Tilgængeligheden af moderne anti-hepatitis B (HBV) lægemidler med klare indikationer for deres administration kræver en nøjagtig og hurtig kontrol af diagnosen. På grund af knappe kliniske data i de første uger af sygdommen og begrænsede immunanalysemetoder for analyse falder diagnosens hastighed dog.
Tilstedeværelsen af markører anti-HBc IgM, HBsAg, anti-HBc, HBeAg, anti-HBe giver dig mulighed for at bekræfte HBV eller fastslå en tidligere sygdom. Men det er muligt at bestemme tilstedeværelsen af aktive virale partikler i blodet og tælle deres antal på tidspunktet for undersøgelsen ved hjælp af PCR - en kvantitativ sanntidsprøve til detektion af hepatitis B. Metoden sammenligner med diagnosticeringsmetoderne ELISA med diagnostiske problemer og gør det muligt at forudse sygdommens forløb under modtagelsen antivirale lægemidler.
Grundlæggende om sygdomsdiagnose
Diagnose af hepatitis B er baseret på vurdering af kliniske manifestationer, enzymimmunoassay og instrumentelle metoder til forskning. Sygdommen opstår i den akutte fase efter inkubationsperioden og afhænger af infektionsdosis og effektiviteten af behandlingen, går i et kronisk stadium. Hovedformålet med behandlingen er at forhindre kronisering, det vil sige eliminering af alle virale partikler fra blodet. Det kliniske forløb af sygdommen er en kur uden efterfølgende viremi.
Faktumet ved at eliminere infektionen skal bevises ved en kvantitativ metode til forskning.
Da ethvert immunitest med kvalitativ enzym gør det muligt at diagnosticere HBV indirekte, det vil sige, det viser ikke patogenens tilstedeværelse i kroppens indre miljø, men karakteriserer immunresponset på infektionen, overvågning af effektiviteten af terapi, og kendsgerningen om helbredelse bliver vanskeligt at bevise. Derfor bør patienten med hepatitis B eller med tilstedeværelsen af diagnostiske kriterier i sin favor udføres polymerasekædereaktion for at kvantificere antallet af virale partikler i blodet. Den diagnostiske hastighed er manglen på kopier af DNA'et af infektionen.
Beskrivelse af diagnosemetoden
Den meget følsomme metode til PCR-diagnose af hepatitis B tilhører kategorien genetisk manipulerede molekylærbiologiske undersøgelser. Gennem det bestemmes mængden af viralt DNA i patientens biologiske materiale og den tilladte hastighed. Ifølge de opnåede resultater er antallet af viruspartikler pr. Enhedsvolumen etableret. Materialet til den diagnostiske test er patientens venøse blod. Et indtag er ønskeligt på tom mave på grund af den mulige virkning af chyleserum på resultatet af undersøgelsen.
De opnåede resultater skal gives til lægen for fortolkning og bestemmelse af yderligere taktik. Uafhængig dekodning repræsenterer ikke diagnostisk værdi.
Betydningen af resultatet af antallet af virale partikler opnået ved PCR-metoden overstiger værdien af enzymimmunoassays. Da analysen i realtidstilstand viser tilstedeværelsen af sygdomsfremkaldende middel i blodet, er informationsindholdet højere end andre. Hvis ELISA kun angiver tilstedeværelsen af antistoffer, der observeres fra 4 uger af inkubationsperioden og varer mere end 8 uger efter viruseliminering fra blodet, bekræfter polymerasekædereaktionen klart sygdommens aktive forløb eller dets kur, karakteriserer dynamikken i den foreskrevne behandling.
Polymerasekædereaktion med kvantitativ bestemmelse af patogenpartikler løser diagnostiske spørgsmål til fordel for at stoppe behandlingen på grund af genopretning eller vedvarende behandling på grund af manglende effektivitet. Metoden er så specifik som mulig for HBV-virus og skelnes af en acceptabel fejl.
