PCR diagnostik for hepatitis C

Hepatitis C er en betændelse i levercellerne, der opstår som følge af infektion med HCV-viruset (hepatitis C) ved kontakt med blodet af en inficeret person. Den genetiske kode for HCV-flaviviruset bæres af et RNA (ribonuclsyre) molekyle indeholdt i virusets struktur. Dette livstruende fænomen udmærker sig ved hemmeligholdelse i den første fase af patologien. Tidsintervallet mellem infektion og symptompåvirkningen (immunsystemets reaktion) kan være fra en måned til seks måneder. Som regel tager sygdommen en kronisk form og er svær at helbrede.

Moderne medicin giver dig mulighed for at diagnosticere patologi med mindre leverskade. De mest almindelige og effektive diagnostiske metoder omfatter PCR-analyse. Overvej i denne artikel, hvad det er, og hvilke former der findes.

Hvad er undersøgelsen

PCR-analyse for hepatitis C er en laboratorieundersøgelse, der registrerer flavirus, det genetiske materiale af ribonukleensyre (RNA). Det bestemmer antallet af RNA molekyler i blodet, kvaliteten af ​​det biologiske materiale, den genetiske type HCV flavirus.

PCR-metoden for hepatitis C gør det muligt at registrere minimumsværdien af ​​flavirus før dannelsen af ​​antistoffer som regel kort efter infektion.

Undersøgelsen omtales ofte som RNA-analyse, da den detekterer ribonukleinsyrepartikler med en størrelse på 30-60 nm indeholdt i flavaviruset.

Undersøgelsen udføres som følger: På en tom mave giver patienten blod fra en vene, som derefter testes ved forskellige metoder:

• Real-time PCR udføres på en lukket automatiseret måde og har en lavere grænse for detektion af RNA-virus, svarende til 15 IE / ml;
• COBAS AMPLICOR med en følsomhed på 50-100 IE / ml.

Jo højere tærsklen for følsomheden af ​​den diagnostiske teknik er, jo større er chancerne for at finde det laveste virusindhold i det biologiske materiale, der er under undersøgelse.

Hvilke typer analyser bruger

En analyse, der har været anvendt i flere årtier, hedder PCR-hepatitis, og det kan detekteres ret let og hurtigt. I medicin er der to metoder til reaktionen, fundamentalt forskellige fra hinanden:

• kvalitative metode afslører tilstedeværelsen i det biologiske materiale af den genetiske kilde til en bestemt virus;
• kvantitativ analyse måler antallet af genetiske stoffer, som gør det muligt at bestemme scenen i patologien eller vurdere effektiviteten af ​​det terapeutiske kursus
• genotyping bestemmer hvilken type virus der er til stede i kroppen.

Generelt hjælper en blodprøve med at identificere viremias natur og patogenens genetiske type. Forskningen udføres som regel 1 gang afhængigt af graden af ​​følsomhed i diagnosesystemet. Om nødvendigt udføres retesting ved anvendelse af et ultrasensitivt reagens.

PCR af høj kvalitet

Hvad er højkvalitets PCR RNA for hepatitis C? Essensen af ​​reaktionen ligger i nærvær af hepatitis-RNA-sekvensen, og reaktionen er kun mulig i nærvær af virale proteiner med lignende etymologi i ELISA. I sammenligningsprocessen detekteres belastningen og mulig skade på leverområdet.

Et særpræg ved denne metode er evnen til at detektere selv tilstedeværelsen af ​​et separat gen.

Det skal bemærkes, at patienten efter at have modtaget resultaterne af PCR- og ELISA-testene kræver en passende behandling, uanset hvad det endelige immunoassayresultat var. Positiv indikerer infektion, og PCR-negativ angiver et reduceret antal viruspartikler i forhold til følsomhedsniveauet.

Der er flere forhold, som påvirker produktionen af ​​en negativ PCR og ELISA:

• mangel på passende materialeindsamlingsbetingelser
• den resulterende analyse indeholder kontaminering;
• i tilfælde af en tidlig injektion af heparin til patienten.

Patienten behøver ikke at følge visse regler for blodprøvetagning til PCR-analyse. I dette tilfælde afhænger kvaliteten af ​​denne analyse af den medicinske professionel, der udfører proceduren. Evnen til at fastslå sygdommens tilstedeværelse (især i den akutte form) fremkommer inden for få uger efter infektion.

Kvantitativ analyse

En kvantitativ test anbefales til påvisning af viral belastning umiddelbart inden dannelsen af ​​yderligere terapi og kroppens reaktion. Processen med blodprøveudtagning udføres på samme måde som med højkvalitets PCR og ELISA, den eneste betingelse er fraværet af muligheden for at ryge patienten før proceduren.

Med hensyn til de egenskaber, der er opnået ved undersøgelsen af ​​data, er den øgede belastning kendetegnet ved indikatorer fra 800000 IE / ml, lav - 400000 IE / ml. Tilstedeværelsen af ​​et virus i patientens krop er angivet ved PCR for hepatitis er ikke en negativ kvalitativ test.

Denne form for forskning gør det muligt at bestemme, hvor farlig patienten er for de mennesker omkring ham. For eksempel viser identifikation af et højt niveau en øget infektivitet hos patienten. Desuden bidrager analysens resultater til at formulere den mest effektive behandling og bestemme, hvor meget den eksisterende behandling anses for effektiv.

Testets hurtige negative respons indikerer succesen for den valgte teknik, og den langsomme indikerer behovet for justeringer og brugen af ​​mangesidig behandling.

Processen med at tage analyseproceduren afhænger af den specifikke dag i sygdomsforløbet. Den første bestemmelse udføres den første dag efter at patienten er optaget på hospitalet, så gentages proceduren 4, 12 og 24 uger efter at have taget medicin.

En kvantitativ analyse viser således, hvilken behandling der er den mest effektive, varigheden af ​​den tilgængelige behandling og patientens fare i forhold til andre mennesker.

genotypebestemmelse

I undersøgelsen af ​​materialeanalyse er det vigtigt at bestemme nøjagtigheden af ​​virusgenotypen, som finder sted. I øjeblikket er der 11 sorter af hepatitis C-viruset, som igen indeholder visse underarter.

Alle disse arter reagerer forskelligt på forskellige behandlinger, med individuelle sorter, der er absolut resistente overfor mange lægemidler.

Genotypen gør det muligt at bestemme og vise levertilstanden. Det er ikke ualmindeligt, at resultaterne "ikke skrives" i resultaterne, hvilket betyder at viruset i patientens blod ikke påvises af dette testsystem. Dette kan detekteres, hvis en bestemt genotype ikke stemmer overens med denne zone. I en sådan situation tages analysen gentagne gange, og et mere følsomt system bruges til at studere materialet.

