ELISA analyse - fra screening for HbsAg til kompleks diagnostik

Med indførelsen af ​​moderne teknologier inden for medicin vokser mulighederne for immunokemiske diagnostiske metoder, som hurtigt og præcist kan genkende sygdommen, når andre metoder er magtesløse. At forstå, at hepatitis B-viruset er i stand til at være i kroppen i en meget lav koncentration, hvor den ikke kan detekteres selv ved en så pålidelig metode som PCR, gør det nødvendigt at tage et nyt kig på problemet med diagnosticering af denne sygdom og at sætte pris på mulighederne for en immunoassay.

I dette materiale vil vi i detaljer analysere alt, der vedrører denne type laboratorieforskning. Du vil lære, hvad et enzymimmunoassay er, og hvordan det udføres, hvad det australske antigen er og hvordan det bestemmes, hvad de uforståelige forkortelser Hbs ag, Hbcor, i mellemtiden og deres rolle i at dechifrere analysen og også få mange nyttige og interessante oplysninger.

Artikelens indhold:

Generelle oplysninger om ELISA

ELISA (forkortet ELISA) er en laboratoriediagnostisk metode, der kan detektere både antigener og antistoffer fra en lang række infektioner, herunder hepatitis B. Nuværende viden om virusets egenskaber og egenskaberne ved kroppens immunrespons gør det ikke kun muligt at opdage infektionen, men også at identificere det stadium, effektivitet af vaccination og evaluering af effektiviteten af ​​behandlingen.

Essensen af ​​enzymimmunoassay

ELISA er baseret på reaktionen "antigen-antistof" eller rettere dens egenskaber.

Som reaktion på invasionen af ​​et fremmed stof (antigen), som især er proteiner fra virussen, producerer kroppen beskyttende proteiner - antistoffer. Antistoffer indtræder i en kompleks reaktion med antigenet, der blokererer dets aktivitet.

Vi vil tale mere om antigener og antistoffer nedenfor, men nu skal vi bemærke, at for hvert antigen er der strengt individuelle eller som læger siger homologe antistoffer. Således vil vi, hvis vi vil opdage et specifikt antigen i blodet, bruge en diagnostisk tablet med antistoffer til det. Hvis der er et antigen i blodet, vil det reagere med antistoffer, der kan påvises på forskellige måder. Og omvendt. Hvis vi vil finde nogen antistoffer, så har vi brug for en tablet med det passende antigen.

Oftest er den diagnostiske værdi af bære kun de antistoffer, som du kan diagnosticere næsten enhver infektion. Imidlertid er den særprægede af hepatitis B-virus, at hovedrolle i diagnosen spilles af et af antigenerne - det australske antigen.

Hvordan er IFA

Overvej en typisk ELISA-procedure for et specifikt eksempel, når du vil identificere antistoffer mod patogenet.

Til diagnostik anvendes en tablet med 96 brønde, som er formættet med det tilsvarende antigen. Yderligere er proceduren som følger:

serum påføres alle celler;

homologe antistoffer reagerer med antigenet og fastgøres til pladen;

tablet vasket, fjernelse af ubindede antistoffer;

så introduceres en enzymatisk etiket i cellerne - et stof der reagerer med antistoffer og forårsager farvning af indholdet i cellen.

Dette er standard ELISA-proceduren med farvning, som f.eks. Anvendes i immunokromatografiske teststrimler.

ELISA er ikke begrænset til den kvalitative bestemmelse af antistoffer eller antigener af patogenet. Jo flere antistoffer er indeholdt i tableternes celler, desto mere intense farves opløsningen. Ved at sammenligne sin optiske densitet med kontrollen kan moderne udstyr ganske nøjagtigt beregne koncentrationen af ​​antistoffer pr. Volumenmængde. Således udføres en kvantitativ ELISA, måleenheden for måling, hvor de oftest er enhederne af optisk densitet (EOP).

Immunokemiluminescerende analyse

I dag findes der flere dusin typer ELISA, som hver især har et foretrukket omfang. Den mest populære i diagnosen hepatitis B er immunokemiluminescerende analyse.

Den enzymatiske etiket til denne analyse er ikke chromatiner, som i standard ELISA, men specielle stoffer - fosfor, der forårsager komplekset at gløde i ultraviolet lys.

Ved hjælp af en speciel enhed - luminometer kan du nøjagtigt bestemme emissionsniveauet og som følge heraf koncentrationen af ​​det ønskede stof.

Ved hjælp af ELISA-metoder bestemmer næsten alle eksisterende antigener af hepatitis B-viruset og antistoffer mod dem.

Hepatitis B virusantigener: Hbs, Hbe og Hbc

Udtrykket antigen (antigen) kommer fra to engelske ord: antistof - antistof og generator - producent. Under antigenet forstår man således ethvert stof, der forårsager dannelsen af ​​antistoffer i kroppen. De mest almindelige antigener er proteinforbindelser.

I dag er tre antigener af hepatitis B-virus kendt: hbsag, hbc og hbe.

Australsk antigen

Proteinet, der er en del af den ydre skal af patogen hepatitis B, blev detekteret længe før opdagelsen af ​​selve viruset. Dette antigen fik sit navn, fordi det først blev identificeret fra de oprindelige indbyggere i Australien. Imidlertid blev proteinet først betragtet som et antigen, men et helt normalt element af blod blandt de indfødte, og bevidstheden om dens forbindelse med leversygdomme kom lidt senere.

Langvarig konservering af antigenet i blodet og fraværet af antistoffer indikerer muligheden for dannelsen af ​​HBeAg-positiv kronisk hepatitis B

I dag i den professionelle litteratur er navnet "australsk antigen" praktisk taget ikke fundet og er blevet erstattet af den internationale forkortelse - HbsAg (hepatitis b overflade antigen - hepatitis B overflade antigen). Derudover kan du finde forkortelser hbs antigen eller bare hbs. Enhver af disse forkortelser er acceptable og kan suppleres ved optagelse af HBV eller HBV - hepatitis B-viruset (hepatitis b-virus).

Hepatitis B-virusoverfladeantigenet har en bemærkelsesværdig egenskab, der gør den til en uundværlig diagnostisk markør - dens koncentration i blodet kan nå meget høje niveauer, op til halv milligram per milliliter blod. Det skyldes, at kun en lille del af den nye HBsAg, der dannes under reproduktionen af ​​hepatitis B-virus, går til opbygningen af ​​membranerne af nye virale partikler, og resten - cirkulerer frit i blodet. Som følge heraf kan antallet af hbs partikler i blodet overstige antallet af virioner hundredtusinder gange.

Denne funktion gør det australske antigen til den vigtigste markør i screeningsdiagnosen af ​​hepatitis B, som findes i blodet så tidligt som 4-6 uger efter infektion. Som antistoffer dannes, erstattes overflademigenet gradvist af dem. Hvis HBsAg efter 6 måneder vedvarer, indikerer dette overgangen af ​​infektionen til kronisk form.

For nylig, da det blev muligt at bestemme koncentrationen af ​​hbs hbv, er dens rolle i diagnosen vokset endnu mere, da afhængigheden af ​​antigenet kan skelne mellem kronisk hepatitis B (HBV) fra en sund bærestatus og overvåge effektiviteten af ​​behandlingen.

Kerneantigener

I kernen af ​​virussen - nucleocapsid - er proteiner der styrer reproduktionen af ​​viruset HBcoreAg og HBeAg.