Indikationer og præstationsmål
Kvantitativ analyse af hepatitis B er den mest pålidelige og giver dig mulighed for at bekræfte de data, der er opnået ved ELISA-metoder. Han er udpeget, når:
- opnåelse af et positivt diagnostisk resultat af ELISA;
- behandling af en patient med en etableret diagnose af viral leverskade
- i diagnosen hepatitis blandet etiologi;
- om nødvendigt bestemme viral belastning hos en patient.
Da enzymimmunanalysemetoden anvendes mere omfattende i udøvelsen af en smitsomme sygeplejerske, kan nogle patienter med mild sygdom behandles uden at tælle viralbelastningen. Men PCR betragtes generelt som "guldstandarden" for diagnostik i hepatologi, da det på grund af det unikke resultat, fjerner en række organisatoriske problemer. Derfor har patientens retning for kvantitativ analyse følgende mål:
- opnåelse af data om antallet af virale partikler i patientens blod;
- bekræftelse af det akutte forløb af hepatitis og rettidig kontrol af kronisk sygdom
- konstant påvisning af latente virusbærere med positive ELISA-test, overvågning af deres viremier
- beslutning om udnævnelse af antiviral behandling, dens kombination og opsigelse.
Det væsentligste mål at anvende en kvantitativ PCR-test til detektion af HBV er at identificere mulige kombinationer af behandling. I tilfælde af høj viral belastning giver analysens resultat specialistet mulighed for at fortsætte med kombinationen af lægemidler. Under behandling er det let at bestemme effektiviteten af den foreskrevne farmakologiske behandling baseret på resultatet af PCR. Kun vejledende ved hjælp af data om immunanalysemetoder er det umuligt at fastslå, om behandlingen og dens nuværende effektivitet er rettidige. Derfor er en kvantitativ sanntidsprøve en nødvendig analyse inden behandling med akut hepatitis, latent virusinfektion med høj viremi og kronisk HBV.
Fortolkning af kvantitative PCR testresultater
Fortolkningen af resultaterne af den kvantitative PCR-test bør udføres af patientens behandlende læge. Det er nødvendigt at evaluere den diagnostiske indikator og bestemme terapeutiske taktikker.
En standardanalysator er i stand til at producere en kvantitativ indikator, som afspejler antallet af kopier af virus DNA, der er til stede i det undersøgte venøse blod. Måleenheder - kopier / ml, IE / ml (kopier pr. Milliliter, internationale enheder pr. Milliliter). Fortolkningen af resultaterne er angivet i tabellen med angivelse af forskellige måleenheder.
Dekryptere blodprøve for hepatitis B
Hepatitis B er en af de farligste sygdomme i vores tid.
Det skyldes en virus, der kommer ind i kroppen, når blodet kommer i kontakt med inficeret biologisk materiale, herunder dem, der forbliver på manicure tilbehør, medicinske instrumenter, tatoveringsmaskiner, der ikke er blevet desinficeret på den rigtige måde. Virusen kan også overføres gennem seksuel kontakt.
Hepatitis B analyseres for at diagnosticere sygdommen ved at tage patientens blod.
Infektion forekommer gennem seksuelle og indenlandske ruter, spredningstypen er hæmatogen (gennem blod). Når inficeret, kommer viruset ind i hepatocytterne (leverceller), der produceres i fremtiden. Gennem blodbanen spredes sygdommen hurtigt igennem hele kroppen. Viruset B (HBV) er kendetegnet ved høj modstandsdygtighed overfor virkningerne af temperatur og syre, og er i stand til at opretholde dets skadelige egenskaber i seks måneder.
Hvilke blodprøver har du for hepatitis B?
Hvis hepatitis B viste de første symptomer, er det nødvendigt at bestå test, før behandling og behandling påbegyndes. En blodprøve er en pålidelig metode til at installere hepatitisinfektion. Udført i laboratoriet. Hepatitis B testmateriale gives på tom mave: mindst 8 timer skal passere fra det sidste måltid.
For at detektere hepatitis B-virus i blodet, anvendes der tests af tre typer, som karakteriserer tilstedeværelsen af viruset i blodet:
- analyse for tilstedeværelsen af HBV DNA i materialet ved at studere polymerasekædereaktionen;
- kvalitativ undersøgelse af tilstedeværelsen af anti-HBc IgG proteinet og HBsAg antigenet (fundet i sunde, inficerede og syge);
- analyse for påvisning af proteiner HBeAg og anti-HBc IgM (karakteriserer forværringen af sygdommen).
