Kvalitativ analyse for hepatitis C

8. marts, 2017, 12:29 Ekspertartikler: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547

En kvalitativ analyse af polymerasekædereaktionen - PCR for hepatitis C bestemmer tilstedeværelsen eller fraværet af HCV i kroppen. Under laboratoriebetingelser undersøges strukturen af ​​RNA, som vil omfatte virussen. I tilfælde af detektion af virus C er det nødvendigt at gennemgå et behandlingsforløb, da leverens forsømte tilstand vil medføre alvorlige konsekvenser. PCR af høj kvalitet udføres efter genopretning for at bekræfte fraværet af antistoffer. Udpeget og til rutinemæssig inspektion. Med en lav koncentration af det forårsagende middel i blodet kan PCR (kvalitativ) muligvis ikke registrere noget, fordi diagnostiksystemet har sine egne følsomhedstærskler. I tilfælde af sygdoms første fase eller den milde form udføres PCR ved ultradiagnostik på ekstremt følsomt udstyr.

Hvad er RNA-virus?

Betegnelsen RNA i hepatitis C-viruset (eller hepatitis C-virus-RNA) er selve leversygdommen. Virus C binder sig til den sunde celle i kroppen ved at trænge ind indeni. Over tid, spredt gennem hele kroppen, er det kun nødvendigt at komme ind i blodet. Som et resultat trænger patogenet i leveren, smelter sammen med sine celler og virker hårdt. Leverceller (hepatocytter) arbejder under indflydelse, undergår ændringer, og derved dør de. Jo længere virus C er i leveren, desto større dør antallet af celler. Over tid udvikler farlige sygdomme, hvilket fører til malign degeneration og død.

Infektion af leveren med denne type virus kan ikke manifestere sig eksternt. I mange år eller årtier føles en inficeret person helt sund, og kun en tilfældig undersøgelse afslører oftest patologi. Ved donering af blod til hepatitis undersøges en del af RNA-kæden (ribonukleinsyre), som er en del af det humane gen (DNA). Resultaterne af laboratorieprøver bør ikke anvendes til selvbehandling, da dette kun er en indikator. Det præcise billede og yderligere diagnose er bedre bestemt af lægen.

Når det er færdigt: indikationer for forskning

Ved bekræftelse af HCV udføres PCR-analyse (polymerasekædereaktion). PCR-undersøgelser hjælper med at finde årsagsmidlet i RNA-strukturen og ordinere en effektiv terapi. Udpeget i følgende tilfælde:

• påvisning af tegn på betændelse i leveren
• screening undersøgelser for forebyggelse;
• undersøgelse af personer i kontakt
• diagnose af hepatitis af blandet oprindelse (bestemmelse af hovedpatogenet);
• bestemmelse af reproduktionsaktiviteten af ​​viruset i kronisk form
• levercirrhose
• at bestemme effektiviteten af ​​den foreskrevne behandling.

Forskning PCR ordinerer en læge til at bestemme effektiviteten af ​​behandlingsforløbet af hepatitis.

Der er en kvalitativ såvel som kvantitativ analyse af PCR. Kvantitativ PCR viser procentdelen af ​​RNA med virusbærere i blodet, og kvalitativ indikerer viral tilstedeværelse eller fravær. En positiv indikator for kvalitet (tilstedeværelse af Hepatitis C RNA) har også behov for kvantitativ forskning. Et højt niveau af koncentration af det forårsagende middel til hepatitis C er forbundet med risikoen for dets overførsel, det vil sige infektion af andre. Lavt tal er bedre behandles. Mængden af ​​RNA-vira i blodet er ikke relateret til intensiteten af ​​sygdommen. PCR-analyse gøres også i tilfælde af interferonbehandling for at ordinere behandlingens varighed og kompleksitet.

Funktioner af højkvalitets PCR analyse for hepatitis C

En kvalitativ analyse er tildelt en polymerasekædereaktionsindikator for alle patienter, der har antistoffer mod hepatitis C i deres blod. De, der har været syge og genvundet, skal genoptage testen. Det anbefales at tage en analyse for hepatitis B, så i tilfælde af en positiv konklusion og for hepatitis D. Også kvalitativt analyseret reaktion skal udføres i forbindelse med andre blodprøver. Analyser viser et komplet billede af viral spread.