HBcoreAg, som også kan kaldes HBCore-antigen, hbc eller kerneantigen, kan kun findes i leverenes væv direkte i kernerne af hepatocytter. Dette antigen er ikke detekteret i blodet og har ingen diagnostisk værdi.

Strukturen af ​​hepatitisvirus

HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - tværtimod spiller en vigtig rolle i diagnosen. HBeAg og HBcoreAg er nære slægtninge. De har en stor lighed mellem strukturen og afviger primært i molekylernes rumlige position. I modsætning til HBcore er HBe ikke en del af nukleokapsidvæggen og cirkulerer frit i blodet.

HBe's rolle i den infektiøse proces er endnu ikke tilstrækkelig klar, men egenskaberne ved dets adfærd og deres forhold til den smitsomme proces er allerede blevet tilstrækkeligt undersøgt. HBeAg angiver den aktive reproduktion af virussen og giver dig mulighed for pålideligt at bestemme fasen af ​​kronisk CHB-HBeAg-positiv eller HBeAg-negativ.

HBe kan detekteres i blodet allerede i inkubationsperioden for akut hepatitis B virus (HBV), mens en høj koncentration af HBeAg i 3 uger sandsynligvis indikerer en trussel om kronisk proces. Koncentrationen af ​​HBe er direkte relateret til indholdet af dansk partikler (såkaldte hepatitis B viruspartikler) - jo højere mængden af ​​HBe er, desto højere er koncentrationen af ​​HBV DNA i blodet.

HBeAg er en vigtig markør for sygdommens infektiøsitet. Blodet af HBeAg-positive patienter er meget mere smitsomt end HBeAg-negativt. For eksempel når gravid kvinder positive for HBe og Hbs, sandsynligheden for at overføre infektion til barnet når 50%, mens sandsynligheden for en sådan hændelse i HBe-negative, men Hbs af positive mødre er 10-30%.

Hbe bestemmer løbet af kronisk hepatitis. HBeAg-positiv kronisk hepatitis B har en langt mere ugunstig prognose med hensyn til udvikling af cirrose.

Det er nok alt hvad du behøver at vide om HBV antigener, og vi går videre til den anden gruppe af hepatitis B markører - antistoffer.

Essens og diagnose af hepatitis B

Så snart scenen bliver til gulsot, begynder integullerne og slimhinderne at blive gule, tilstanden for helbred forværres skarpt. Det er vigtigt at understrege, at leveren vokser i størrelse og stikker ud under kælderen. Farvning af huden i en gul skygge sker gradvis. Mængden af ​​leverenzymer vokser i blodet, og thymolprøven ændres ikke.

Diagnostisering af sygdommen: grundlæggende metoder og begreber

Diagnose af hepatitis B udføres på flere måder:

1. Til at begynde med skal lægen tage anamnese og foretage en grundig undersøgelse af personen. Under undersøgelsen lægges stor vægt på sådanne øjeblikke som:

• om indførelsen af ​​stoffer eller andre former for intravenøs;
• om der var blodtransfusioner
• om kirurgiske indgreb blev udført
• om skader på hudens integritet var til stede
• hvad er de seksuelle forhold
• om patienten havde kontakt med patienten med hepatitis B eller dens bærer.

Hvis nogen af ​​disse ting opstod, er den angivet i hvor lang tid. Typisk forekommer infektion, når man kontakter fra 6 uger til seks måneder, før de første symptomer på hepatitis opstår.

2. Laboratoriediagnose af hepatitis B, ELISA-analyse af blod for antigener og antistoffer mod hepatitis B. Denne type undersøgelse har til formål at identificere 3 antigener:

• HBsAg (antigen, placeret overfladisk),
• HBcAg (placeret inde)
• HBeAg (sammenkoblet med det foregående antigen). Sygdommen er karakteriseret ved tidlig påvisning af disse antigener i blodet.

Folk, der lider af hepatitis B og indeholder disse antigener i blodet, er meget smitsomme. De er i stand til at inficere andre mennesker. Hvis HBsAg er fraværende i humant blod, indikerer dette, at han er sund. Hvis en person er syg, begynder kroppen at udskille antistoffer mod eksisterende antigener.

3. Diagnose af hepatitis B ved hjælp af en PCR-teknik designet til at detektere HBV-DNA i kredsløbssystemet. Hvis resultatet er positivt, så har personen hepatitis. Analysen for HBV DNA kaldes kvalitativ. Der er også en kvantitativ PCR. Kvantitativ PCR giver mulighed for at identificere belastningen med tilstedeværelsen af ​​hepatitisvirus. Hvad er viral belastning? Dette er antallet af kopier af HBV DNA i 1 ml blod. Kvantitativ analyse af hepatitis viser virusets aktivitet.

4. Blodprøve til biokemi. Denne analyse involverer bestemmelsen af ​​antallet af enzymer produceret af leveren. Sådanne enzymer indbefatter ALT, AST. De er placeret inde i levercellerne - hepatocytter. Hvis levercellerne er beskadiget, frigives enzymerne og indtræder i blodet. En positiv analyse betragtes kun, når antallet af leverenzymer overstiger normen. Undersøgelsen angiver om der er inflammatoriske processer i leveren og deres aktivitet.

5. Ultralydundersøgelse, elastometri, etc. Diagnose af hepatitis kan udføres og ikke-laboratoriemetoder. Ved hjælp af ultralyd undersøger abdominale organer. Ultralyd giver et klart billede i enhver inflammatorisk proces i leveren og dens skibe. Effektivt ledende elastometri i leveren. Elastometrimetoden giver en ide om graden af ​​fibrose i leverenvæv.

6. Den vigtigste analyse er tilstedeværelsen af ​​hepatitis B antigener i den røde blodlegemasse. Hvis de findes, indikerer dette forekomsten af ​​infektion i menneskekroppen.

7. Laboratorietype diagnose af hepatitis omfatter bestemmelse af antigener og antistoffer i erythrocytmassen. Det mest almindelige HBsAg er manifesteret i kredsløbssystemet selv i inkubationsperioden for hepatitis. En person ved ikke om udviklingen af ​​hans sygdom, og i blodet er der allerede sket ændringer. Når hepatitis er akut, forsvinder HBsAg fra blodet. Normalt er HBsAg ikke til stede i den første måned i den icteric periode, og antistoffer mod dette antigen begynder at figurere i kredsløbssystemet 90 dage efter infektion.

En positiv antistofprøve betyder ikke, at en person har hepatitis. Det er muligt, at han tidligere havde haft hepatitis uden en D-agent. Hvis der ikke er HBsAg i patientens blod efter behandlingen, men der er antistoffer, indikerer dette en god prognose, der angiver, at patienten er ved at komme sig. Hvis en patient har kronisk eller alvorlig hepatitis, kan der forekomme antistoffer allerede fra de første dage af den icteric periode.

Den pålidelige ækvivalent er anti-HBc IgM i blodet. De afsløres i slutningen af ​​den præikteriske periode. De er til stede hele perioden med åbenbare manifestationer. Hvis analysen indeholder anti-HBc IgM, betyder det, at viruset fortsætter med at formere sig. Ved genoptagelsen forsvinder anti-HBc IgM. Den akutte fase af sygdommen kan producere et anti-HBc IgG assay. De vil blive opdaget igennem en persons liv.

Når inkubationstiden for hepatitis (især autoimmun) er afsluttet, begynder HBeAg at forekomme i blodet. De informerer om den aktive opdeling og forøgelse af infektiøse partikler. Så snart den icteric periode begynder, forsvinder NVAAg. Det erstattes af anti-HBe. Anti-HBe indikerer, at infektionsaktiviteten er reduceret og genoprettelsen snart kommer. Men reproduktionen af ​​virusen stopper ikke!