For fuldstændighed anbefales det at samtidig undersøge flere markører.
Immunologiske test for hepatitis B
De mest almindelige tests for hepatitis B er immunologiske. Deres essens er at opdage antistoffer i blodet produceret af kroppen eller leveren. Prøverne er kvalitative og kvantitative. Hepatitis B tests og transkripter indeholder normalt oplysninger om flere karakteristiske proteiner. Under testen testes følgende antistoffer:
Det forekommer i de tidlige stadier af infektion, før kliniske tegn påbegyndes.
En positiv markør angiver tilstedeværelsen af en virus, men findes også hos helt sunde mennesker. Hvis der er mindre end 0,05 IE / ml til stede i blodet, anses resultatet for negativt. Hvis koncentrationen af antistoffet er højere, anses analysen som positiv.
Det findes i næsten alle inficerede patienter. At holde indikatorer på et højt niveau kan indikere en overgang af sygdommen til en kronisk form af kurset. En positiv markør indikerer tilstedeværelsen af sygdommen i perioden for eksacerbation, langvarig opsving. HBeAg er et ekstremt dårligt tegn. Patienten er meget smitsom. Normalt er protein ikke detekteret i blodet.
Der er to typer anti-HBc antistoffer: IgG og IgM. Tilstedeværelsen af IgM i blodet er et tegn på løbet af den akutte form, patientens høje infektivitet og muligheden for sygdommen pererohoda i kronisk form. Normalt er tilstedeværelsen af IgM ikke tilladt. IgG er en gunstig indikator. Markøren angiver den kropsformede immunitet mod hepatitis B.
Hvis der opdages en markør i blodet, kan der drages en konklusion om sygdommens gunstige forløb og dannelsen af beskyttende immunitet i patienten.
- Anti-HBs.
Markøren signalerer genopretning og dannelse af immunitet.
HBV DNA-detektion ved hjælp af PCR
Til laboratorieundersøgelse og påvisning af tilstedeværelsen af en diagnose af hepatitis B i blodet anvendes PCR-metoden. Den måde, polymerasekædereaktionen betragtes på, er den mest up-to-date inden for sygdomsdetektering.
Den endelige dekodning viser om der er spor af genets tilstedeværelse af patogenet i levercellerne.
Hvis alle principper følges under forskningen, er resultatet absolut nøjagtigt. Metoden bruges til diagnose, der anvendes i behandlingsprocessen og i antiviral terapi.
- En højkvalitets PCR på totalen har kun to betydninger: "detekteret" og "ikke detekteret". Proceduren udføres for hver patient med mistænkt hepatitis. Med en gennemsnitlig følsomhed af PCR-testen i området fra 10 til 500 IE / ml, med lave niveauer af virus-DNA i blodet, vil der ikke blive registreret noget genmateriale.
- Kvantitativ PCR. I modsætning til det kvalitative indikerer det ikke kun hepatitis B. Kvantitativ analyse angiver, hvor langt normen for en sund person er langt fra patientens indikatorer i numeriske termer. Metoden gør det muligt at vurdere sygdomsstadiet og foreskrive behandling. Sensitiviteten af PCR-testen i kvantitativt efterfølgende er højere end i den kvalitative metode. Grundlaget er antallet af detekterede DNA, som udtrykkes i eksemplarer pr. Milliliter eller IE / ml.
Derudover giver kvantitativ PCR indsigt i virkningerne af behandling og rigtigheden af den valgte behandling. Afhængigt af mængden af viralt genmateriale kan der træffes beslutning om at forkorte behandlingsvarigheden eller omvendt at udvide og styrke den.
Biokemisk blodprøve for hepatitis B
Metoden til biokemisk analyse er nødvendig for at opnå et fuldstændigt klinisk billede af sygdommens forløb. Denne diagnostiske metode giver en forståelse for de indre organers arbejde (lever, nyre, galdeblære, skjoldbruskkirtel og andre). Afkodning giver en forståelse for stofskiftet i kroppen, de mulige stofskiftesystemer. Detaljerede indikatorer vil indikere mangel på vitaminer, makronæringsstoffer og mineraler, der er nødvendige for menneskers sundhed og liv.