Ultrafølsom metode

Den ultrasensitive metode er nødvendig i visse tilfælde, når diagnosen hepatitis ikke kan udføres ved andre metoder, og når man skal tage en analyse, bestemmes den behandlende læge:

• hvis du har mistanke om forekomsten af ​​hepatitis C-virus hos patienter med et skjult udvalg af sygdommen
• tilstedeværelsen af ​​antistoffer mod hepatitis C-viruset, ikke bekræftet ved PCR-diagnostik;
• for at bestemme kvaliteten af ​​effektiviteten af ​​den valgte behandlingsmetode og bekræfte elimineringen af ​​sygdommen.

Sensibiliteten af ​​denne metode er meget højere end de almindeligt anvendte, men denne metode udelukker ikke at opnå falske resultater, både positive og negative. I en sådan situation er det vigtigt at kontrollere procedurens kvalitet og muligheden for kontaminering af selve materialet.

Forklaring af PCR-analyse

Afkodningen af ​​analysen udføres på basis af de præsenterede materialer, mens laboratorieforskningsresultaterne indbefatter visse data beskrevet ovenfor.

Transkriptet kan inkludere en positiv PCR-polymerasekædereaktion og en negativ ELISA i analysen, hvilket betyder at patienten ikke har tegn på hepatitis C i blodet, men tidligere har han overført den akutte form af sygdommen. Som regel bruger man sig til at anvende PCR testindikatorer ved diagnosticering.

Sammenfattende ovenstående kan det konkluderes, at under analysen er det vigtigt at overholde alle regler og anbefalinger, således at de opnåede resultater er så nøjagtige som muligt, og på grundlag af de opnåede data er det muligt at bestemme effektiviteten af ​​den anvendte terapi og den yderligere chance for fuld genopretning.

Kvalitativ analyse for hepatitis C

8. marts, 2017, 12:29 Ekspertartikler: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547

En kvalitativ analyse af polymerasekædereaktionen - PCR for hepatitis C bestemmer tilstedeværelsen eller fraværet af HCV i kroppen. Under laboratoriebetingelser undersøges strukturen af ​​RNA, som vil omfatte virussen. I tilfælde af detektion af virus C er det nødvendigt at gennemgå et behandlingsforløb, da leverens forsømte tilstand vil medføre alvorlige konsekvenser. PCR af høj kvalitet udføres efter genopretning for at bekræfte fraværet af antistoffer. Udpeget og til rutinemæssig inspektion. Med en lav koncentration af det forårsagende middel i blodet kan PCR (kvalitativ) muligvis ikke registrere noget, fordi diagnostiksystemet har sine egne følsomhedstærskler. I tilfælde af sygdoms første fase eller den milde form udføres PCR ved ultradiagnostik på ekstremt følsomt udstyr.

Hvad er RNA-virus?

Betegnelsen RNA i hepatitis C-viruset (eller hepatitis C-virus-RNA) er selve leversygdommen. Virus C binder sig til den sunde celle i kroppen ved at trænge ind indeni. Over tid, spredt gennem hele kroppen, er det kun nødvendigt at komme ind i blodet. Som et resultat trænger patogenet i leveren, smelter sammen med sine celler og virker hårdt. Leverceller (hepatocytter) arbejder under indflydelse, undergår ændringer, og derved dør de. Jo længere virus C er i leveren, desto større dør antallet af celler. Over tid udvikler farlige sygdomme, hvilket fører til malign degeneration og død.

Infektion af leveren med denne type virus kan ikke manifestere sig eksternt. I mange år eller årtier føles en inficeret person helt sund, og kun en tilfældig undersøgelse afslører oftest patologi. Ved donering af blod til hepatitis undersøges en del af RNA-kæden (ribonukleinsyre), som er en del af det humane gen (DNA). Resultaterne af laboratorieprøver bør ikke anvendes til selvbehandling, da dette kun er en indikator. Det præcise billede og yderligere diagnose er bedre bestemt af lægen.

Når det er færdigt: indikationer for forskning

Ved bekræftelse af HCV udføres PCR-analyse (polymerasekædereaktion). PCR-undersøgelser hjælper med at finde årsagsmidlet i RNA-strukturen og ordinere en effektiv terapi. Udpeget i følgende tilfælde:

• påvisning af tegn på betændelse i leveren
• screening undersøgelser for forebyggelse;
• undersøgelse af personer i kontakt
• diagnose af hepatitis af blandet oprindelse (bestemmelse af hovedpatogenet);
• bestemmelse af reproduktionsaktiviteten af ​​viruset i kronisk form
• levercirrhose
• at bestemme effektiviteten af ​​den foreskrevne behandling.

Forskning PCR ordinerer en læge til at bestemme effektiviteten af ​​behandlingsforløbet af hepatitis.

Der er en kvalitativ såvel som kvantitativ analyse af PCR. Kvantitativ PCR viser procentdelen af ​​RNA med virusbærere i blodet, og kvalitativ indikerer viral tilstedeværelse eller fravær. En positiv indikator for kvalitet (tilstedeværelse af Hepatitis C RNA) har også behov for kvantitativ forskning. Et højt niveau af koncentration af det forårsagende middel til hepatitis C er forbundet med risikoen for dets overførsel, det vil sige infektion af andre. Lavt tal er bedre behandles. Mængden af ​​RNA-vira i blodet er ikke relateret til intensiteten af ​​sygdommen. PCR-analyse gøres også i tilfælde af interferonbehandling for at ordinere behandlingens varighed og kompleksitet.

Funktioner af højkvalitets PCR analyse for hepatitis C

En kvalitativ analyse er tildelt en polymerasekædereaktionsindikator for alle patienter, der har antistoffer mod hepatitis C i deres blod. De, der har været syge og genvundet, skal genoptage testen. Det anbefales at tage en analyse for hepatitis B, så i tilfælde af en positiv konklusion og for hepatitis D. Også kvalitativt analyseret reaktion skal udføres i forbindelse med andre blodprøver. Analyser viser et komplet billede af viral spread.

Fra testresultaterne vil kun en positiv test for hepatitis C være synlig eller negativ, dvs. tilstedeværelsen eller fraværet af en virus. Hvis udgangen er "detekteret", er viruset og fortsætter med at være aktivt. Betegnelsen "ikke detekteret" angiver fraværet af en virus eller dens lille mængde. Med denne indikator skal man huske på, at diagnostiske systemers analytiske følsomhed er forskellig, og at RNA hepatitis C stadig kan være i blodet, men ikke manifesteret i analysen.

En særlig følsom PCR-metode afslører ultra hepatitis C selv i små mængder. En fluorescenshybridiseringsundersøgelse anvendes, hvilket er mange gange højere end standard PCR-systemer. Metoden anvendes i flere tilfælde:

• mistænkte skjulte former for hepatitis C;
• PCR-diagnostik bekræftede ikke patogenet, men der er antistoffer;
• i tilfælde af nyttiggørelse
• at opdage tidlig infektion.

