBe er, desto højere er koncentrationen af HBV DNA i blodet.

HBeAg er en vigtig markør for sygdommens infektiøsitet. Blodet af HBeAg-positive patienter er meget mere smitsomt end HBeAg-negativt. For eksempel når gravid kvinder positive for HBe og Hbs, sandsynligheden for at overføre infektion til barnet når 50%, mens sandsynligheden for en sådan hændelse i HBe-negative, men Hbs af positive mødre er 10-30%.

Hbe bestemmer løbet af kronisk hepatitis. HBeAg-positiv kronisk hepatitis B har en langt mere ugunstig prognose med hensyn til udvikling af cirrose.

Det er nok alt hvad du behøver at vide om HBV antigener, og vi går videre til den anden gruppe af hepatitis B markører - antistoffer.

Hvad betyder et positivt eller negativt EIA-resultat for hepatitis C?

For nøjagtigt at bestemme typen af hepatitis efter en foreløbig diagnose for at forudsige sygdomsforløbet for at etablere stadiet for dets udvikling ved anvendelse af forskellige serologiske undersøgelser. De mest nøjagtige data opnås efter enzymimmunoassayet. Ved hjælp af ELISA hepatitis C, diagnosticeret i 95% af tilfældene. Det er denne analyse, der gør det muligt at opdage antistoffer af Hepatitis C antivirus (HCV antivirus) og ikke blot vurdere aktivitetsgraden af den patologiske proces, men også effektiviteten af antiviral terapi, der er ordineret af den behandlende læge og udføres under hans kontrol.

Når forskning er nødvendig og dens funktioner

Hepatitis C er den farligste type af denne sygdom, da den har en lang latent (latent) periode og farlige konsekvenser. For at undgå at udseendet og udviklingen af korrekt og rettidig diagnose tillader, er en af de mest informative metoder deraf anerkendt immunoassay.

Det er muligt at bekræfte tilstedeværelsen af HCV-infektion i patientens blod ved hjælp af serologiske markører, og en analyse baseret på et kompleks af strukturelle og ikke-strukturelle virale peptider gør det muligt at opnå de mest komplette og pålidelige data om eksistensen af antistoffer. Hos friske mennesker er antistoffer mod hepatitis C-viruset i patientens blod fraværende, og deres påvisning indikerer tilstedeværelsen af et patogen og udviklingen af en patologisk proces.

I løbet af undersøgelsen identificerer eksperter samlede IgM- og IgG-klasseantistoffer, der er direkte relateret til HCV's strukturelle og ikke-strukturelle proteiner. Gennemførelsen af denne undersøgelse giver os mulighed for at identificere patienter inficeret med hepatitis C-viruset i et tidligt stadium af sygdommen. Tilstedeværelsen af totale antistoffer i patientens blod indikerer sygdommens indtræden eller en tidligere infektion.

Udbruddet af sygdommen er indikeret ved tilstedeværelsen af IgM-klasseantistoffer, og type C-hepatitis kan bedømmes af de detekterede IgG-klasseantistoffer. De bliver bekræftelse af konvalescens (sygdommens sidste fase). I denne periode er anatomisk og funktionel genopretning af de berørte organer karakteristisk.

Tidligt udført ELISA (ELISA) giver dig mulighed for at identificere den patologiske proces i et tidligt udviklingsstadium, diagnosticere sygdommen med høj nøjagtighed og øge chancerne for hurtig genopretning. ELISA-testen gør det muligt at bestemme ikke kun tilstedeværelsen af virussen, men også antallet af specifikke antivirus-antistoffer.

Kvinder i graviditetstilstand, når de registreres i den forældede klinik.
Patienter, der har symptomer på akut eller kronisk hepatitis.
Læger, der er i konstant kontakt med biologiske materialer.
Patienter med diagnose af aids.
Narkotikamisbrugere.
Patienter med alkoholisme og dem, der fører en asocial livsstil.

Henvisning til ELISA-testen (enzymimmunoassay) og modtagelse af retshåndhævende myndigheder eller ansatte i offentlige tjenester. Behovet for en ELISA forekommer, hvis du har mistanke om en krænkelse af leverfunktionaliteten eller når du modtager tvivlsomme data om organets tilstand efter ultralyd. Lægen kan give patienten en henvisning til en ELISA-blodprøve, hvis sidstnævnte skal gennemgå et komplekst kirurgisk indgreb. Hvis en kvinde (især over 30 år) planlægger en graviditet, og forhøjede værdier af bilirubin eller transferase (ALT, AST) findes i blodprøven.