Du kan tage en test for hepatitis hos ethvert andet diagnosticeringscenter (Invitro, Gemotest, etc.). Biokemisk blodprøve til påvisning af hepatitis B omfatter følgende komponenter.
Kvantitativ analyse af enzymet ALT (AlAt)
Dette enzym findes oftest i forhøjede koncentrationer i akut og kronisk hepatitis. Stoffet er indeholdt i leveren celler, og med organer læsioner gennem blodbanen kommer ind i blodkarrene.
Mængden og koncentrationen i blodet under en virussygdom ændres konstant, så forskningen udføres mindst en gang om kvartalet. ALT afspejler ikke kun aktiviteten af hepatitisvirus, men også graden af forringelse forårsaget af det i leveren. ALT niveauet stiger med stigende mængder giftige stoffer af lever oprindelse og i tilstedeværelsen af virussen.
Kvantitativ analyse af AST-enzym
Protein er en bestanddel af de vigtigste organer af mennesker: lever, nervesvæv, nyrevæv, skelet og muskler. Enzymet er involveret i at opbygge den vigtigste muskel - hjertet. Høj AST hos en patient med hepatitis B kan signalere leverfibrose. En lignende situation opstår, når alkohol, lægemiddel eller anden giftig skade på levercellerne.
Overophedningsindikatorer er tegn på leverskader på mobilniveau. Ved diagnosering er det nødvendigt at tage højde for forholdet mellem AST og ALT (de Rytis-koefficienten). En samtidig stigning i koncentrationen af begge enzymer er et tegn på levernekrose.
bilirubin
Stoffet dannes i milt og lever som følge af nedbrydning af hæmoglobin i deres væv. Denne komponent er en del af gallen. Der er to proteinfraktioner: Direkte bilirubin (bundet) og indirekte bilirubin (fri). Med en stigning i blodbundet bilirubin giver det mening at mistanke om hepatitis eller anden leverskade. Dette er direkte relateret til cytolysen af leverceller.
Hvis mængden af indirekte bilirubin øges, er der sandsynligvis en læsion af parenkymvæv eller Gilbert's syndrom. Det høje niveau af bilirubin ifølge resultaterne af analysen kan være en følge af forhindring af galdekanalerne. Når niveauet af bilirubin er over 30 mikromol pr. Liter, udviser patienten en icteric nuance af huden, urinen bliver mørk og øjnets hvide ændrer deres farve.
albumin
Syntese af dette protein forekommer i leveren. Hvis mængden reduceres, indikerer dette et fald i syntesen af enzymer i kroppen på grund af forekomsten af alvorlige læsioner af levercellerne.
Total protein
Hvis mængden af det samlede protein bliver signifikant lavere end den accepterede norm, indikerer dette en afmatning i leverenes funktion.
GGT (GGTP)
Et enzym anvendt til påvisning af obstruktiv gulsot og cholecystitis. En stigning i niveauet af GGT er et tegn på giftig leverskade. Kan provokeres ved kronisk alkoholisme og ukontrolleret brug af stoffer. Protein er særligt følsomt over for toksiner og alkohol. Under deres indflydelse vokser dets aktivitet hurtigt. Opretholdelse af en høj koncentration af GGT i blodet i lang tid taler om alvorlig leverskade.
kreatinin
Det er et produkt af proteinmetabolisme, der forekommer i leveren. Et skarpt fald i niveauet er et signal om, at orgelet sænker ned.
Proteinfraktioner
Et fald i niveauet af proteinfraktioner er et tegn på leverpatologi.
Dekodningsanalyse for hepatitis B og værdier er normale
Diagnosticering af hepatitis B er en kumulativ undersøgelse af indikatorer. Kun deres omfattende analyse gør det muligt at drage konklusioner om patientens infektion. Overvej dekodningsanalysen for hepatitis B. Til sammenligning er mængden af stoffer i blodet.