Akut hepatitis kan blive kronisk. Om dette vil tale identificeret i blodet HВА. Hvis det er til stede, betyder det, at sandsynligheden for at omdanne processen til en kronisk form er høj. Tilstedeværelsen af ​​HeVag indikerer en stærkt smitsom patient.

Det skal huskes, at laboratoriediagnose af hepatitis B, som giver et negativt resultat for HBsAg, udelukker ikke selve diagnosen. Et vigtigt afgørende element er tilstedeværelsen af ​​anti-HBc IgM i blodet. Disse antistoffer vil bekræfte sygdommen med nøjagtighed. Hvis blodprøven ikke indeholder anti-HBc IgM, kan dette indikere tilstedeværelsen af ​​HBV, og tilstedeværelsen af ​​disse antistoffer indikerer en intensivering af infektionen.

Hepatitis B DNA-detektion

Den vigtigste undersøgelse for at bestemme tilstedeværelsen af ​​virus-DNA er PCR. Analysen angiver aktiviteten af ​​den infektiøse proces. Med denne metode kan du lære om sygdommens prognose.

Hvis hepatitis er mere gunstig, forsvinder HBV DNA fra blodet i de indledende perioder af infektionsprocessen. Laboratoriediagnose i form af PCR giver data om kvaliteten af ​​behandlingen (virker som et bestemt lægemiddel).

For at forstå, hvilken taktik der bør tages for udnævnelsen af ​​terapeutiske foranstaltninger, er det nødvendigt at udføre en kvantitativ metode til PCR. Kvantitativ PCR giver tegn på en positiv reaktion fra terapien.

Grundlag for diagnose

For at foretage en passende diagnose kræves følgende undersøgelser:

1. Daglig inspektion, palpation.
2. Ultralyd i leveren.
3. Biokemisk analyse af blod (udført gentagne gange).
4. Undersøgelse for HBsAg, HBeAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, anti-HBc totalt, HBV DNA.
5. Markører af HBV og HCV (viral hepatitis er udelukket).
6. Lever punktering.
7. Leverbiopsi. Ved hjælp af en speciel nål punkteres bukvæggen og en lille del af leveren fjernes til histologisk undersøgelse (brikken har en størrelse på ikke mere end et halvgram). Biopsi er den nyeste metode til test af hepatitis. Takket være hende kan du mest nøjagtigt tale om aktivitetsgraden af ​​den infektiøse proces, leverfibrose. En biopsi er en kirurgisk procedure. Det kan føre til komplikationer, så det bruges ofte ikke til diagnose.
8. Fibroelastografiya. Det kan bruges til at estimere tætheden af ​​levervævet. Teknikken ligner ultralyd. Undersøgelsen bruger en speciel sensor, der er installeret på huden på stedet for fremspring af leveren.
9. FibroTest. Det er baseret på at tælle bestemte blodtal.

Kronisk hepatitis B.

Kronisk hepatitis B forløbsfase:

Fase 1 - Replikation af virus. Viruset multipliceres med øget aktivitet.

Fase 2 - integration. Virusen stopper med at multiplicere. Det virale genom begynder at integrere i DNA'et af normale leverceller, hepatocytterne.

For at bestemme virusets progressionshastighed er det vigtigt at forstå procesens sværhedsgrad, resultatet, graden af ​​forstyrrelse af levercellerne. Laboratoriediagnosticering af kronisk hepatitis er baseret på påvisning af:

Hvis hepatitis HBeAg-positiv (positiv analyse) vil der i erytrocytmassen være:

• i avlsstadiet - HBsAg, HBeAg, anti-HBc IgM, anti-HBc (total), HBV DNA;
• i fase med indsættelse af hepatocytter i DNA-HBsAg, anti-HBe, anti-HBc (total), HBV-DNA.

Hvis hepatitis er seronegativ, vil HBsAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, anti-HBc, HBV DNA være til stede i blodmassen. Desuden er deres tilstedeværelse på ingen måde afhængig af scenen i den infektiøse proces.

Differential diagnostik

Ved diagnosering er lægen forpligtet til at differentiere hepatitis B med andre sygdomme - hepatitis A, C, E, D. Den endelige diagnose kan kun foretages, når visse markører, der er specifikke for hver af hepatitis, er blevet identificeret i blodmassen.

Hepatitis bør differentieres med andre vigtige sygdomme: Akutte respiratoriske virusinfektioner, gallesten, fødevareforgiftning, intestinal infektion, kirurgisk patologi i abdominale organer og mange andre sygdomme.

Autoimmun hepatitis

For autoimmun hepatitis omfatter diagnosen følgende vigtige undersøgelser:

1. Analyse af røde blodlegemer (OAK). Forklaring: Anæmi (normocytisk) i blodet ses i autoimmun hepatitis, et reduceret indhold af leukocytter, blodplader og en øget ROE. Men en højere grad af anæmi kan forventes.
2. Urin. Dekryptere urinalyse: indeholder protein, røde blodlegemer, bilirubin.
3. Blodtest for biokemi. Meget relevant analyse. Fortolkning: En øget mængde bilirubin, forøget arginase, et fald i albumin, en stigning i γ-globuliner og en thymol-test. Den sublimede test er reduceret. Nogle indikatorer kan øges med 2 eller flere gange. Dette er en positiv test for autoimmun hepatitis.
4. Immunologisk analyse. Dekodning: T-lymfocyt suppressorer falder, lupusceller forekommer i erytrocytmassen, antallet af immunglobuliner øges, antistoffer mod erythrocytter.

En positiv test for hepatitis kan påvises gennem en serologisk metode til forskning. Autoimmun hepatitis er en heterogen sygdom.

ELISA for viral hepatitis

9. marts, 2017, 16:25 Ekspertartikler: Nova Vladislavovna Izvochkova 0 3.608

For at detektere viral hepatitis i kroppen bruger medicin i vidt omfang et enzymimmunoassay baseret på påvisning af koncentrationen og typen af ​​antigener ved anvendelse af antistoffer og enzymer. Det udføres i etaper, ved laboratorieundersøgelse, med høj nøjagtighed af indikationer. Afhængigt af mængden og klassen af ​​antistoffer ændres farven og koncentrationen af ​​enzymet, der anvender ELISA, og dermed lægen diagnosticerer sygdommen.

Hvad er ELISA?

Tilstedeværelsen af ​​viral hepatitis i patientens krop bestemmes ved anvendelse af en serologisk metode til blodanalyse for tilstedeværelsen af ​​HCV-virus og markører (organer og antistoffer) der angiver det. Enzymbundet immunosorbentassay (ELISA) undersøger forskellige vira, forbindelser med lav molekylvægt, makromolekyler, deres kvalitative og kvantitative indikatorer ved anvendelse af manifestationen af ​​reaktionen på deres antigener. For at gøre dette skal du bruge enzymet som et mærke til signalregistrering. Det anvendes i stigende grad i medicin, fordi ELISA klart finder veldefinerede antigener, uden at forvirre dem med andre, har en høj følsomhed over for forekomsten af ​​invasion af viral hepatitis.

Ulempen ved en sådan diagnose er manglende evne til at identificere årsagen til sygdommen, da metoden kun angiver reaktionen af ​​kroppens immunsystem. Resultaterne af analysen påvirkes af den tidligere udførte vaccination. I 8 timer før analysen anbefales det at afholde sig fra at spise, nikotin, alkohol. Grundlaget for ELISA-testen er kroppens enzymatiske og immunrespons på virussen. Biologiske molekyler binder til cellen og dets elementer, mikroorganismer, registrerer virussen og arbejder derefter enzymer, der giver dig mulighed for at udtrykke immunresponset i en synlig og målbar parameter.