Fra testresultaterne vil kun en positiv test for hepatitis C være synlig eller negativ, dvs. tilstedeværelsen eller fraværet af en virus. Hvis udgangen er "detekteret", er viruset og fortsætter med at være aktivt. Betegnelsen "ikke detekteret" angiver fraværet af en virus eller dens lille mængde. Med denne indikator skal man huske på, at diagnostiske systemers analytiske følsomhed er forskellig, og at RNA hepatitis C stadig kan være i blodet, men ikke manifesteret i analysen.

En særlig følsom PCR-metode afslører ultra hepatitis C selv i små mængder. En fluorescenshybridiseringsundersøgelse anvendes, hvilket er mange gange højere end standard PCR-systemer. Metoden anvendes i flere tilfælde:

• mistænkte skjulte former for hepatitis C;
• PCR-diagnostik bekræftede ikke patogenet, men der er antistoffer;
• i tilfælde af nyttiggørelse
• at opdage tidlig infektion.

Tilbage til indholdsfortegnelsen

Dekodningsanalyse

PCR-dekodningen af ​​HCV påvirker den endelige beslutning, når der laves en diagnose, især med ultrametoden. Den største ulempe ved denne undersøgelse er streng overholdelse af sterile betingelser for prøven og materialerne. En lille afvigelse viser nogle gange unøjagtige analytiske konklusioner, komplicerer diagnoser og efterfølgende behandling. Analyse af PCR til bestemmelse af hepatitis RNA viser ikke altid selvtillid et billede af sygdommen, undertiden er unøjagtigheder tilladt og i begge retninger.

Diagnosticering af hepatitisvirus, det anbefales at anvende en omfattende undersøgelse.

Norm for indikatorer

Fraværet af JgM antistoffer mod viral hepatitis C i resultaterne af undersøgelsen betragtes som normen i analysen af ​​polymerasekædereaktionen. Samtidig viser resultaterne af serologisk analyse tilstedeværelsen af ​​antistoffer mod virus C, og dette ligger også inden for det normale område. En kvalitativ definition viser ikke intensiteten af ​​sygdommen, den afslører kun årsagsforbindelsen for hepatitis C i RNA. Denne analyse gentages efter behandling for at bekræfte den faktiske genopretning.

afvigelser

Hvis JgM antistoffer mod HCV RNA er til stede, indikerer dette en udviklingsinfektion. Sygdommen på samme tid fortsætter akut eller kronisk, manifesteret i forskellige stadier. Hvis der registreres et fald i antallet af antistoffer, vil analysen indikere, at resultaterne af behandlingen blev opnået under genopretning. Der er yderst sjældne tilfælde af falske positive resultater i diagnostik. De findes hos kvinder under graviditet og hos mennesker med andre smitsomme sygdomme.

Kvalitativ analyse af PCR for hepatitis C

Hepatitis er en alvorlig sygdom, der har mange årsager. Grundlaget for dets udvikling er den direkte eller indirekte skade på leveren. I betragtning af dets betydning for hele organismen kan man kun gætte hvor svært patologien er. I denne artikel vil vi nærmere undersøge funktionerne i kurset og laboratoriediagnosen af ​​hepatitis C.

Årsagen til sygdommen er et viralt middel, der refererer til RNA-indeholdende patogener. Det har en karakteristisk egenskab - evnen til at mutere, det vil sige at ændre sin struktur. På grund af dette undgår infektionen immunsystemets angreb og fører i de fleste tilfælde til kronisk betændelse i leveren.

I betragtning af forekomsten af ​​forskellige undertyper af viruset bør valget af lægemidler være baseret på genotypebestemmelserne. På trods af en lang undersøgelse af sygdommen og funktionerne i HCV-strukturen har det endnu ikke været muligt at udvikle en specifik vaccine til sygdommen.

Vanskelighederne ved tidlig diagnose ligger i det asymptomatiske forløb af hepatitis, som følge af, at en person besøger en læge ved cirrhosefasen. For at opdage en sygdom i tide er det nødvendigt med regelmæssige lægeundersøgelser. Kun ved laboratorietest af blod er det muligt at opdage HCV og forhindre infektion hos dem omkring dig. Faktum er, at infektionsbæreren i lang tid ikke kan gætte om patologien og fortsætte med at overføre viruset til raske mennesker.

Fremgangsmåder for transmission

I de fleste tilfælde spredes virussen gennem blodet, da det indeholder den højeste koncentration af patogene stoffer. Således overføres infektionen:

• med hæmodialyse
• med en inficeret nål;
• i kampens kamp, ​​når huden er skadet, og der opstår blodkontakt
• med blodtransfusion (blodtransfusion).