Dekryptere blodprøve for hepatitis B
I den medicinske verden betragtes hepatitis B som en af de farligste i vores dag.
Denne virus er i stand til at transmittere ved kontakt med inficeret blod - det kan være en saks til naglen i neglesalonen, medicinske instrumenter, især instrumenterne til tandlæger, der ikke underkastes den nødvendige sterilisering, eller det blev ikke udført på en pålidelig måde. Desuden er viruset seksuelt overført.
For at fastslå sygdommen for hepatitis B skal patienten tage blod til analyse.
Som beskrevet ovenfor kan viruset overføres seksuelt, gennem husholdninger, det tilhører den hæmatogene type spredning. Når inficeret, kommer virussen i leveren celler, og derfra begynder at sprede sig gennem hele kroppen. Viruset spredes gennem kredsløbssystemet, det er ekstremt bestandigt mod temperatur og bevarer sin evne til at skade levende celler.
Hvilke blodprøver har du for hepatitis B?
I tilfælde af at en person har oplevet de første symptomer på hepatitis B sygdom, skal du straks kontakte en læge og blive testet. Ved undersøgelse af en patient tages blod til at teste det. Blod er taget på tom mave, det sidste måltid skal være mindst 8 timer siden.
For at fastslå sygdommens tilstedeværelse i menneskekroppen er det nødvendigt at lave tre typer blodprøver:
- Polymerasekædereaktion vil vise om der er HBV DNA i celler;
- Undersøg tilstedeværelsen af protein og antigen i patientens blod;
- Analyser om tilstedeværelsen af protein vil indikere en eksacerbation af sygdommen.
Læger udfører ofte kliniske tests på flere markører for at få et komplet billede af sygdommen.
Immunologiske test for hepatitis B
I løbet af denne tidsperiode er immunologiske tests for hepatitis B pålidelige. Testene tager sigte på at detektere antistoffer i blodet, der dannes i leveren. Typisk involverer test for hepatitis B dekodning af de indsamlede data af individuelle proteinceller. Vær opmærksom på sådanne antistoffer under testen:
- HBsAg - de kan ofte findes i begyndelsen af infektionen, selv før sygdommen giver mulighed for at vide. En positiv markør indikerer at personen er smittet, selvom der har været tilfælde af et positivt resultat i en perfekt sund person. Resultaterne er negative, når der ikke er mere end 0,05 IE / ml i patientens krop, med en højere koncentration af antistoffer - analysen er positiv.
- HBeAg - disse antistoffer findes hos næsten alle inficerede patienter. Med langvarig høj koncentration af antistoffer i blodet bliver sygdommen en kronisk form. En positiv markør betyder forværring af sygdommen. Tilstedeværelsen af det førnævnte antistof i patientens krop indikerer, at sygdommen skrider frem og kommer til en top.
- Anti-HBc har to typer antistoffer - l gG og lgM. Tilstedeværelsen af antistoffer lgM i blodet tyder på, at sygdommen kommer til sit højeste punkt og kan omdanne til en kronisk form. Lægerne skal sikre, at dette antistof ikke øger blodtalene. Heldigvis er lgG god, det betyder dannelsen af immunitet mod hepatitis B-viruset.
- Anti-HBe-antistof siger, at sygdommen fortsætter på en normal måde, og immuniteten mod hepatitis B dannes i patientens krop.
- Anti-HBs - det betyder at patienten er sund og hans immunsystem er signifikant stærkere.
HBV DNA-detektion ved hjælp af PCR
For en klinisk undersøgelse, der vil hjælpe med at bestemme, om en patient er inficeret med hepatitis B-viruset, skal du vælge CRC-metoden. PCR står for polymerasekædereaktion ved at studere det, du kan bestemme tilstedeværelsen af en virus i kroppen.
Resultaterne af undersøgelsen bidrager til at bestemme forekomsten af et genpatogen i levercellerne. Med korrekt procedure - anses resultaterne som pålidelige.
- Højkvalitets RPC - positivt eller negativt resultat. Denne procedure er obligatorisk for alle patienter med mistænkt infektion med hepatitis B. I tilfælde af, at viruset er i små mængder i DNA-cellerne, vil det ikke blive detekteret.