Indikationer for analyse

Viral hepatitis i kroppen kan forårsage kræft og levercirrose. Betydningen af ​​rettidig diagnose er ubestridelig. Den primære diagnosemetode er ELISA-testen, som med stor nøjagtighed bestemmer tilstedeværelsen af ​​HCV-viruset (IgM og IgG) og aktiviteten af ​​dets sporstoffer. Mandatory tests for viral hepatitis pass:

1. Mennesker med risikogrupper (stofmisbrugere, personer med aids, medarbejdere hos læger og retshåndhævende institutioner).
2. Mennesker med akut eller kronisk hepatitis.
3. Gravide og planlægning graviditet kvinder.

ELISA anerkender sygdommen på ethvert tidspunkt. Resultaterne af analysen er i gennemsnit klar i 2 dage.

Kriterier der bestemmer betydningen af ​​analyse

ELISA-test bestemmer tilstedeværelsen af ​​antistoffer af klassen IgG, IgM, IgA. Ved diagnosticering af viral hepatitis er lægen ikke opmærksom på deres type, da tilstedeværelsen af ​​en sådan manifestation af HCV-viruset allerede indikerer et akut eller kronisk stadium af sygdommen. I de tidlige stadier af sygdommen stiger niveauet af IgM (5 dage efter infektion); På den 15. - 20. dag optræder IgG antistoffer og kan forblive i humant blod i lang tid selv efter helbredelse; IgA - vises efter 10-14 dage, falder efter behandling.

Hvis IgG og IgA påvises efter brug af stoffer og deres niveau forbliver i samme hastighed - bæreren har en kronisk form for hepatitis. Et vigtigt kriterium for testen vil være en klar definition af den tilgængelige klasse af antistoffer og deres mængde. Baseret på dette kan du ikke kun vide om sygdommens tilstedeværelse, men også udviklingsstadiet. Påvisning af sådanne elementer i patientens blod gør det muligt at ordinere korrekt og rettidig behandling for at forhindre mere alvorlige konsekvenser.

Hvordan er det gjort?

Allokere direkte og ikke direkte ELISA test. Stadier direkte:

1. Indsamling af biologisk materiale og placering i specielle huller.
2. Inden for 15-30 minutter antigener er fastgjort til brøndens overflade.
3. Tilsætning af antistoffer til brøndene til antigenet fundet. Alle forlod i 1-5 timer.
4. Fjern ubundne antigener (hæld brøndens indhold).
5. Skyl brøndene med en særlig løsning.
6. Tilsæt enzymopløsning til brøndene. Lad i 30 minutter - 1 time.
7. Anvendelsen af ​​kolorimetri (detektion af farve og koncentration af farven af ​​brøndets indhold, sammenligning med indikatorer, der er direkte proportional med virusets koncentration).

Anvendelse til diagnose af indirekte ELISA vil give et mere præcist resultat.

Den indirekte ELISA-metode finder sted ved anvendelse af umærkede antistoffer til de fundne antigener og den efterfølgende tilsætning mærket til dem. Først tages blod fra patienten og spredes gennem brøndene i 15-30 minutter. (antistoffer er fastgjort med huller). Derefter introduceres umærkede antistoffer i dem i 1-5 timer (forbindelsen af ​​antistoffer med antigener dannes - immunkomplekset). Derefter hældes faste mikroelementer fra brøndene og vaskes med en særlig løsning. I næste fase tilføjer laboratorietekniker mærket sporstoffer til brøndene i 15-30 minutter. (dette binder umærkede med mærket med dannelsen af ​​det komplekse "antistof-antistof-antigen"). Ekstra (løs) fjernes igen under afløb og vask med opløsning. Næste er enzymet, der ændrer farve i 5-30 minutter. forbliver i hullerne, og farvedata sammenlignes med dataene i tabelindikatorerne. Indirekte ELISA er mere præcis.

Hvad viser en ELISA for viral hepatitis?

Immunoassay gør det muligt at påvise tilstedeværelsen af ​​infektion (hepatitisvirus af enhver art, hiv, herpes, syfilis, cytomegalovirus, mæslinger, røde hunde, kussevirus, Epstein-Barr-virus), er en markør for autoimmune sygdomme, kræftceller. Indikerer krænkelse af reproduktive funktioner (ændringer i testosteron, prolactin, østradiol og progesteron), skjoldbruskkirtelfunktion, helminthedsangreb, klamydia. Effektivt til påvisning af ureaplasmose, kighoste, Dange virus, West Nile virus, Borrelia. Listen over definitioner er høj, indeholder mange elementer.

Bekræftelse af resultater

Bestemmelse af HCV-virusantigen med ELISA giver 98% nøjagtighed. Det bruges også til at retestere biologisk materiale med fuzzy tidligere indikatorer. Tilstedeværelsen af ​​IgM antigener er ikke en indikator for akut hepatitis og kræver yderligere forskning. Når ELISA-testen gentages, falder resultaterne med 90-100%. I tilfælde af minimal uoverensstemmelse tages gennemsnitsværdien som indikator. For maksimal nøjagtighed hvad angår læger rådgive parallelt med at foretage en biokemisk analyse af blod. For at teste resultaterne efter enzymimmunoassayet kan du bruge andre diagnostiske metoder.

Undersøgelser af hepatitis B-viruset (ELISA og PCR)

Hepatitis B virus "s" antigen (HBsAg)

Hepatitis B-overfladeantigen i serum er normalt fraværende.
Påvisning af hepatitis B overfladeantigen (HBsAg) i serum bekræfter akut eller kronisk infektion med hepatitis B-virus.

Ved akut sygdom detekteres HBsAg i serum i de sidste 1-2 uger af inkubationsperioden og de første 2-3 uger i den kliniske periode. Cirkulation af HBsAg i blodet kan være begrænset til nogle få dage, så du bør stræbe efter en tidlig indledende undersøgelse af patienter. ELISA-metoden tillader at detektere HBsAg hos mere end 90% af patienterne. Næsten 5% af patienterne registrerer ikke de mest følsomme forskningsmetoder HBsAg, i sådanne tilfælde bekræftes etiologien af ​​viral hepatitis B ved tilstedeværelsen af ​​anti-HBcAg JgM eller PCR.

Serum HBsAg-koncentrationen i alle former for hepatitis B-sværhedsgrad ved sygdommens højde har et betydeligt spektrum af udsving, men der er et vist mønster: I den akutte periode er der et omvendt forhold mellem serum HBsAg koncentration og sværhedsgrad af sygdommen.

Høje koncentrationer af HBsAg er mere almindelige i milde og moderate former for sygdommen. I svære og ondartede former er koncentrationen af ​​HBsAg i blodet ofte lav, og i 20% af patienterne med svær form og i 30% med et malignt antigen i blodet kan det slet ikke påvises. Udseendet på denne baggrund hos patienter med antistoffer mod HBsAg betragtes som et ugunstigt diagnostisk tegn; Det er bestemt i maligne former for hepatitis B.

I det akutte forløb af hepatitis B falder koncentrationen af ​​HBsAg i blodet gradvist indtil fuldstændig forsvinden af ​​dette antigen. HBsAg forsvinder hos de fleste patienter inden for 3 måneder efter begyndelsen af ​​en akut infektion.