Tilbage til indholdsfortegnelsen

Dekodningsanalyse

PCR-dekodningen af ​​HCV påvirker den endelige beslutning, når der laves en diagnose, især med ultrametoden. Den største ulempe ved denne undersøgelse er streng overholdelse af sterile betingelser for prøven og materialerne. En lille afvigelse viser nogle gange unøjagtige analytiske konklusioner, komplicerer diagnoser og efterfølgende behandling. Analyse af PCR til bestemmelse af hepatitis RNA viser ikke altid selvtillid et billede af sygdommen, undertiden er unøjagtigheder tilladt og i begge retninger.

Diagnosticering af hepatitisvirus, det anbefales at anvende en omfattende undersøgelse.

Norm for indikatorer

Fraværet af JgM antistoffer mod viral hepatitis C i resultaterne af undersøgelsen betragtes som normen i analysen af ​​polymerasekædereaktionen. Samtidig viser resultaterne af serologisk analyse tilstedeværelsen af ​​antistoffer mod virus C, og dette ligger også inden for det normale område. En kvalitativ definition viser ikke intensiteten af ​​sygdommen, den afslører kun årsagsforbindelsen for hepatitis C i RNA. Denne analyse gentages efter behandling for at bekræfte den faktiske genopretning.

afvigelser

Hvis JgM antistoffer mod HCV RNA er til stede, indikerer dette en udviklingsinfektion. Sygdommen på samme tid fortsætter akut eller kronisk, manifesteret i forskellige stadier. Hvis der registreres et fald i antallet af antistoffer, vil analysen indikere, at resultaterne af behandlingen blev opnået under genopretning. Der er yderst sjældne tilfælde af falske positive resultater i diagnostik. De findes hos kvinder under graviditet og hos mennesker med andre smitsomme sygdomme.

Diagnose med PCR til hepatitis C

Ikke alle ved, hvorfor de bruger den PCR diagnostiske metode til hepatitis C. En af de mest almindelige grupper af sygdomme er smitsomme sygdomme i mave-tarmkanalen. Maven (sår), tarmene (colitis, enteritis) og leveren (hepatitis) påvirkes mest.

Blandt alle ovennævnte organer pålægges den største byrde på leveren. I legemet er leverens rolle ekstremt vigtig:

1. Næsten alle metaboliske reaktioner finder sted i leveren (det er her alle former for vitale komponenter dannes, som gør det muligt for kroppen at fungere fuldt ud).
2. Leveren er det vigtigste afgiftningsorgan. Med hjælp (især gennem galde) fjernes mange substrater, der kan forårsage forgiftning og føre til alvorlige konsekvenser.

Desværre overvåger mange mennesker ikke deres helbred, hvorfor leveren begynder at lide. Hepatitis af forskellige ætiologier (viral, giftig) udvikles normalt.

Definition af hepatitis

Viral hepatitis indtager et vigtigt sted blandt leversygdomme. Sværhedsgraden af ​​sygdomsforløbet, behandlingens kompleksitet sætter dem først og fremmest blandt patologien af ​​dette organs anden karakter.

Al hepatitis er opdelt i akut og kronisk. Hepatitis A og B er klassificeret som akut. Blandt den kroniske hepatitis C kommer først.

Denne sygdom er forårsaget af hepatitis C-viruset. Et karakteristisk træk er, at sygdommen kan vare i lang tid uden nogen kliniske manifestationer.

Det overføres hovedsageligt gennem blodet. Med blodstrømmen kommer virussen i leveren, hvor den begynder at formere sig i sine celler. Som følge af virionsakkumulering opstår ødelæggelsen af ​​den inficerede hepatocyt. Som reaktion herpå begynder antistoffer at blive produceret, som begynder at angribe resterne af hepatocytter. På grund af dette udvikles en pulje mod leverceller over tid, hvilket forværrer sygdommens forløb.

På grund af det faktum, at sygdommen er mild asymptomatisk eller asymptomatisk, og kliniske tegn kun forekommer, når cellerne er signifikant påvirket, kræver denne sygdom oprettelsen af ​​diagnostiske metoder til at opdage dets tilstedeværelse og træffe passende foranstaltninger.

Diagnose af hepatitis C: kvalitative og kvantitative analyser

I øjeblikket anvendes der til diagnosticering af hepatitis C sådanne metoder som leverbiopsi og immunogram.

De giver dig mulighed for direkte at bestemme tilstedeværelsen af ​​inficerede hepatocytter (leverbiopsi) eller specifikke antistoffer mod berørte celler (immunogram). Der er dog en metode, der giver dig mulighed for pålideligt at bestemme tilstedeværelsen af ​​selve viruset. Dette er PCR-polymerasekædereaktion.

Essensen af ​​denne metode ligger i, at der under visse omstændigheder forekommer produktion af RNA-kæder. Dette skyldes, at der er fragmenter af en viral partikel i blodet eller den pågældende biopsi. Når man forbinder dem med nogle molekyler i mediet, forekommer syntese af kæder komplementære til viralt RNA. I deres efterfølgende analyse og sammenligning med den kendte nukleotidsekvens af hepatitis C-viruset er det muligt at bestemme om viruset er til stede i kroppen, og om leverskade er til stede.

PCR udføres efter påvisning af specifikke antistoffer mod hepatitisvirus i blodet. Efter testen er resultatet - RNA er "detekteret" eller "ikke detekteret". Lejlighedsvis kan han sige "ikke nok materiale" - i dette tilfælde er retesting for hepatitis C nødvendigt.

Hvis antallet af virale partikler er mindre end det krævede minimumsbeløb, så kan vi sige, at der ikke er hepatitis, og minimal mængde genetisk materiale kunne være "forvirret" på grund af efterligning af genetisk materiale eller nogle nukleotidsekvenser, der kunne falde sammen med virussen.

1. Med PCR kan der observeres et negativt resultat, når der faktisk er viruspartikler i blodet, men de er så små (infektion opstod for nylig, eller der var forudgående analyse af langvarig og intensiv antiviral terapi), at testsystemet simpelthen ikke kunne bestemme deres koncentration normalt. RNA - "ikke registreret."
2. Hvis PCR har et positivt resultat, er der så mange viruspartikler i blodet, at deres antal overskrider testsystemets lavere følsomhedstærskel. I dette tilfælde er der stor risiko for at udvikle en smitsom proces (eller den er allerede til stede på et ret avanceret stadium). Normalt er en høj mængde virus allerede en indikation for behandling og efterfølgende levertransplantation.

Nogle gange kan en test blive falsk positiv eller falsk negativ.