- Kvantitativ RPC. Denne undersøgelse viser ikke blot tilstedeværelsen eller fraværet af virusen, men også infektionsstadiet. Ved at bestemme sygdomsstadiet kan du tildele det nødvendige forløb af medicinsk terapi.
Blandt andet hjælper ROC med at præcist ordinere behandling og endog justere doseringen af stoffer. Behandlingsbehandlingens varighed bestemmes også, i visse tilfælde kan den afsluttes før tid, og andre patienter kræver et yderligere kursus af rehabilitering.
Biokemisk blodprøve for hepatitis B
For at få hele billedet af infektion og sygdomsforløbet er det nødvendigt at lave en biokemisk blodprøve. Denne undersøgelse vil hjælpe med at bestemme tilstanden af patientens indre organer og hvordan de virker. Analyser giver et generelt billede af de metaboliske processer i kroppen og taler også om metabolismen.
Biokemisk analyse vil også angive alle de vitaminer og sporstoffer, der er nødvendige for kroppen til at bekæmpe sygdommen normalt og for at styrke immunsystemet.
Hepatitis B test kan tages på enhver klinik, privat eller offentligt. Når en hepatitis B-virus detekteres i den menneskelige krop, er der ved biokemisk analyse sådanne komponenter.
Kvantitativ analyse af enzymet ALT (AlAt)
Dette enzym kan findes i høje koncentrationer, med udviklingen eller kronisk form for infektion med hepatitis B-viruset. Enzymet er i leverens celler, og på grund af blodbanen spredes det gennem alle fartøjerne.
Koncentrationen af stoffet i kroppen ændres konstant på grund af, hvad der skal udføres analyser en gang om kvartalet. Takket være ALT er det muligt at undersøge ikke blot virusets aktivitet, men også vurdere omfanget af den negative virkning på leveren og organismen som helhed.
Kvantitativ analyse af AST-enzym
Protein er et af de vigtigste stoffer i den menneskelige krop, alle vitale organer er bygget fra det, herunder hjertet. Med hepatitis B sygdom indikerer en høj AST-værdi leverfibrose.
Høje satser angiver ødelæggelsen af leverceller. For den endelige diagnose skal forholdet mellem AST og ALT overvejes. Med en høj koncentration af begge enzymer udvikles levernekrose.
bilirubin
Hæmoglobin er nedbrudt i væv i leveren og milt, takket være hvilket et stof som bilirubin fremkommer. Denne komponent er grundlaget for galde. Bilirubin kan være direkte og indirekte. Med en høj koncentration af direkte bilirubin i blodet er det muligt at etablere infektion med hepatitis B eller andre leversygdomme.
En høj koncentration af ikke-direkte bilirubin i blodet taler om Gilberts syndrom. Derudover signalerer en høj koncentration af et hvilket som helst bilirubin en dårlig patency af galdekanalerne. Når den bliver smittet med hepatitis, bliver urinen mørk, øjets ansigt og hvide bliver gule.
albumin
Albumin er et protein, som er syntetiseret i leveren. Med lave niveauer af dette protein i kroppen er leverceller beskadiget.
Total protein
Faldet i koncentrationen af totalt protein i patientens krop indikerer en krænkelse af leveren.
GGT (GGTP)
Dette enzym bruges af læger til at detektere gulsot eller cholecystitis. Forhøjede niveauer af GGT indikerer giftig skade på leverceller, som kan opstå som følge af kronisk alkoholisme eller stofforgiftning. Protein er yderst følsomt for alkohol og toksiner, og når de er for store, øges proteinets aktivitet.
kreatinin
Proteinmetabolisme opstår i leveren, og produktet af dette metabolisme i medicin kaldes creatinin. Når kreatininniveauet falder, sænker leveren.
Proteinfraktioner
Et lavt niveau af proteinfraktioner indikerer en klar brud på leveren.
Dekodningsanalyse for hepatitis B og værdier er normale
For at diagnosticere en virus er det nødvendigt at gennemføre en række forskellige undersøgelser. Resultaterne af alle tests i komplekset vil give et klart billede af sygdommen.