Et fald i koncentrationen af ​​HBsAg med mere end 50% ved udgangen af ​​3. uge i den akutte periode indikerer som regel en tæt afsluttet infektionsproces. Vanligvis hos patienter med en høj koncentration af HBsAg ved sygdommens højde detekteres det i blodet i flere måneder.
Hos patienter med lave koncentrationer af HBsAg forsvinder meget tidligere (nogle gange flere dage efter sygdommens begyndelse). Generelt går tiden for HBsAg-detektion fra flere dage til 4-5 måneder. Den maksimale påvisningsperiode for HBsAg med et glat forløb af akut hepatitis B overstiger ikke 6 måneder fra sygdommens begyndelse.

HBsAg kan findes hos raske mennesker som regel ved profylaktiske eller utilsigtede studier. I sådanne tilfælde undersøges andre markører af viral hepatitis B, anti-HBcAg JgM, anti-HBcAg JgG, anti HBeAg, og leverfunktionen studeres.

I tilfælde af negative resultater er det nødvendigt at gentage undersøgelser af HBsAg.
Hvis gentagne blodprøver i mere end 3 måneder afslører HBsAg, klassificeres denne patient som en kronisk patient med viral hepatitis B.
Tilstedeværelsen af ​​HBsAg er ret almindelig. Der er mere end 300 millioner luftfartsselskaber i verden, og i vores land er der omkring 10 millioner luftfartsselskaber.
Afslutning af HBsAg-cirkulation med efterfølgende serokonversion (dannelse af anti-HBs) indikerer altid genopretning - sanering af kroppen.

En blodprøve for tilstedeværelsen af ​​HBsAg anvendes til følgende formål:

til diagnosticering af akut hepatitis B:

• inkubationsperiode
• akut sygdom
• tidligt opsving
  

til diagnosticering af kronisk viral hepatitis B;

for sygdomme:

• vedvarende kronisk hepatitis;
• levercirrhose

til screening og identifikation af patienter i risikogrupper:

patienter med hyppige hæmotransfusioner

patienter med kronisk nyresvigt

patienter med flere hæmodialyser

patienter med immundefekt tilstand, herunder aids.

Evaluering af forskningsresultater

Resultaterne af undersøgelsen udtrykkes kvalitativt - positivt eller negativt. Et negativt resultat indikerer fraværet af serum HBsAg. Et positivt resultat - identifikationen af ​​HBsAg indikerer en inkubation eller akut periode med akut viral hepatitis B såvel som kronisk viral hepatitis B.

Antistoffer mod nukleare antigen af ​​hepatitis B virus JgG (anti-HBcAg JgG)

Normalt er serum anti-HBcAg fraværende i serum.
Hos patienter med anti-HBcAg forekommer JgG i den akutte periode med viral hepatitis B og vedvarer hele livet. Anti-HBcAg JgG er den førende markør for overført HBV.

Blodprøver til anti-HBcAg JgG anvendes til at diagnosticere:

kronisk viral hepatitis B i nærværelse af HBs antigen i serum;

viral hepatitis B.

Evaluering af forskningsresultater

Resultatet af undersøgelsen udtrykkes kvalitativt - positivt eller negativt. Et negativt resultat indikerer fraværet af serum anti-HBcAg JgG. Et positivt resultat - identifikationen af ​​anti-HBcAg JgG indikerer akut infektion, konvalescens eller tidligere overført viral hepatitis B.

Hepatitis B virus "e" antigen (HBeAg)

Normalt er HBeAg i serum fraværende.
HBeAg kan findes i serum hos de fleste patienter med akut viral hepatitis B. Det forsvinder sædvanligvis i blodet før HBs antigenet. Et højt niveau af HBeAg i de første uger af sygdommen eller dets påvisning i mere end 8 uger giver grund til at mistanke om en kronisk infektion.

Dette antigen registreres ofte i kronisk aktiv hepatitis af viral etiologi. Af særlig interesse i definitionen af ​​HBeAg er det faktum, at dets påvisning karakteriserer den aktive replikative fase af den infektiøse proces. Det er blevet konstateret, at høje koncentrationer af HBeAg svarer til høj DNA-polymeraseaktivitet og karakteriserer aktiv replikation af viruset.

Tilstedeværelsen af ​​HBeAg i blodet indikerer dens høje infektivitet, dvs. Tilstedeværelsen af ​​aktiv hepatitis B infektion i kroppen undersøges og detekteres kun i nærværelse af HBs antigen i blodet. Hos patienter med kronisk aktiv hepatitis anvendes antivirale lægemidler kun, når HBeAg detekteres i blodet. HBeAg - antigen - en markør for den akutte fase og replikation af hepatitis B-viruset.

En blodprøve for tilstedeværelsen af ​​HBe-antigen anvendes til at diagnosticere:

inkubationsperiode for viral hepatitis B;

prodromal periode for viral hepatitis B;

akut periode med viral hepatitis B;

kronisk vedvarende viral hepatitis B.

Evaluering af forskningsresultater

Resultatet af undersøgelsen udtrykkes kvalitativt - positivt eller negativt. Et negativt resultat indikerer fraværet af serum HBeAg. Et positivt resultat - detektering af HBeAg indikerer en inkubation eller akut periode med akut viral hepatitis B eller den fortsatte replikation af viruset og patientens infektiøsitet.

Antistoffer mod antigenet "e" af hepatitis B-viruset (anti-HBeAg)

Anti-HBeAg i serum er normalt fraværende. Udseendet af anti-HBeAg-antistoffer indikerer normalt intensiv fjernelse fra kroppen af ​​hepatitis B-viruset og mindre infektion hos patienten.

Disse antistoffer forekommer i den akutte periode og fortsætter op til 5 år efter infektionen. Ved kronisk vedvarende hepatitis findes anti-HBeAg i patientens blod sammen med HBsAg. Serokonversion, dvs. Overgangen af ​​HBeAg til anti-HBeAg, med kronisk aktiv hepatitis, oftere prognostisk gunstig, men den samme serokonversion forbedrer ikke prognosen for alvorlig cirrotisk levertransformation.

Blodprøver for tilstedeværelsen af ​​anti-HBeAg anvendes i følgende tilfælde ved diagnosen viral hepatitis B:

etablering af sygdommens indledende fase

akut infektion;

tidligt opsving

rekonvalescens;

sen fase recovery.

diagnose af nylig overført virus hepatitis B;

diagnose af kronisk vedvarende viral hepatitis B.

Evaluering af forskningsresultater

Resultatet af undersøgelsen udtrykkes kvalitativt - positivt eller negativt. Et negativt resultat indikerer fraværet af antistoffer mod HBeAg i serum. Et positivt resultat er påvisning af antistoffer mod HBeAg, hvilket kan indikere begyndelsesfasen af ​​akut viral hepatitis B, den akutte infektionsperiode, det tidlige stadium af konvalescens, konvalescens, nylig overført virus hepatitis B eller vedvarende viral hepatitis B.

Kriterierne for tilstedeværelsen af ​​kronisk hepatitis B er:

detektion eller periodisk detektion af HBV-DNA i blodet;

kontinuerlig eller periodisk forøgelse af aktiviteten af ​​ALT / AST i blodet;

morfologiske tegn på kronisk hepatitis ved histologisk undersøgelse af leverbiopsi.

Påvisning af hepatitis B-virus ved hjælp af PCR (kvalitativt)

Hepatitis B-virus i blodet er normalt fraværende.
Den kvalitative bestemmelse af hepatitis B-viruset ved hjælp af PCR-metoden i blodet gør det muligt at bekræfte tilstedeværelsen af ​​viruset i patientens krop og derved fastslå sygdommens ætiologi.