Specifikke anti-virale IgG-antistoffer er blevet påvist i flere år. Deres koncentration falder gradvist, hvilket bekræfter den positive dynamik. Hvad angår kronisk hepatitis C, ændres antallet af totale anti-HCV-antistoffer ikke i dette tilfælde. Nøjagtig diagnose er baseret på bestemmelse af niveauet af IgM antistoffer.

Forløbet af hepatitis C afhænger af genotypen af den virus, der forårsagede udviklingen af sygdommen. 11 moderne varianter af medicin er kendt. I de sværeste situationer er infektion med flere genotyper af virus mulig, og en af dem viser sig altid at være dominerende. Kun nøjagtig diagnose vil hjælpe med at vælge de mest effektive stoffer til effektiv terapi, vælge deres dosering og indstille varigheden af terapeutiske interventioner.

Evaluering af forskningsresultater

For at diagnosticere mistænkt hepatitis C og opnå vejledende information om patogenens mængde og kvalitet, udføres et enzymbundet immunosorbentassay (ELISA), hvor specialister modtager bekræftelse af tilstedeværelsen af viruset i kroppen og kan bedømme dens aktivitet.

Med denne undersøgelse kan vi drage konklusioner om:

viral load;
risikoen for at udvikle en kronisk proces
aktiviteten af reproduktion (replikation) af HCV RNA molekylet;
varigheden af den patologiske proces
graden af leverskade.

Risikoen for sygdommen bliver kronisk vurderes også. Identificeret ved hjælp af ELISA antivirus HCV antistoffer indikerer viral replikation. De endelige resultater kræver bekræftelse med mere præcis forskning.

Kvalitativ vurdering af resultatet af enzymimmunoassay udtrykkes som et positivt eller negativt resultat. ELISA tillader at detektere hepatitis C i et tidligt stadium af sygdomsudviklingen såvel som i løbet af sygdommen i anicterisk form.

Analysen har visse fordele, herunder:

Nøjagtighed af kvalitative og kvantitative indikatorer.
Mindste studietid.
Phased test.

Enzymimmunoassayet er et af undersøgelserne, der kendetegnes ved høj nøjagtighed, men på trods af alle fordele gør det i nogle tilfælde ikke muligt at identificere patogen til stede i menneskekroppen.

Til forskning tager laboratorieassistenten patientens venøse blod og placerer det i særlige beholdere. Efter en vis tid er antigenerne (fremmede mikroorganismer) fastgjort til skibets vægge. Specialisten indsætter immunoglobuliner (antistoffer) i karret og søger et immunrespons.

De opnåede resultater sammenlignes med dataene i et specielt sammensat bord. Resultatet er vurderet som:

Positiv, der indikerer tilstedeværelsen af en akut form af sygdommen, hvis tilstedeværelsen af antistoffer af klasserne IgA, IgG, IgM bestemmes under blodprøven.

Negativ - alle tre typer antistoffer blev ikke detekteret, er fraværende.

Falskt positivt - ELISA resultat er positivt, men ikke bekræftet efter PCR (polymerasekædereaktion).

Tvivlsomt - markører i blodet er ikke påvist i nærvær af hepatitis C. Dette er muligt med for tidlig diagnose. Gentagen analyse efter 2-3 uger er påkrævet. For en nøjagtig diagnose skal du foretage PCR-analyse.

Et falsk-negativt resultat af analysen er mulig hos patienter, der tager stoffer, der har en hæmmende virkning på kroppens forsvarssystem.

Både falske positive og falske negative resultater af analysen er mulige af flere årsager. Først og fremmest er det den minimale virale belastning på det meget tidlige stadium af sygdomsudviklingen. Lige så vigtigt er tilstanden af patientens immunforsvar og de enkelte krops egenskaber. Resultaterne af undersøgelsen påvirker signifikant administrationen af lægemidler blandt immunosuppressive stoffer.

Det er umuligt at være helt sikker på nøjagtigheden af resultatet af en immunoassay, hvis patienten er en kvinde i graviditetstilstand. Falske resultater er mulige i tilfælde, hvor analysen udføres for patienter, der lider af autoimmune lidelser, onkologiske sygdomme med godartede tumorer.