Et falsk negativt PCR-resultat af hepatitis observeres i det tilfælde, hvor nogle komponenter er til stede i reaktionsmediet, der hæmmer dannelsen af ​​kopier af den virale partikel. På grund af dette er det ikke muligt at opnå et ægte billede af blodets tilstand, hvilket bidrager til virusets passage og sygdommens fremgang. Tilstedeværelsen af ​​heparin i blodet kan også påvirke reaktionen (ved at reducere blodets relative viskositet). Forkert fortolkning af analysen er mulig, selvom betingelserne for transport og opbevaring af det undersøgte materiale ikke blev opfyldt.

Falske positive resultater, når hepatitis C diagnosticeres, resulterer PCR oftest, når røret eller arbejdsmiljøet er forurenet. Derudover kan positive resultater observeres med tilstedeværelsen af ​​hepatitisvirus fra andre grupper (på grund af krydsreaktion).

Kvalitativ analyse af PCR til påvisning af hepatitis C

Tilstedeværelsen i blodet af et stort antal kryoglobuliner har også direkte indflydelse på PCR's adfærd. På grund af dette er det afgørende at bestemme deres koncentration i blodet, før de testes for hepatitis C for at opdage forvrængning af resultatet i forvejen og forhindre det.

Efter disse tests bliver det klart, om der er virale partikler i blodet. Ved bestemmelse af dem anbefales det at starte straks antiviral terapi for at bremse procesens progression. I modsætning til hepatitis B er der ingen fuldstændig kur mod hepatitis C; sygdommen går kun ind i latent stadium og begynder at gå langsommere. Leverskader er uundgåeligt. I sidste fase af processen, når leveren ikke længere kan klare sin funktion, kan det kræve sin transplantation.

Behandlingen udføres hovedsageligt med to lægemidler - interferon og ribavirin.

Beviste deres effektivitet ved at bremse processen med nederlag af hepatocytter. Undervejs er infusionsterapi nødvendigvis ordineret for at lette leverets arbejde.

Alle patienter, der har set en stigning i antallet af virale partikler i blodet, er nødvendigvis registreret hos en hepatolog. Adskillige gange om året anbefales det at gennemgå en forebyggende undersøgelse for at bestemme procesens progression og rettidig påvisning af indikationer for transplantation. Derudover er det muligt at anvende hepatoprotektorer, selvom lægernes meninger er forskellige. Nogle mener, at disse stoffer giver dig mulighed for at suspendere processen og beskytte de stadig upåvirkede hepatocytter; andre er overbeviste om, at der ikke er nogen mening at tage dem, og intensiv antiviral terapi bør udføres.

Hepatitis C tilhører således kategorien af ​​sygdomme, hvis identifikation giver nogle vanskeligheder. Forbedring af diagnostiske metoder samt tidlige forebyggende undersøgelser vil reducere forekomsten af ​​denne sygdom. Også vigtigt er forebyggelsen af ​​denne sygdom. Man bør omhyggeligt undgå kontakt med blod, nægte at tage stoffer, først da vil denne sygdom blive udryddet. Det vigtigste i forebyggelse og behandling er patientens bevidste holdning til deres helbred.

Gennemførelse af en PCR-analyse for hepatitis C og afkodning af resultaterne

Hepatitis C PCR-analyse er en undersøgelse, hvis hovedformål er at identificere årsagsmaterialets genetiske materiale. Analysen afslører sygdomsfremkaldende middel ved anvendelse af polymerasekædereaktionen. Denne diagnose har en høj grad af nøjagtighed, specificitet til at detektere fravær eller tilstedeværelse af en viral infektion.

Essensen af ​​diagnosen

For at udføre en PCR-analyse til bestemmelse af hepatitis C-viruset fra en patient tages venøs blod, hvilket potentielt indeholder RNA (ribonukleinsyre) HCV af det ønskede virus.

PCR-testen for hepatitis C indebærer en procedure for tilsætning til patientens blodpartikler:

• primere (korte kunstigt syntetiserede regioner af det nødvendige gen);
• specielt enzym (RNA polymerase).

Efter prøveudtagning sendes det biologiske materiale til forskning til laboratoriet. En del af blodet er nødvendigt til direkte PCR-analyse, den anden sendes til test af ELISA. Enzymet er i stand til på kort tid at øge antallet af genetisk materiale af patogenens virus. I et specielt apparat udføres flere cykler af varme- og køleprocesser. I det sidste trin sammenlignes det opnåede materiale med virusets gener, og der konkluderes om tilstedeværelsen eller fraværet af patologi i patientens krop.

Essensen og udførelsen af ​​PCR analyse i laboratoriet. Filmet af SiberianMedicalLaboratory.

Typer af forskning

Der er 3 typer diagnostik, som gør det muligt at bestemme tilstedeværelsen af ​​hepatitis C-virus i kroppen:

• genotypebestemmelse;
• kvalitet;
• kvantitativ.

Kvalitativ metode

Diagnose af hepatitis C med en kvalitativ metode er anvendelig for patienter, i hvilke antistoffer mod virus påvises i blodprøven. I tilfælde af tilstedeværelsen af ​​den akutte fase af HCV RNA kan sådanne diagnostiske foranstaltninger bestemme tilstedeværelsen af ​​sygdommen inden for 1-2 uger efter infektion. I løbet af denne periode kan antistoffer mod hepatitis C endnu ikke udvikles.

Kvantitativ metode

En kvantitativ diagnostisk metode anvendes til at bestemme virusets koncentration i blodprøver. En sådan test for viremia (grad af koncentration) gør det muligt at bestemme antallet af enheder af viralt RNA nøjagtigt. Slutresultatet udtrykkes i det tilsvarende volumen. Hvis vi taler om kvantitativ analyse, måles indikatorerne i 1 ml (1 cub. Cm).

Den virale belastningsparameter betyder sygdommens infektionsniveau, det vil sige afspejler graden af ​​"infektiøsitet" af patienten. I praksis betyder det, at jo højere koncentrationen af ​​viruset i blodet er, desto større er chancerne for patienten for at inficere andre med hepatitis C. En kvantitativ forskningsmetode giver dig også mulighed for at fastslå kvaliteten og effektiviteten af ​​behandlingen.

genotypebestemmelse

Genotyping afslører mutationer af sygdomsfremkaldende middel. Før der ordineres en behandlingsplan, bestemmes virusgenotypen: Behandlingens kvalitet og varighed afhænger af den. For eksempel er effektiviteten ved behandling af sygdom af type I-type 60%, i tilfælde af II, III-type - ca. 80%.

Fordele ved Hepatitis PCR-analyse

Blandt de vigtigste fordele ved proceduren er:

1. Muligheden for tidlig diagnose. PCR-analyse er i stand til at påvise tilstedeværelsen af ​​et virus i de tidlige stadier af infektion.
2. Lav fejlresultater. Den studerede biologiske ressource giver dig mulighed for at diagnosticere en sektion af genetisk materiale, der er karakteristisk for kun én type virusinfektion. Denne omstændighed gør det muligt at forhindre falske diagnostiske resultater.
3. Høj grad af følsomhed. PCR-analyse er i stand til at påvise RNA af viruset i små mængder, hvilket også gør det muligt at spore latente infektioner i tide.