Denne undersøgelse giver nyttig information til diagnosticering af akut viral hepatitis B i inkubation og tidlige udviklingsstadier af sygdommen, når patientens vigtigste serologiske markører i blodet kan være fraværende. Serum viralt DNA påvises hos 50% af patienterne i fravær af HBeAg. Analysens følsomhed ved PCR-metoden er ikke mindre end 80 virale partikler i 5 μl, den sidste DNA-detektionsprøve, specificitet - 98%.

Denne metode er vigtig for diagnosticering og overvågning af kronisk HBV. Ca. 5-10% af cirrose og andre kroniske leversygdomme skyldes kronisk bærer af hepatitis B-virus. Markører for aktiviteten af ​​sådanne sygdomme er tilstedeværelsen af ​​HBeAg og DNA af hepatitis B-virus i blodet.

PCR-metoden gør det muligt at bestemme i blodet DNA'et af hepatitis B-viruset både kvalitativt og kvantitativt. Det bestemmede fragment i begge tilfælde er den unikke DNA-sekvens af genet for det strukturelle protein i hepatitis B-viruset.

Påvisning af hepatitis B-virus DNA i biomateriale ved anvendelse af PCR er nødvendigt for:

løsning af tvivlsomme serologiske testresultater

påvisning af den akutte fase af sygdommen sammenlignet med tidligere infektion eller kontakt

kontrollere effektiviteten af ​​antiviral behandling.

Forsvindelsen af ​​hepatitis B-DNA fra blod er et tegn på effektiviteten af ​​behandlingen

Påvisning af hepatitis B-virus ved hjælp af PCR (kvantitativ)

Denne metode giver vigtige oplysninger om intensiteten af ​​sygdommens udvikling, effektiviteten af ​​behandlingen og udviklingen af ​​resistens over for aktive stoffer.
Til diagnosticering af viral hepatitis ved PCR i serum anvendes testsystemer, hvis følsomhed er 50-100 eksemplarer i en prøve, hvilket gør det muligt at påvise viruset i en koncentration på 5 x 10 ^ 3 -10 ^ 4 kopier / ml. PCR i viral hepatitis B er absolut nødvendigt for at dømme viral replikation.

Serum viralt DNA påvises hos 50% af patienterne i fravær af HBeAg. Blodserum, lymfocytter og hepatobiopsi kan tjene som materiale til detektion af DNA fra hepatitis B-virus.

• Vurdering af niveauet af viremia er som følger:
• mindre end 2,10 ^ 5 kopier / ml (mindre end 2,10 ^ 5 IE / ml) - lav viremi;
• fra 2,10 ^ 5 kopier / ml (2,10 ^ 5 IE / ml) til 2,10 ^ 6 kopier / ml (8,10 ^ 5 IE / ml) - medium viremi;
• mere end 2,10 ^ 6 kopier / ml - høj viremi.

Der er et forhold mellem resultatet af akut viral hepatitis B og koncentrationen af ​​HBV DNA i patientens blod. Med et lavt niveau af viremi er processen med kronisering af infektionen tæt på nul, medens processen er kronisk i 25-30% af patienterne, og med et højt niveau af viremi bliver akut viral hepatitis B oftest kronisk.

Indikationerne for behandling af kronisk HBV-interferon-alfa bør betragtes som tilstedeværelsen af ​​markører af aktiv viral replikation (påvisning af HBV HBV, HBeAg og HBV DNA i blodserumet i de sidste 6 måneder.).

Kriterierne for evaluering af effektiviteten af ​​behandlingen er forsvinden af ​​HBEAg og HBV DNA i blodet, som normalt ledsages af normalisering af transaminase niveauer og langvarig remission af sygdommen, HBV DNA forsvinder fra blodet ved den 5. behandlingsmåned hos 80% af patienterne. At reducere niveauet af viremia med 85% eller mere inden for den tredje dag fra behandlingens begyndelse sammenlignet med baseline er et hurtigt og ret præcist kriterium for at forudsige effektiviteten af ​​behandlingen.

Forskning om viral hepatitis ved metoden ife

ELISA ved diagnosen viral hepatitis. Enzyme immunoassay kapaciteter

Specifik laboratoriediagnose af viral hepatitis er baseret på anvendelse af immunokemiske og molekylære biologiske forskningsmetoder. De vigtigste immunokemiske metoder er radioisotop eller radioimmun (RIA) og immunoassay (ELISA). Immunokemiske diagnostiske metoder er baseret på den specifikke interaktion af et antigen - et antistof med den efterfølgende identifikation af komplekset ved hjælp af særlige mærker. Det mest almindelige enzymimmunoassay.

De første rapporter om brugen af ​​enzymimmunoassay. som en metode til bestemmelse af stoffer blev i 1971 samtidig offentliggjort af to forskningsgrupper - V. Van Weemen, A. Schuurs og E. Engvall, P. Perlmann. Enzymimmunassayet er baseret på følgende princip: På den faste fase, der hovedsagelig bruger overfladen af ​​brøndene i en polystyrentablet, fastgøres antigenet af det infektiøse middel eller antistof (ofte en blanding af antistoffer) til antigener, der skal detekteres. Dette antigen eller antistoffer, der er fastgjort på den faste fase, kaldes immunosorbent.

Som et resultat af inkuberingen af ​​immunosorbenten og testserumet i nærvær af et detekterbart middel bundet de til antigen-antistofkomplekset. Efter vaskningsproceduren, hvorunder ubundne antigener og antistoffer fjernes, udføres incubation med konjugatet. Som et konjugat til påvisning af HBsAg anvendes anti-HBs; i påvisning af antistoffer mod hepatitis C-viruset - antistoffer mod humane immunoglobuliner (antiviruskonjugat) mærket med peberrodperoxidase. Som et resultat af denne inkubation forekommer binding til de allerede eksisterende antigenkomplekser - antistoffet af det yderligere introducerede konjugat. Efter fjernelse af ubundet konjugat (vask), indføres substratet i brøndene. Ved anvendelse af et peroxidasekonjugat anvendes hydrogenperoxid som et substrat i kombination med en indikator, som oftest anvendes som orthophenylendiamin (OPD) eller tetramethylbenzidin (TMB). Resultatet estimeres fotometrisk.

Kvaliteten og pålideligheden af ​​analytiske egenskaber ved enzymimmunoassaymetoden er kendetegnet ved et antal kriterier, der indbefatter følsomhed, specificitet, nøjagtighed og reproducerbarhed.

Følsomhed er den mindste mængde af et stof, som kan detekteres ved enzymimmunoassay. I dette tilfælde er den nederste grænse for følsomheden af ​​denne metode koncentrationen af ​​teststoffet i prøven, hvilket svarer til det mindste positive resultat af bestemmelsen, hvilket er statistisk signifikant forskelligt fra indikatorerne for bevidst negative prøver. Følsomheden af ​​en IFTS afhænger af en række forhold, der er relateret både til testsystemets design (immunosorbentens affinitet, kvaliteten af ​​ekstraktions- og buffersystemerne) og opløsningen og nøjagtigheden af ​​registreringsmetoden.

Specificitet - evnen til at identificere nøjagtigt komponenterne til bestemmelse af hvilket dette enzymimmunoassay er designet. Specificiteten af ​​ELISA bestemmes i høj grad af tværreaktionen af ​​antistoffer eller antigener (dvs. sammensætningen anvendt som et immunosorbent) med nært beslægtede forbindelser såvel som sammensætningen af ​​inkubationsmediet (matrixeffekt).