Sandsynligheden for infektion under intimitet er ubetydelig, da sæd og vaginal udledning indeholder en lille mængde patogener. Risikoen for infektion øges væsentligt i strid med integriteten af ​​slimhinden i kønsorganerne. Dette observeres med aggressiv og anal sex.

Hvad angår den vertikale overførselsmetode, udføres den i arbejdsproces. I fostrets svangerskabsperiode kan patogenet ikke trænge igennem placenta til embryoet. Ved naturlig fødsel overføres det patogene middel til barnet ved at traumatisere sin hud, når kontakt med moderens blod observeres.

Efter patogenens indtrængning i en sund organisme begynder syntesen af ​​antistoffer, som er beskyttelse mod infektion og tilhører immunstrukturer. De findes i den indledende undersøgelse af en person, der anvender ELISA.

For at bekræfte diagnosen udsættes patienten for en polymerasekædereaktion. Det er en analyse af det genetiske materiale af et patogent middel og bestemmelsen af ​​viral belastning.

Laboratoriediagnose af hepatitis C

Laboratoriediagnose begynder med et enzymimmunoassay. Hovedopgaven er at opdage antistoffer produceret mod patogenet. Dens effektivitet er næsten 95%. Takket være denne undersøgelse er det muligt at identificere virusbæreren i det prækliniske stadium og sende det til yderligere undersøgelse.

En kvalitativ analyse af ELISA indikerer tilstedeværelsen eller fraværet af immunglobuliner i patientens blod. Dens resultat kan være "positivt" eller "negativt." Efter at have modtaget det første svar, sendes personen til næste undersøgelse - PCR. Prisen afhænger af kvaliteten af ​​reagenserne og laboratoriet. Omkostningerne ved polymerasekædereaktionen kan nå 4 tusind rubler.

PCR-funktioner

Ved hjælp af en polymerasekædereaktion tillader os selv en lille mængde biologisk materiale os at estimere virusbelastningen i blodet, det vil sige at beregne koncentrationen af ​​patogener i en milliliter væske.

Med fremkomsten af ​​PCR er diagnosen hepatitis blevet meget lettere. Analysen gør det muligt at identificere HCV RNA, for at etablere stadiet af den infektiøse proces og infektiøsiteten af ​​virusbæreren.

Der er flere typer genetisk diagnose:

1. Kvalitativ analyse af PCR for hepatitis C - bekræfter tilstedeværelsen eller fraværet af HCV i patientens blod:
2. kvantitativ, hvorigennem du kan beregne koncentrationen af ​​vira og etablere sygdomsstadiet. Resultatet er angivet i IE / ml eller kopier / ml (afhængigt af laboratoriet);
3. genotyping - nødvendigt for at bestemme HCV's genotype. Dette er nødvendigt for nøjagtigt udvalg af lægemidler, der vil være mest effektive i dette tilfælde. Analyse indikerer indirekte sværhedsgraden af ​​den patologiske proces i leveren. I patogenens tredje genotype er der således ofte observeret steatose, hvis basis er akkumulering af fedt i hepatocytter (dets celler). Hertil kommer, at typen af ​​virus påvirker udfaldet og varigheden af ​​det terapeutiske kursus.

Kvalitativ analyse af PCR for hepatitis C

Først og fremmest undersøges biologisk materiale i laboratoriet for tilstedeværelse af HCV RNA. Det er vigtigt at huske, at en kvalitativ analyse af hepatitis C har en vis grad af følsomhed og derfor ikke altid giver det rigtige svar. I dette tilfælde anbefales det at gennemføre laboratoriediagnostik ved hjælp af andre reagenser.

For at opnå pålidelige resultater skal testsystemer med en følsomhed på mindst 50 IE / ml anvendes.

Det diagnostiske resultat kan enten være "positivt" eller "negativt". Hvis patogenet ikke findes i blodet, er undersøgelsen afsluttet. Hvis et patogent middel påvises i prøven, kvantificeres en viral belastning.

Et falsk-negativt svar opnås, når processen brydes, for eksempel er aktive komponenter, der undertrykker opbygningen af ​​kopier af patogenet, kommet ind i mediet. Det er således ikke muligt at vise et ægte blodbillede, hvorfor en persons infektion ikke diagnosticeres.

Et falsk positivt resultat kan opnås, hvis røret til indsamling af biologisk materiale samt miljøet for undersøgelsen blev forurenet. Derudover er et sådant analysereaktion muligt, når blandede infektioner, når leveren påvirkes af flere vira, for eksempel hepatitis C og D.