Indikationer for

Test for PCR for hepatitis C er nødvendigt, hvis det foreligger:

• at have kontakt med syge mennesker, hvilket kan føre til infektion;
• symptomer på levercirrhose (udvidelse af milten, ukarakteristiske ændringer i leverens størrelse, påvisning af venøs plexus på underlivet under huden);
• positive resultater af ELISA;
• øget aktivitet af AST og ALT (manifesteret i den biokemiske analyse af blod);
• behovet for at kontrollere antiviral terapi
• den indledende fase af behandlingen for behovet for at etablere en viral belastning;
• gennemførelse af det afsluttende stadium af terapi for at udelukke mulige tilbagefald
• patienten har hepatitis B for at udelukke udviklingen af ​​en blandet leverskade.

Sådan forbereder du dig på bloddonation til PCR-forskning

Forberedelse til PCR-analyse omfatter følgende anbefalinger:

• blod bliver taget om morgenen;
• analysen udføres på tom mave, så det er tilrådeligt at tage en pause mellem den sidste fødeindtagelse på 8-10 timer;
• et par dage før diagnosen bør udelukkes fede, krydrede og stegte fødevarer, alkoholholdige drikkevarer og rygning;
• en dag før analysen bør man afholde sig fra tung fysisk anstrengelse, udelukke klasser i gymnastiksalen eller swimmingpoolen.

Analyseresultater: normer og afvigelser

Analysen selv er ikke langsigtet, og den højt kvalificerede specialist hepatolog eller infektionssygdomme dekrypterer resultaterne af PCR for hepatitis C. På baggrund af analysens resultater diagnosticeres patienten.

For at korrekt dechiffrere resultaterne af undersøgelsen tages der hensyn til indikatorerne

• biokemisk analyse af blod;
• ultralyddata;
• biopsi resultater.

Fortolkning af kvantitativ analyse

Når man opnår resultaterne af PCR-kvantitativ analyse, tages følgende indikatorer i betragtning:

PCR-metode til påvisning af hepatitis C

PCR er en polymerasekædereaktion, som bruges til at bestemme forekomsten af ​​hepatitis C i serum. Resultatet kan være positivt og negativt.

Fordelene ved PCR-metoden

Denne diagnostiske metode har følgende fordele:

1. PCR-metoden gør det muligt at bestemme følgende resultater:
   • tilstedeværelsen af ​​et RNA-virus;
   • grad af stråling
   • oprindelige genetiske oplysninger
   • unikke og unikke genetiske data.
2. Du kan bruge det nødvendige kliniske materiale:
   • blod;
   • plasma;
   • urin;
   • kropsvæsker og udskillelse;
   • sputum og andre.
3. Tillader dig at bestemme i blodet af mere end en mikroorganisme på én gang, i modsætning til andre prøver.
4. Få resultater inden for 24 timer.
5. Forenklede metoder til opbevaring og transport af analyser er patogener bestemt selv i et dødt miljø.
6. Den unikke PCR giver dig mulighed for at identificere bestemte mikroorganismer, der ikke er acceptable for nogen anden prøve.
7. Høj grad af følsomhed for reagenser, testen er den mest præcise af sin art.

Egenskaber ved den kvalitative analyse af PCR

En kvalitativ test udføres for at bestemme tilstedeværelsen af ​​en virus i blodet og for at opnå et negativt eller positivt resultat.

Indikationen for denne type diagnose er påvisning af antistoffer mod hepatitis C i patientens krop.

Mulige resultater:

• detekteret (positiv);
• ikke opdaget (negativ).

En kvalitetstest er ikke egnet til patienter med meget lavt indhold af virus i blodet, så det har en vis følsomhed.

Resultat "detekteret"

Detektere hepatitis C-viruset kan være et par uger efter kroppens infektion, selv i mangel af antistoffer mod dette patogen. Dette resultat indikerer tilstedeværelsen i kroppen og blodgruppen af ​​et fragment af RNA karakteristisk for hepatitis C.

Patienten betragtes som inficeret med denne virus og undergår yderligere spredning af patogene celler i kroppen.

Resultat "ikke opdaget"

Denne mulighed tyder på, at der i stikprøven af ​​biologisk materiale under undersøgelse ikke er nogen RNA-fragmenter specifikke for hepatitis C. Dette er et negativt resultat.

Sensitiviteten af ​​testen afslører ikke det lave indhold af RNA-fragmenter, så det "ikke detekterede" resultat er ikke altid plausibelt.

Funktioner af fortolkning af resultater

Hovedtræk ved fortolkningen af ​​resultaterne er tærskelfølsomheden af ​​PCR-metoden.

Det afhænger af følgende indikatorer:

• undersøgelsens nøjagtighed
• typen og kvaliteten af ​​det anvendte udstyr.

Det bemærkes, at følsomheden kan variere mellem 10-500 IE / ml. Heraf følger, at hvis en virus er til stede i patientens krop i en koncentration på mindre end 10 IE / ml, vil testen vise resultatet "ikke detekteret". Men det betyder ikke, at patogenet er helt fraværende.

Varianter af diagnostiske systemer

I øjeblikket er der følgende muligheder for diagnostiske systemer:

1. Hvis der tages blod fra en patient, der undergår antiviral behandling, skal der anvendes diagnostiske systemer med en følsomhed på mindst 50 IE / ml. Følgende analysatorer anvendes til dette formål:
   • Cobas Ampicolor HCV-Test;
   • RealBest HCV RNA.
2. For at lave den endelige diagnose af "Hepatitis C" er det nødvendigt at registrere RNA-viruset i tre forskellige biologiske materialeprøver. Disse anbefalinger er udviklet af Verdenssundhedsorganisationen. Hvis resultatet er tre gange negativt, bekræftes diagnosen ikke.
3. I øjeblikket findes der i tillæg til PCR-metoden en mere præcis test, kaldet TMA (transkriptionel amplifikationsmetode). Dens tærskel for følsomhed er meget højere end i andre diagnosemetoder.

Udvalget af detekterede virus modifikationer

På dette stadium af genetisk udvikling er flere typer og varianter af virusmodifikation kendt.

Laboratoriediagnostik i vores land med absolut nøjagtighed kan bestemme følgende genotyper:

Egenskaber ved PCR-kvantitativ analyse

Kvantitativ analyse er definitionen af ​​hepatitis C-virus i den menneskelige krop. Under undersøgelsen bestemmes RNA og viral belastning i udgangsmaterialet ved PCR. Ellers kan vi sige, at testen giver dig mulighed for at identificere, hvor mange virale celler der er i en biologisk væske. Til denne type undersøgelse anvendes kun venøst ​​blod. Der er ingen specifik testpræparation.