Korrektitet - korrespondancen mellem gennemsnitsværdien af ​​resultaterne af gentagne bestemmelser af den samme kontrolprøve med den sande værdi af den målte parameter. Nøjagtigheden af ​​bestemmelsen i ELISA afhænger af kvaliteten af ​​testsystemet og kontrolprøven. For gode immunoassay test systemer er korrektitetsindikatorerne i området 90-110%. Den egenartede biomedicinske forskning i ELISA er umuligheden af ​​at etablere den nøjagtige værdi, og derfor er gennemsnittet af flere ekspertlaboratorier taget som den sande værdi. Det statistiske kriterium for korrekthed er det aritmetiske gennemsnit og graden af ​​dens afvigelse fra den sande værdi udtrykt som en procentdel.

Reproducerbarhed - Testsystemets evne til at vise de samme værdier med gentagne undersøgelser af samme prøve. Reproducerbarheden afhænger både af tilfældige fejl (fejl) under proceduren for indstilling af reaktionen og om kvaliteten af ​​testsystemerne og nøjagtigheden af ​​metoden til registrering af resultaterne. Det antages, at reproducerbarheden af ​​de samme kontrolprøver af det samme selskab i forskellige laboratorier ikke bør overstige værdien af ​​variationskoefficienten på 15%.

Der findes flere specifikke ELISA-ordninger til bestemmelse af virale hepatitismarkører: a) direkte enzymimmunoassay; b) indirekte enzymimmunoassay c) konkurrencedygtig hæmning c) "fælde" eller "capture" metode.

Af molekylære biologiske metoder til diagnosticering af viral hepatitis, polymerasekædereaktion og hybridisering anvendes mere almindeligt. Disse metoder, især PCR, gør det muligt at detektere meget små mængder af specifikt viralt DNA eller RNA og således dømme replikation og i nogle tilfælde replikationsaktivitet.

Hepatitis C blodprøve

Hepatitis C er en af ​​de mest almindelige leversygdomme, der opstår, når de smittes med hepatitis C-viruset (HCV), som først kommer ind i kroppen, når det kommer i kontakt med blodet af en inficeret person. Der opstår kronisk og akut hepatitis C. Hos 70-80 procent af patienter med akut hepatitis C er der ingen symptomer på sygdommen, men i nogle tilfælde efter nogle tid efter infektion er der manifestationer af sygdommen, der udtrykkes i træthed, mavesmerter, appetitløshed, mørkdannelse urin, opkastning, kvalme, lynnedslag, gulsot, smerter i leddene. Symptomerne opstår som regel 6-7 uger efter infektion, men varigheden af ​​tegn på sygdommens begyndelse varierer fra 2 uger til seks måneder. Hvis ovenstående symptomer opstår, skal du konsultere en smitsomme sygeplejerske og have en blodprøve for hepatitis C. Diagnose af hepatitis, der udføres i tide, kan registrere sygdommen i sine tidlige stadier og øge chancerne for genopretning betydeligt.

Når en hepatitis C-test er planlagt

Situationer, når en Hepatitis C-test er påkrævet:

• under graviditet og familieplanlægning
• patienter med symptomer på kronisk eller akut hepatitis
• personen er i fare. Det drejer sig om læger, personer i fængsel, retshåndhævende myndigheder, folk, der bruger stoffer, har et stort antal seksuelle partnere, har aids, er i hæmodialyse og andre.

Forberedelse til hepatitis C-analyse

Særligt forberedelse til analyse af hepatitis C er ikke påkrævet. Til analyse tages blod fra en blodåre på en tom mave, samtidig skal mindst otte timer passere efter det sidste måltid.

Hepatitis C ELISA assays

Den første analyse, som regel foreskrevet til diagnosticering af hepatitis C - ELISA-test (enzymbundet immunosorbentassay). Hepatitis C ELISA-analyser gør det muligt at påvise tilstedeværelsen af ​​antistoffer mod hepatitis C-viruset (anti-HCVAb) i blodet. Hvis resultatet af ELISA-testen er positivt, indikerer det forekomsten af ​​kontakt af kroppen med hepatitis C-viruset. Men 40% af dem, der har en positiv ELISA, opdager ikke viruset i blodet. Dette fænomen kaldes et falsk positivt resultat. Også ved hjælp af ELISA kontrolleres donorblod.

RIBA for hepatitis C

RIBA-analysen for hepatitis C anvendes til at bekræfte et positivt ELISA-resultat. Den rekombinante immunoblottningsmetode (RIBA) er en mere præcis undersøgelse af tilstedeværelsen af ​​antistoffer mod hepatitis C-viruset. Tilstedeværelsen af ​​hepatitis C-virus i kroppen bestemmer heller ikke et positivt resultat, men bekræfter kun forekomsten af ​​antistoffer.

Hepatitis C PCR test

For at detektere tilstedeværelsen af ​​hepatitis C-virus i blodet (HCV RNA) og at foretage en diagnose, bruger de oftest analysen ved hjælp af polymerasekædereaktion (PCR). Denne undersøgelse gør det muligt at opdage med høj nøjagtighed tilstedeværelsen i blodet af selv en lille del af virussen. PCR-analyse for hepatitis C kan afsløre tilstedeværelsen af ​​et virus allerede 5 dage efter infektion, længe før forekomsten af ​​antistoffer. Når resultatet af PCR-analyse er positivt, betyder det, at der forekommer en aktiv infektion.

Der er sådanne variationer af PCR-analysen:

• kvantitativ PCR, som gør det muligt at bestemme ikke kun faktumet af tilstedeværelsen af ​​viruset, men også viral belastningen (mængden af ​​viruset). Denne indikator er af stor betydning for at bestemme effektiviteten af ​​behandlingen;
• genotyping, der etablerer genotypen af ​​hepatitis C-viruset, hvilket er vigtigt for at bestemme behandlingens varighed og taktik. Der er mere end 10 genotyper af hepatitis C-viruset, men for klinisk praksis er det nok at definere fem af de mest almindelige typer: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

Kvantitativ PCR-analyse udføres:

• med en kvalitativ positiv test for tilstedeværelsen af ​​hepatitis C-virus-RNA i serum;
• til en nøjagtig vurdering af effektiviteten af ​​behandlingen
• at bestemme patientens behandlingstakt.

Der er intet direkte forhold mellem sværhedsgraden af ​​hepatitis C og mængden af ​​virus i blodet. Koncentrationen af ​​virussen påvirker sygdommens infektivitet, dvs. jo større mængden af ​​virus i patientens blod er, desto større er risikoen for overførsel af viruset, for eksempel gennem seksuel kontakt eller fra moder til barn. Effektiviteten af ​​behandlingen afhænger også af virusets koncentration. Under behandlingen er en gunstig faktor en lav viral belastning, og en meget høj er ugunstig.

Genotypebestemmelse er udført:

• med en kvalitativ positiv test for tilstedeværelsen af ​​hepatitis C-virus-RNA i serum;
• til en nøjagtig vurdering af effektiviteten af ​​behandlingen
• at bestemme patientens behandlingstakt
• at forudsige kronisering af den infektiøse proces
• at bestemme sygdommens progression.

Detektion af virusets genotype er af stor betydning for bestemmelsen af ​​behandlingens varighed, hvilket er vigtigt, da interferon har en lang række bivirkninger og lav patienttolerance.