Indikationer for kvalitativ forskning

Lægen kan ordinere en patient en kvalitativ undersøgelse af identifikationen af ​​RNA i hepatitis C-viruset:

• ved modtagelse af et positivt eller tvivlsomt enzymimmunoassay svar;
• til verifikation af diagnosen
• bestemme viral belastning;
• indstilling af sygdomsfasen
• diagnose af blandet infektion. Hepatitis C inficerer ofte leveren samtidig med "D" -virussen;
• bestemmelse af terapeutisk taktik under hensyntagen til kausionsmiddelets genotype
• vurdere dynamikken i ændringer under behandling med antivirale lægemidler.

Fordelene ved polymerasekædereaktionen indbefatter:

1. høj følsomhed af teknikken, hvilket gør det muligt at fastslå infektionsfaktoren i det prækliniske stadium
2. identifikation af patogenets genetiske materiale og ikke dets antistoffer;
3. muligheden for at etablere en subtype af et patogent middel;
4. høj diagnostisk hastighed, da der ikke kræves såning af materialet på næringsmediet, og det er tilstrækkeligt at anvende specifikke testsystemer. En person får resultatet efter 5 timer;
5. alsidighed. Analysen tillader at identificere ethvert genetisk materiale (RNA, DNA). Takket være dette kan lægen bekræfte hepatitis C og andre typer af sygdommen (B);
6. evnen til at opdage latent infektion.

Kvantitativ forskning

I undersøgelsen af ​​blod ved anvendelse af polymerasekæden kan reaktionen beregne antallet af patogener i et fast volumen biologisk materiale. Indikatoren er præsenteret i IE / ml. Gennem analyse er det muligt at bestemme graden af ​​smitte af patienten, bestemme stadiet af den infektiøse proces og også vurdere effektiviteten af ​​lægemiddelterapi.

På baggrund af PCR bestemmer specialisten hvilke doser af lægemidler der kan blokere reproduktionen af ​​patogener. Desuden bestemmes varigheden af ​​antiviral behandling og prognose for livet. Det er vigtigt at huske, at testsystemerne har høj følsomhed, derfor gør metoden det muligt at bekræfte infektion hos en person i det prækliniske stadium.

genotypebestemmelse

I betragtning af patogenens evne til at mutere er dens genotype nødvendig for at bestemme behandlingens taktik og valget af antivirale lægemidler. For eksempel varer behandling af HCV 1 i 48 uger, med en positiv udvikling, der kun observeres i 60% af tilfældene. Genotyper 2 og 3 har en mere gunstig prognose. Antivirale lægemidler er ordineret i 8 måneder, og deres effektivitet når 85%.

Ifølge statistikker er HCV 1, 2 og 3 i de fleste tilfælde registreret i Den Russiske Føderation.

Ved afkodning af en laboratorietest kan dette svar angives - "ikke skrevet". Dette betyder, at en virus cirkulerer i patientens kredsløb og ikke kan genkendes af testsystemet. Resultatet af analysen i dette tilfælde indikerer, at patogenet ikke er typisk for et givet geografisk område.

Hvordan får man pålidelige resultater?

For at en kvalitativ undersøgelse af PCR til påvisning af RNA af det forårsagende middel af hepatitis C viste de korrekte resultater, er det nødvendigt at overholde kravene til forberedelse til laboratoriediagnostik:

1. blodprøveudtagning udføres på tom mave, og det "sultne" mellemrum må ikke være kortere end 8 timer;
2. to dage før undersøgelsen anbefales det at holde op med at drikke alkoholholdige drikkevarer og forlade krydrede, fede og røgede retter;
3. Afbryd indførelsen af ​​stoffer, der reducerer blodkoagulation, for eksempel heparin. Hvis disse lægemidler ordineres af sundhedsmæssige grunde, skal du underrette lægen. Desuden skal specialist være opmærksom på optagelse af andre lægemidler, der kan påvirke resultatet af laboratorieforskning;
4. På tærsklen til indsamlingen af ​​biologisk materiale bør fysioterapeutiske procedurer ikke udføres og bør udsættes for alvorlig fysisk anstrengelse.

Resultaterne af analysen kan ikke kun påvirkes af den person, der donerer blod, men også af andre faktorer, nemlig:

• dårlig kvalitet blodprøveudtagning;
• manglende overholdelse af anbefalinger om transport af biologisk materiale
• utilstrækkelig uddannelse af laboratoriearbejdere
• manglende overholdelse af forskningsteknikken
• indføring af antikoagulantia (heparin) på tærsklen til blodprøveudtagning. Denne gruppe af stoffer reducerer koagulering og derved nedsætter reagensarbejdet.