Kvantitativ analyse giver dig mulighed for at overvåge på behandlingsstadiet, der allerede er påbegyndt og evaluere dets effektivitet. Til evaluering tages testdata før og under terapeutiske indgreb. Ved hjælp af de opnåede resultater er det muligt at forudsige sygdomsforløbet.

Med succesen af ​​den valgte behandlingsmetode efter 3 måneder, bør mængden af ​​RNA falde flere gange. Ifølge anbefalingerne udføres kvantitativ analyse efter en, derefter efter tre og seks måneder. Det sidste resultat med succes af behandlingen skal være negativ.

Evaluering af resultaterne af kvantitativ PCR-test

I vores land er der 2 mulige muligheder for at vurdere resultatet af en kvantitativ PCR-test:

• Antallet af kopier pr. milliliter biologisk væske;
• Antallet af internationale enheder pr. milliliter.

For at få internationale enheder er antallet af kopier divideret med 4.

• høj med PCR over 800.000 IE / ml;
• lav med PCR under 400.000 IE / ml.

Resultatet af den kvantitative test giver 2 muligheder:

• "Under måleområdet";
• "Ikke registreret" (negativ).

Rating: "under måleområdet"

En sådan konklusion er foretaget, når en kvantitativ RNA-test ikke registrerede det forårsagende middel af hepatitis C i cellematerialet. Men viruset er stadig til stede i blodet. Analysens pålidelighed bekræftes ved den kvalitative metode, da tærsklen for følsomheden af ​​den kvantitative test muligvis ikke opdager små værdier og koncentrationer af patogenet.

Rating: "not detected"

En sådan konklusion gøres, når RNA-vira af hepatitis C ikke blev detekteret i kilematerialet under diagnosen. Dette er et negativt resultat.

Fortolkning af resultaterne af analysen af ​​kvantitativ PCR test

Brug af indikatoren for virusbelastning bestemmer:

• graden af ​​forsømmelse af sygdommen
• hvor smitsom patienten er
• effektivitet af antiviral terapi.

Jo højere hastigheden af ​​hepatitis C-virus i kroppen er, jo mere farlig patienten er for andre mennesker og jo mere progressive hans sygdom.

Hepatitis C PCR er en vigtig diagnostisk metode, især under terapeutiske interventioner. Takket være de opnåede negative eller positive resultater er det muligt at evaluere deres effektivitet, helbrede patienten helt eller forkorte behandlingstiden.

PCR-analyse for hepatitis C

Ved diagnosen "kronisk viral hepatitis C (CVHS)" kræves en omfattende undersøgelse af personen, som omfatter kliniske, laboratorie- og instrumentelle undersøgelser. Vigtigt ud fra diagnosens synspunkt for den korrekte diagnose er PCR-metoden - polymerasekædereaktionen.

Hvad viser denne analyse, og hvorfor er det nødvendigt?

Denne laboratoriemetode registrerer RNA i hepatitis C-viruset i humant blod. Sammen med det enzymbundne immunosorbentassay (ELISA) til antistoffer mod viruset anvendes PCR til at diagnosticere CVHC og dets patogengenotype. Denne forskning er en af ​​de nyeste metoder til laboratoriediagnostik. Dens pålidelighed ved CVHS overstiger 97%, hvilket betragtes som en meget god indikator for forskning.

Der er tre PCR blodprøver for CVHS: kvalitativ, kvantitativ og virusgenotyping. Den første undersøgelse (kvalitative analyser) af viruset registrerer det i blodet og anvendes derfor kun til diagnose.

Den anden (kvantitative) undersøgelse bestemmer graden af ​​viral belastning på kroppen, derfor bruges til at overvåge effektiviteten af ​​behandlingen.

Den tredje PCR (genotyping) præciserer diagnosen, der etablerer virusets genotype, hvilket er meget vigtigt for udnævnelsen af ​​korrekt antiviral behandling.

Kernen i polymerasekædereaktionsteknikken er anvendelsen af ​​enzymer, som multiplicerer patogenets genetiske materiale i biomaterialet. Under processen med sådan replikation opvarmes røret med blod flere gange og afkøles til den temperatur, der kræves for at accelerere den enzymatiske reaktion. Som et resultat af disse manipulationer øges mængden af ​​det virale genom mange gange, så det kan detekteres selv med en minimal mængde.

PCR diagnostik har mange fordele i forhold til andre laboratorietests:

• høj følsomhed - 97-98%;
• garanteret analytisk specificitet (afslører nøjagtigt det patogen, du vil finde, og ikke dets relaterede stamme);
• Gennemførelseshastighed (det tager ikke mere end 2 dage at få en konklusion).

Tre typer PCR-assays

PCR-analyse af høj kvalitet tildeles alle patienter, hvor ELISA-analyse har fundet antistoffer mod HVGS-viruset. Efter udførelse af højkvalitets-PCR kan to svarmuligheder opnås: "RNA er detekteret" eller "RNA registreres ikke." For at detektere mindste mængden af ​​virus i blodet er der brug for testsystemer med en følsomhed på mindst 50 IE / ml. Hvis koncentrationen af ​​viruset i patientens blod er mindre end diagnosticummet kan bestemme, kan resultatet af undersøgelsen være falsk negativt. For at undgå en sådan diagnostisk fejl skal laboratorier, der udfører PCR-diagnostik, være forsynet med meget følsomme testsystemer. I laboratoriet "Invitro" anvendes f.eks. Test med en følsomhed på 15 IE / ml. Laboratoriearbejdere er forpligtet til at give oplysninger om testens følsomhed til patienter og læger efter deres første anmodning.

Kvantitativ analyse af PCR bestemmer graden af ​​viremia, det vil sige koncentrationen af ​​patogenet i blodet, viral belastning. Resultatet af denne undersøgelse er i modsætning til højkvalitets PCR udtrykt i tal, for eksempel 2 x 10 * 6 IE / ml, hvilket betyder 2 millioner internationale enheder i 1 ml blod. Nogle laboratorier bruger en anden indikator - antallet af kopier / ml. Disse to indikatorer er nemme at konvertere: 1 international enhed svarer til 4 kopier af RNA. Således betyder 2 x 10 * 6 IE / ml at 8 × 10 * 6 kopier af viralt RNA i 1 ml, dvs. 8 millioner eksemplarer i 1 ml blod.

Genotyping er definitionen af ​​en af ​​de seks genotyper af en virus. Det kliniske billede, udviklingsgraden af ​​leverkomplikationer og prognosen for patientens fremtidige liv afhænger af årsagsmodtagerens genotype. Genotypen af ​​viruset er meget vigtig allerede i diagnosticeringsfasen, da kombinationen af ​​lægemidler og varigheden af ​​det terapeutiske forløb, der skal tildeles patienten, afhænger af dets korrekte bestemmelse.