Kernen i analysen af PCR for hepatitis B og dens resultater
Viral hepatitis B behandles med succes, hvis den detekteres i tid, og antallet af antistoffer og antigener i patientens blod er korrekt bestemt. Ved hjælp af et enzymimmunoassay for hepatitis er det muligt at opdage tilstedeværelsen af virusmarkører, men de kan ikke bestemme det nøjagtige trin i processen.
Til kvantitativ evaluering anvendte PCR diagnostik. Ved hjælp af testen er det muligt at tælle antallet af markører, forudsige sygdomsforløbet og sandsynligheden for helbredelse ved hjælp af antivirale lægemidler.
Den største fordel ved undersøgelsen er evnen til at detektere selv minimale koncentrationer af viruset for at identificere patogenet på arterietrinnet.
Diagnose af hepatitis B
Hepatitis B-virus er meget smitsom og modstandsdygtig over for ydre påvirkninger. Den forbliver aktiv i blodet af en patient i flere uger. Derfor er hver person i risiko for infektion, selvom der er observeret profylakse.
For at diagnosticere sygdommen foreskrive følgende undersøgelser:
Essensen af PCR-metoden
Den amerikanske kemiker K.Mullis modtog Nobelprisen, og hans diagnostiske metode anvendes stadig.
Forfader til PCR-metoden (polymerasekædereaktion) betragtes som en videnskabsmand fra Norge H. Kleppe. Han begyndte først at udføre amplifikationen (genopretning) af DNA ved hjælp af en kort kæde af DNA, det vil sige en syntetisk primer (en slags kopi).
Men forskeren undlod at realisere sin ide. Lignende undersøgelser blev foretaget af den amerikanske kemiker K.Mullis, der i 1993 blev tildelt Nobelprisen for sin opfindelse. Siden da har PCR været anvendt til at etablere faderskab, diagnosticere genetiske sygdomme og opdage virus.
Essensen af reaktionen er, at ved hjælp af enzymer kopieres et bestemt stykke DNA. Du kan kun kopiere det område, der svarer til de angivne parametre, og hvis det er i den præsenterede prøve. Følgende komponenter anvendes til at starte reaktionen:
- Matrix DNA med et websted, der skal kopieres.
- Primers tilsvarende i struktur til DNA.
- Polymerase, det vil sige enzymet som udløser reaktionen. Det skal være termostabilt, det vil sige at modstå temperatur ekstremer.
- Løsning med visse parametre, der sikrer reaktionens gennemgang.
Reaktionen udføres i flere trin:
Til påvisning af hepatitis B anvendes to typer reaktioner: kvantitativ og kvalitativ.
Kvantitativ PCR
Den kvantitative metode bestemmer mængden af HBV-genomet
Kvantitativ PCR involverer samtidig oprettelse af kopier af DNA-fragmenter og bestemmelse af antallet af molekyler. Måling udføres efter hvert trin, det vil sige i realtid. Dette opnås ved anvendelse af fluorescerende prober, som indgår i en kæde af molekyler og glød i en bestemt periode af undersøgelsen.
Denne metode anvendes til at detektere DNA-fragmenter, der er markører for hepatitisvirus. Ved hjælp af den kvantitative metode er det muligt at præcis isolere genotypen af viruset. Med andre ord beregnes antallet af kopier af HBV-genomet pr. Patientcelleantal.
Kvantitativ analyse giver svar på følgende spørgsmål:
- Med hvilken intensitet udvikler sygdommen sig.
- Hvor effektiv er behandlingen.
- Har stoffet modstand udviklet sig?
Der er også behov for kvantitativ måling til diagnosticering af kronisk infektionsstadium. Hvis mængden af DNA er under 100 stk / ml ved det normale niveau af transaminase, er personen en bærer af viruset.
I den akutte fase er mængden af antistoffer meget højere. I antiviral terapi viser en stigning i antallet af antistoffer udviklingen af lægemiddelresistens, dette er et signal til justering af behandlingen.
PCR af høj kvalitet
PCR af høj kvalitet giver mindre information, men kan eliminere infektion.