Dekodningsanalyse for hepatitis C

Normalt er virus-RNA, antistoffer mod dem og antigener helt fraværende. Tilstedeværelsen af ​​antistoffer i blodet indikerer tilstedeværelsen af ​​kronisk eller akut hepatitis C eller genopretningsperioden. Hvis HCV RNA er til stede i blodet, hvilket bestemmes ved PCR-analyse, indikerer dette tilstedeværelsen af ​​en virus i blodet.

Med en forkert testteknik, transport og blodabnormaliteter kan PCR-analyse nogle gange vise falske positive resultater. Analyser af ELISA og RIBA i de tidlige stadier af sygdommen, når kroppen endnu ikke har produceret en tilstrækkelig mængde antistoffer, kan vise et falsk-negativt resultat.

Hvis der opnås positive resultater ved afkodning af testen for hepatitis C, er det nødvendigt at kontakte en infektionssygdomslæge og en gastroenterolog for yderligere diagnose og behandling.

Segmenterede neutrofiler sænket

Barnets blodplader er normale, forhøjet, sænket

Thyroid-stimulerende hormon TGT

Diagnose af hepatitis

Man kan ikke bestemme tilstedeværelsen af ​​hepatitis i kroppen straks, da inkubationsperioden for sygdommen kan vare op til fire uger. Når de første tegn på sygdommen optræder, forekommer der radikale ændringer i blodets sammensætning i den berørte organisme: En biokemisk analyse rapporterer et alvorligt helbredsproblem og forekomsten af ​​en patogen virus. Men for at lave en endelig diagnose er det ikke nok at donere blod til hepatitis, samt en detaljeret diagnose af hepatitis.

Laboratoriediagnose af hepatitis

Det er ønskeligt at udføre det efter slutningen af ​​inkubationsperioden, således at lægen med den største præcision kan bestemme leversygdommen i kroppen. Ellers vil den foreskrevne behandling ikke give den ønskede terapeutiske virkning og endda forværre det fremherskende kliniske billede.

Diagnose af hepatitis A

Typisk begynder diagnosen af ​​hepatitis A med et detaljeret spørgsmål om patienten og udnævnelsen af ​​en række tests, der skal udføres hurtigst muligt. Dette er:

• biokemisk blodprøve;
• fuldføre blodtal
• PCR-metode;
• ELISA;
• koagulation.

Hvis Botkin's sygdom skrider frem, så observeres et unormalt spring af bilirubin, AlAT og AsAT, thymolprøve i overensstemmelse med resultaterne af biokemisk blodanalyse. Desuden produceres specifik anti-HAV IgM, hvilket er en uoprettelig kendsgerning af tilstedeværelsen af ​​hepatitis A.
Generelt bestemmes blodets analyse af nedbrydning af leukocytter, springet i ESR og lymfocytose. Og ikke desto mindre er den mest pålidelige PCR-metoden, som bestemmer indikatoren for RNA for den patogene virus.
Derudover undersøger lægen symptomerne på sygdommen, hvorefter den kan foretage en endelig diagnose og bryde igennem til den mest effektive behandling. Behovet for instrumentelt undersøgelse er yderst sjældent. Efter vellykket konservativ behandling under patientens indlæggelsesforhold og karantæne afventer en endelig tilbagesendelse, og hepatitis A genopstår ikke igen.

Diagnose af hepatitis B

For at bestemme forekomsten af ​​hepatitis B-virus er det også muligt i henhold til resultaterne af laboratorietester, og for det første er det nødvendigt at donere blod til hepatitis. Af natur har den patogene virus tre hovedantigener - HBsAg, HBcAg og HBeAg, til hvilke antistoffer produceres i kroppen. Hovedtræk ved dette kliniske billede er ELISA - ELISA, som blot afslører specifikke markører for hepatitis B.
Umiddelbart bør det præciseres, at antigenet HBsAg fremkommer i blodet selv inden de første symptomer på hepatitis og pålideligt er bestemt i isterioden. En negativ test udelukker imidlertid ikke forekomsten af ​​hepatitis B og kræver derfor anvendelse af en lige så effektiv polymerasekædereaktionsmetode (PCR).
Hvis du har mistanke om, at hepatitis B er obligatorisk, er en biokemisk blodprøve, som anbefales at passere i første omgang. Udførelse af en biopsi af leveren og ultralyd af peritoneale organer diskuteres individuelt, men når sygdommens historie er meget klar, er der ikke behov for kliniske undersøgelsesmetoder.

Lever-ekkogram i autoimmun hepatitis i stadiet af kronisk hepatitis

Diagnose af hepatitis C

For at gøre denne diagnose er det ikke nok at donere blod til hepatitis, da viruset kan sejre i kroppen i latent form. Og ikke desto mindre er de vigtigste laboratorietest alle de analyser, der præsenteres ovenfor, såvel som den ekstra ydeevne af en leverbiopsi. Denne mikroskopiske undersøgelse af biologisk materiale (i vores tilfælde et stykke levervæv) bestemmer omfanget af den patologiske proces og vævsfibrose. Materialprøveudtagning udføres under lokalbedøvelse, komplikationer af en sådan procedure er yderst sjældne i medicinsk praksis.
Hvis mistanke om hepatitis C er den vigtigste metode til klinisk undersøgelse et ultralyd af peritoneale organer. Årsagen er enkel: sygdommen manifesteres ofte af en visuel forandring i den berørte lever, ændringer i dets struktur og størrelse. På denne måde kan du bestemme:

• størrelsen af ​​leveren, milten, bugspytkirtlen og galdeblæren
• patologiske ændringer i disse organer;
• generel blodgennemstrømning i peritoneale organer
• optimalt område til udførelse af en leverbiopsi.

Denne metode til klinisk undersøgelse bestemmer alle organets fokale patologier på mikroskopisk niveau. Hvis leveren er repræsenteret på skærmen i grå skala, kræves øjeblikkelig biopsi, da den grå farve visualiserer det berørte væv af det "menneskelige filter".

Forebyggelse af hepatitis

Da sygdommen ikke manifesterer sig straks, er det langt fra alle de kliniske billeder, der går videre til øjeblikkelig behandling. Patienten kan simpelthen ikke være opmærksom på eksistensen af ​​en patogen virus i kroppen, som igen spredes hurtigt ind i blodbanen og inficerer sunde leverceller.
For at undgå en sådan tragisk skæbne anbefales det at overholde alle forebyggende foranstaltninger. En sådan årvågenhed vil reducere risikoen for sygelighed betydeligt og spare dig for alvorlige sundhedsmæssige problemer i fremtiden. De grundlæggende regler for forebyggelse er præsenteret nedenfor:

• vask dine hænder efter gaden;
• at underkaste forarbejdning af friske grøntsager og frugter af høj kvalitet;
• at udføre alle forebyggende vaccinationer, der er angivet i den årlige kalenderplan
• selektiv holdning til seksuelle partnere
• undgå kontakt med syge mennesker;
• Brug kun engangssprøjter og vær særlig opmærksom på blodtransfusionsstationer.

Det anbefales også at regelmæssigt (hver sjette måned) donere blod til hepatitis, for at sikre, at virussen ikke trænger ind i kroppen og ikke smitter de engang sunde leverceller. Hvis diagnosen er fastslået, skal den straks blive dispenserkonto og følge alle anbefalinger fra en specialist.

Publikationsforfatter:
Syropyatov Sergey Nikolaevich
Uddannelse: Rostov State Medical University (Rostov State Medical University), Institut for Gastroenterologi og Endoskopi.
gastroenterolog
Læge i Medicinsk Videnskab