Men selv denne tilsyneladende "perfekte" laboratorieforskning har sine ulemper:

• undersøgelsen replikerer det genetiske materiale af alle patogener, endog ikke-levende, hvilket kan forvride resultatet. For at overvåge effektiviteten ved hjælp af PCR gennemføres der derfor ikke tidligere end 2 måneder efter den foregående reanalyse, således at de døde vira kan "forlade" patientens organisme;
• En del af det virale genom, der bestemmes ved hjælp af testsystemer, kan teoretisk være til stede i andre vira eller mikroorganismer, så der er mulighed for et falsk positivt svar;
• vira muterer hurtigt. Sommetider er hastigheden og omfanget af virusmutation så høj, at testsystemet stopper med at fange deres genom. Som et resultat er et falsk negativt resultat muligt.

For at udjævne disse mangler foretager producenter af laboratorietestsystemer til PCR-diagnostik hele tiden deres test, herunder krydsreaktioner og følsomhed over for en bestemt genotype af viruset.

Hvordan man tager en PCR-test for hepatitis C?

For at indgå en PCR-undersøgelse skal være pålidelig, er det nøje at overholde reglerne for forberedelsen af ​​dets adfærd:

• undersøgelsen udføres på en tom mave (glukose, fedtstoffer, mineraler, der kommer ind i blodet fra fødevarer, kan påvirke hastigheden og kvaliteten af ​​enzymreaktionen);
• Gabet mellem det sidste måltid og blodprøveudtagningen til analyse skal være mindst 8 timer;
• på tærsklen til undersøgelsen er det forbudt at tage alkohol og forbruge fede fødevarer, hvis elimineringstid er forlænget;
• en dag før du går til laboratoriet bør undgå stærk fysisk og følelsesmæssig stress;
• indtil blodprøveudtagning ikke anbefales at ryge.

For at undgå udfald af falske konklusioner skal den påståede patient komme til laboratoriet lidt tidligere, end blodet vil blive taget. Det tager 15-20 minutter for en person at tage vejret, roe sig ned. Adrenalin, som er til stede i blodet efter en hurtig tur, kan påvirke resultatet af undersøgelsen.

Hvis patienten refererer til analyse, tager medicin, skal han underrette lægen herom. Det er muligt, at nogle af dem skal nægtes i et stykke tid (hvis muligt).

Resultatet af analysen af ​​PCR for hepatitis C

Afkodning af resultaterne involveret i laboratorielægen i laboratoriet, der gennemførte analysen. Afkodning er bestemmelsen af ​​afvigelsen af ​​resultatet opnået fra normen. Indikatorhastigheden er etableret direkte af producenten af ​​testsystemet, som bruges af laboratoriet til diagnostik. Det er derfor ikke overraskende, at virusbelastningen i nogle laboratorier bestemmes i IE / ml, og i andre i kopier / ml.

Efter at have opnået konklusionen er det nødvendigt at kunne fortolke det korrekt. Behandlingen af ​​resultaterne af undersøgelsen skal udføres af den behandlende læge hos patienten med hepatitis C. Kun efter en objektiv, instrumentel og laboratorieundersøgelse af patienten kan lægen opnå en tilstrækkelig mængde data til korrekt fortolkning af de opnåede PCR-resultater.

Evaluering af kvalitativ analyse giver som regel ikke problemer, selv hos patienter. Resultatet der kan kun være en: "detekteret" eller "ikke detekteret". I dette tilfælde er den anden af ​​dem normen.

Indikatorer for kvantitativ analyse er vanskeligere at fortolke. Det viser graden af ​​viral belastning på patienten. Selv blandt hepatologer er der ingen konsensus om, hvordan man skal behandle det påvist viremia. De fleste læger er tilbøjelige til at tro på, at en høj belastning på mere end 8 × 10 * 5 IE / ml bør overvejes. En belastning på mere end 1 × 10 * 7 IE / ml betragtes som meget høj, mens en lav belastning er mindre end 4 × 10 * 5 IE / ml.

Graden af ​​viral belastning indikerer virulens (aggressivitet) af viruset: jo større er dets mængde i blodet, jo hurtigere kan komplikationerne af leveren udvikle sig. En høj koncentration af viruset i en gravid kvindes blod øger sandsynligheden for dens indtrængning gennem hæmatocenterale barriere mod fosteret. Viremia påvirker også effektiviteten af ​​behandlingen: med lavt tal er effektiviteten af ​​behandlingen højere end hos de høje.

For at være sikker på nøjagtigheden af ​​analysen af ​​PCR for hepatitis C, er det kun at foretrække kun de laboratorier, der er velprøvede. Prispolitik i dette tilfælde bør ikke spille en primær rolle.

PCR-undersøgelse af hepatitis C: typer, indikationer, transkription

Viral hepatitis C er en alvorlig sygdom, der opstår med leverskader. I 80% af patienterne bliver det kronisk. Viruset multiplicerer i leveren celler - hepatocytter - og forårsager deres død. Døde væv erstattes af bindevævsfibre, fibrose udvikler sig.

Efterhånden som fibrose udvikler sig, er leveren ikke i stand til at udføre sine funktioner, levercirrhose begynder, hvilket er farligt for dets komplikationer: forøget tryk i portalvejsystemet, gastrointestinal blødning, svækket blodkoagulation, mentale forandringer på grund af skade på hjernekernerne ved giftige produkter.

Årsagen til sygdommen er infektion med en virus fra familien Flaviviridae, som tilhører typen af ​​RNA-vira. Dette betyder, at det genetiske materiale, ved hvilket patogenerne af patogenet syntetiseres, kodes i ribonukleinsyremolekylet. Infektion forekommer gennem blod, seksuelt og fra en gravid kvinde til fosteret. Desværre kan en tilstrækkelig stor tid passere mellem infektion og begyndelsen af ​​antistofproduktion - fra to uger til seks måneder. Dette tillader ikke at bestemme infektionen med ELISA og begynde behandling på et tidligt stadium.

Hvad er PCR-analyse?

PCR er en metode til molekylær analyse, som gør det muligt at detektere patogenets genetiske materiale allerede i den første uge efter infektion ved hjælp af polymerasekædereaktion. Undersøgelsen har høj specificitet, nøjagtighed og giver ikke blot mulighed for at bestemme tilstedeværelsen eller fraværet af virussen, men også dens koncentration og genotype.

Til undersøgelsen tages en patients blod, hvor virus RNA muligvis kan være placeret. Primerne tilsættes til de kunstigt syntetiserede regioner af det ønskede gen af ​​lille længde, og RNA polymerase er et specielt enzym, der gentagne gange øger mængden af ​​patogenets genetiske materiale. Ved hjælp af et specielt apparat udføres flere varme- og kølecykler. Derefter analyseres materialet og sammenlignes med kendte gener af viruset, på grundlag af hvilket der konkluderes om tilstedeværelsen eller fraværet af infektion.