PCR af høj kvalitet kan kun fastslå tilstedeværelsen af patogenet i blodet. Hvis de er fraværende, er patienten ikke smittet, hvis patogen kommer ind i blodet, vil resultatet blive positivt.
Imidlertid er det ved hjælp af kvalitativ reaktion umuligt at afklare virusets genom, sygdomsstadiet. Derfor har diagnosen HBV udført både kvantitativ og kvalitativ måling.
Forbereder undersøgelsen
Venøs blod kræves til PCR-analysen. Dette skal ske om morgenen på tom mave.
Patienten skal korrekt forberede sig på undersøgelsen:
- I 10 timer til at nægte mad, kan du kun drikke rent vand.
- På tærsklen for at holde op med alkohol, i 4 timer for ikke at ryge.
- Før undersøgelsen bør undgå fysisk og følelsesmæssig stress.
- Stop med at bruge medicin i 2 dage, hvis dette ikke er muligt, er det nødvendigt at underrette laboratorietekniker. Nogle stoffer har effekt på det endelige resultat.
Fortolkning af data
I en kvantitativ reaktion evalueres de opnåede indikatorer afhængigt af antallet af DNA-kopier.
Det er nemt at fortolke kvalitetsmåling data. Han giver enten et positivt eller negativt svar.
I en kvantitativ reaktion er det muligt at evaluere de opnåede indikatorer afhængigt af antallet af DNA-kopier. Måleenhed er kopier / ml.
Dataene dekodes som følger:
- Hvis mængden af HBV DNA er mindre end 90, så er infektionen fraværende. Patienten udviklede immun immunitet efter vaccination, eller han blev helbredt af sygdommen.
- Når antallet af kopier 2x100 taler om virusbæreren.
- Nummeret 2x106 indikerer et kronisk stadium af sygdommen.
- Med DNA mere end 2x109 har patienten et akut stadium af hepatitis.
Fejlagtige resultater
Fordelene ved diagnosticeringsmetoden under anvendelse af polymerase-reaktioner er som følger:
- Direkte påvisning af patogener. I modsætning hertil tilvejebringer ELISA information om tilstedeværelsen af antistoffer mod viruset.
- Specificitet. Det vil sige, at det er DNA-regionen, der er til stede i den biomaterialeprøve, der kopieres.
- Overfølsomhed. Metoden kan endda detektere enkeltcellefragmenter.
- Diagnose af sygdomme i akutte og latente faser. Det vil sige, det er muligt at diagnosticere sygdommen på scenen af prækliniske manifestationer.
Metoden har fejl, der fører til falske resultater. Den væsentligste ulempe er sandsynligheden for forurening af materialet. Den vigtigste forureningskilde er dårligt forarbejdede reagensglas, laboratoriehænder, reagenser.
En del af DNA'et fra en tidligere reaktion kan komme ind i blodet. Derfor pålægges laboratorierne øgede hygiejniske krav: separate rum, plastrør, ultraviolet behandling af laboratorier mv.
Falske negative resultater kan skyldes nedsat følsomhed af reaktionen. Dette sker i følgende situationer:
- patienten tager medicin, for eksempel antikoagulantia;
- personen havde fysisk stress før analysen (sport, hårdt arbejde);
- infektion har fundet sted for nylig.
Hvis patienten har stor sandsynlighed for infektion, og resultatet af undersøgelsen er negativt, skal han undersøges igen.
Se også:
konklusion
Polymerasekædereaktionsmetoden er den vigtigste og mest informative for diagnosen af HBV. Det gør det ikke kun muligt at fastslå infektionsoperatørstatus, men også for at afklare sygdomsstadiet, evaluere resultaterne af behandlingen.
For en mere præcis diagnose anvendes en kvalitativ og kvantitativ måling. Ulemperne ved fremgangsmåden indbefatter sandsynligheden for forurening, reduceret følsomhed og en temmelig høj pris.
For at resultaterne skal være mest pålidelige, bør man på passende vis forberede sig på undersøgelsen og gennemføre den i klinikken med den relevante licens og et godt omdømme.