Yderligere forskning udføres, hvis patienten for nylig har lidt en alvorlig infektionssygdom, han er blevet diagnosticeret med en metabolisk lidelse eller en funktionsfejl i det endokrine system. Hvis blodets sammensætning forhøjede niveauer af heparin eller signifikant reducerede niveauer af sporstoffer.

Nøjagtigheden af analysen kan øges ved at overholde de gældende regler for forberedelse til levering:

Blod doneres kun på tom mave. Det sidste måltid er tilladt mindst 8-10 timer inden materialet opsamles.
Om aftenen, før analysen, er det påkrævet at nægte at spise fede, stegte, krydrede, røget produkter og retter.
Der kan ikke være tale om at drikke alkohol.
Det er bedre at holde op med at ryge dagen før bloddonation.

Enzymbundet immunosorbentanalyse kan kun udføres for de patienter, der i øjeblikket ikke lider af katarrale, inflammatoriske eller infektionssygdomme, og ikke klager over indisposition.

Overtrædelse af de angivne regler og krav medfører, at resultatet af analysen vurderes som falsk positiv. Denne situation udvikler sig i 15-20% af sagerne. Men for fuldstændig tillid, læger henvise patienter til yderligere undersøgelse, hvor de skal donere blod til PCR.

Polymerasekædereaktion

Diagnose er ikke kun mulig på basis af resultaterne af ELISA analysen. Tilstedeværelsen af antistoffer er ikke tegn på tilstedeværelsen af en patogen virus i kroppen på tidspunktet for undersøgelsen. Fejlagtig test kan fremkalde en nervøs sammenbrud eller endda mere akut reaktion hos patienten. Diagnosen baseret på ELISA's resultater er ikke korrekt. Yderligere forskning er nødvendig, hvis resultater vil give lægerens endelige dom.

Det er vigtigt at huske, at et falsk positivt testresultat er muligt hos mennesker, der lider af andre infektionssygdomme, men deres immunsystem reagerede ikke korrekt på patogener eller vira's indtrængning i kroppen.

Diagnose hepatitis C tillader en række laboratorietests, et særligt sted, hvoriblandt er enzymbundet immunosorbentassay (ELISA). Kvalitativ vurdering af indikatorer defineres som et positivt eller negativt resultat. Fraværet af hepatitis B-virus i patientens blod er normen, men i nogle tilfælde efter undersøgelsen erklærer eksperter, at ubetydelige koncentrationer af nogle RNA-fragmenter (ribonukleinsyre) er blevet fundet i biologisk materiale. Identificer dem ved hjælp af PCR (polymerasekædereaktion).

Denne blodprøve gør det muligt at identificere det forårsagende middel til hepatitis C i et tidligt stadium af sygdommens udvikling og at lave en diagnose med høj nøjagtighed. Undersøgelsen er baseret på, at vira har DNA-molekyler (hepatitis B) eller RNA (hepatitis C) i deres struktur.

Under analysen af PCR under anvendelse af en særlig behandling af patientblodprøver:

øge koncentrationen af nukleinsyremolekyler;
bestemme deres type
etablere typen af patogen.

Hvis der er en lille mængde patogen-RNA-fragmenter i humant blod, vil alle blive detekteret af PCR. Dette gør det muligt at foretage en nøjagtig diagnose. Den største forskel i denne analyse fra alle andre forskningsmetoder er 100% nøjagtig diagnose.

Denne analyse udføres i undersøgelsen af blodet af gravide kvinder, der anvendte til antatarklinikken til registrering med mistænkt hepatitis C med lang latent (latent) periode, med vanskeligheder med at foretage en nøjagtig diagnose ved hjælp af ELISA. PCR er nødvendigt i tilfælde hvor et tvivlsomt resultat er opnået efter et enzymimmunoassay.

Hepatitis C-virus i denne situation er i patientens krop, men har endnu ikke provokeret den hurtige udvikling af sygdommen. Dette er det latente forløb af sygdommen. Analysen gøres ret hurtigt, da der ikke er behov for at dyrke patogenet ved hjælp af et næringsmedium for at få resultatet. Hovedforskellen mellem PCR og enzymbundet immunosorbentassay (ELISA) er, at der i dette studie ikke er noget som et falsk-positivt eller tvivlsomt resultat.