Typer af PCR-analyse for hepatitis C

Der er tre typer af PCR-analyser:

Kvalitativ analyse af PCR. Den første fase af undersøgelsen. Det giver dig mulighed for at identificere virusets genetiske materiale i blodet.

Kvantitativ analyse af PCR. Tillader dig at bestemme viral belastningen - koncentrationen af ​​patogenens genetiske materiale i en milliliter blod. Denne undersøgelse udføres inden behandlingsstart, og derefter i den første, fjerde, tolvte og (hvis kurset er lang) 24-ugers behandling for at vurdere dets effektivitet.

Genotypebestemmelse. Den forårsagende middel til hepatitis C muterer ofte og hurtigt. Der var syv varianter af denne virusgenotype fundet på planeten. I Rusland er den første, anden og tredje type almindelig. Hver har en forskellige genotyper er resistente over for terapi, såsom behandling effektivitet af den første type er tres procent, og den anden og tredje er tallet femogfirs. For at vælge de relevante lægemidler og foreskrive et behandlingsforløb med tilstrækkelig varighed er det derfor nødvendigt at bestemme præcis hvilken type virus patienten er inficeret med.

Indikationer for PCR-analyse for hepatitis C

PCR-undersøgelsen er ordineret i følgende tilfælde:

• kontakt med en syg person, hvor infektion kan forekomme
• positiv enzymimmunoassay;
• tegn på levercirrhose: en ændring i leverens størrelse, en forstørret milt, udseendet af en subkutan venøs plexus på underlivet;
• Udseendet af symptomer på leverskader: smerter i højre underliv, gulning af huden;
• øget aktivitet af ALT og AST i den biokemiske analyse af blod;
• inden behandlingen påbegyndes for at bestemme viral belastning
• at overvåge effektiviteten af ​​antiviral terapi
• efter behandling for at kontrollere tilbagefald
• i nærvær af diagnosticeret hepatitis B, for at udelukke blandet leverskade.

Forklaring af PCR-undersøgelser på hepatitis C

Afkodning af PCR-analyse og enzymimmunoassay for hepatitis C bør udføres af en specialist på hepatolog eller infektionssygdomme. Analyse af resultaterne af PCR er nødvendig i kombination med data om biokemisk analyse af blod, biopsi og ultralyd. Kun en kvalificeret læge vil være i stand til at analysere forskningsresultaterne og på grundlag af dem foreskrive den korrekte behandling.

Dekodning af kvalitativ analyse.

I det analyserede biologiske materiale fandt patogenens genetiske materiale. Infektion bekræftet.

Infektionen er fraværende, eller mængden af ​​patogen-RNA er under følsomhedsgrænsen.

Afkodning af kvantitativ analyse.

Normal sats for raske mennesker. Det betyder, at testmaterialet ikke indeholder Hepatitis C RNA, eller dets koncentration er under undersøgelsens følsomhedstærskel.

RNA-koncentrationen er under kvantificeringsområdet. Disse resultater fortolkes meget omhyggeligt, korrelerer dem med data fra andre undersøgelser, ofte genstudier.

Niveauet af viral belastning ved en given koncentration anses for lav. Normalt betyder et fald i mængden af ​​virus, at terapien er vellykket.

Mere end 8 * 10 ^ 5 IE / ml

Niveauet af viral belastning ved en given koncentration anses for høj.

Mere end 2,4 * 10 ^ 7 IE / ml

Mængden af ​​RNA er over den øvre grænse for kvantificeringsområdet. Det er umuligt at drage konklusioner om graden af ​​viral belastning med dette resultat. Normalt i sådanne tilfælde gentages testen med fortynding af en blodprøve.

Afkodning af genotyping.

RNA af en bestemt genotype detekteret

Hepatitis C-virus af en bestemt genotype og subtype blev påvist i biomaterialet. Resultatet er kodet i romertal og latinske bogstaver, for eksempel - 1a, 2b. I alt er der syv genotyper og syvogtres subtyper, men i Rusland er der kun tre første typer.

Hepatitis C virus RNA detekteret

RNA blev fundet i blodet af en sjælden genotype for Rusland, som ikke kan tilskrives den første, anden eller tredje type. Mere forskning er nødvendig.

Dette resultat indikerer at patienten er sund, eller at mængden af ​​patogen-RNA'et er for lille.

Det er muligt, at PCR-analyse for hepatitis C er negativ, og enzymbundet immunosorbentassay genkender antistoffer mod viruset. Det betyder, at patienten havde akut hepatitis C og genvundet alene. Ca. 20 tilfælde af infektion resulterer i spontan opsving, hvis patientens krop har tilstrækkelig modstand mod infektionen.

Selv om PCR er meget nøjagtigt, kan dets resultater blive forvrænget i følgende situationer:

• blod blev transporteret til laboratoriet under uhensigtsmæssige betingelser, temperaturen blev overtrådt;
• biomaterialeprøven var kontamineret;
• der var resterende spor af heparin og andre antikoagulantia i blodet;
• Undersøgere viste sig at være hæmmere - stoffer, der nedsætter eller stopper polymerasekædereaktionen.

Fordelene ved PCR over andre metoder

Diagnose i de tidlige stadier. PCR detekterer det genetiske materiale af det forårsagende middel. Ved hjælp af immunofluorescensanalyse kan kun immunoglobuliner identificeres - stoffer, som kroppen producerer som reaktion på en infektion. I tilfælde af hepatitis C infektion kan mellemrummet mellem infektionen og begyndelsen af ​​immunresponset være flere uger og måneder, på dette tidspunkt vil ELISA være ineffektivt. PCR vil give et svar i den første uge efter infektion.

Lav sandsynlighed for fejl. I det undersøgte materiale bestemme området for genetisk materiale, som er karakteristisk for kun en type patogener. Dette eliminerer falske resultater. Når ELISA-fejl er mulige, da samme type antistof kan frigives mod forskellige vira, kaldes sådanne antistoffer tværsantistoffer.

Høj følsomhed. PCR gør det muligt at opdage årsagsmidlet RNA selv i minimale mængder. Dette gør det muligt at identificere skjulte infektioner.

Sådan forbereder du dig på bloddonation til PCR-forskning

Til PCR-analyse af hepatitis C opsamles venøst ​​blod. Normalt tages to portioner blod fra patientens vener ad gangen: den første sendes til PCR og den anden ved ELISA. Dette gøres for at nøjere vurdere, hvor meget en patient er inficeret med en virus, og hvordan immuniteten kæmper imod det.

Normalt er patienten forpligtet til at overholde følgende regler:

• en blodprøve tages om morgenen;
• Intervallet mellem det sidste måltid og bloddonationen skal være otte til ti timer;
• to eller tre dage før analysen er det nødvendigt at opgive stegte og fede fødevarer og alkohol;
• i 24 timer før analysen skal patienten undgå fysisk anstrengelse: bære ikke vægt, gå ikke til gymnastiksalen eller swimmingpoolen.