I forskellige laboratorier kan det diagnostiske respons afvige lidt, men disse fejl påvirker ikke det endelige resultat af undersøgelsen.

Der lægges særlig vægt på de typer testsystemer, der anvendes i laboratoriet. Ofte gives fortrinsvis reagenser med høj følsomhed. Dette er vigtigt for patienter med lav viral belastning, fordi det er svært at opdage.

Hvor ofte udføres en laboratorietest?

Primær polymerasekædereaktion udføres hos mennesker, som er blevet detekteret ved immunoassay for antistoffer mod patogenet af hepatitis. I dette tilfælde er det tildelt til bekræftelse af infektionen hos en person og etableringen af ​​sygdomsfasen. Desuden tillader analysen at bestemme virusets undertype, hvilket er særlig vigtigt for valget af lægemidler.

Den næste periode for obligatorisk laboratorietest er 3 måneder fra starten af ​​antiviral terapi. Diagnostik gør det muligt at vurdere effektiviteten af ​​lægemidler, justere dosen eller udskifte dem.

Ud over basale tests kan PCR desuden udføres på 4 og 24 uger fra starten af ​​behandlingen. En positiv prognose af sygdommen bekræftes af et fald i viral belastning efter tre måneders behandling. For eksempel bør den falde fra 1 million IE / ml til flere hundrede tusind.

Hvis koncentrationen af ​​patogene stoffer i blodet forbliver på samme niveau eller stiger lidt, indikerer dette ineffektiviteten af ​​antivirale midler og kræver udskiftning. Ved anvendelse af PCR ved afslutningen af ​​behandlingen er det muligt at bekræfte patientens opsving.

For at korrekt fortolke resultaterne af laboratoriediagnostik er det nødvendigt at konsultere en hepatolog eller infektionssygdomsspecialist. På grund af den høje frekvens af falske responser i ELISA anvendes analysen udelukkende til den primære screening. Til en mere grundig undersøgelse af den anvendte polymerasekædereaktion.

PCR-analyse for hepatitis C

Hepatitis C går fra akut til kronisk i 80% af tilfældene. Replikation af patogene vira i funktionelle leverceller fører til organ dysfunktion. Dette skyldes det faktum, at parenkymalt væv er erstattet af bindemiddel. Som følge heraf suppleres patientens historie med blødning i mave-tarmkanalen, forgiftning af kroppen, problemer med blodkoagulation. Derfor diagnosticeres de tidligere patologiske ændringer, jo større er patientens chancer for genopretning. PCR-analyse for hepatitis C betragtes som den mest nøjagtige forskningsmetode.

Denne diagnostiske metode må udføres flere dage efter infektion. Polymerasekædereaktion kan pålideligt bestemme genotypen og koncentrationen af ​​viruset i blodet. For at udføre analysen tages patienten biologisk materiale, hvori det forårsagende middel RNA kan være til stede.

PCR for hepatitis C udføres i tre faser:

• Kvalitativ analyse - ved at bruge den til at bestemme patogenets genetiske materiale.
• Kvantitativ forskning - således afsløre viral belastning.
• Genotyping - på dette stadium vil lægen genkende typen af ​​sygdom.

Teknikken blev udviklet for omkring 30 år siden. Det bruges til at diagnosticere mange smitsomme sygdomme. PCR giver dig mulighed for at registrere unikt genetisk materiale. For at gøre dette skal du bruge primere. Såkaldte korte tråde af RNA, som er knyttet til begyndelsen af ​​genet.

Som et resultat multipliceres antallet af patogenvirusfragmenter. Hver fase kræver et særligt temperaturregime og en vis tidsperiode. Et DNA-molekyle dannes inden for 3 minutter. Amplifikation indbefatter ca. 30 cyklusser. PCR udføres i laboratoriet gennem specialudstyr.

Indikationer for udnævnelse

PCR-analysen kan skyldes tilstedeværelsen af ​​kliniske symptomer på hepatitis C. Proceduren er indiceret for personer, der:

• kontaktet en smittet person
• lider af akut og kronisk leversygdom
• behandles for patologiske ændringer i parenkymvæv;
• er i fare
• er donorer af blod og dets komponenter.

PCR udføres ikke kun med hepatitis C. Analysen anvendes i medicin, biologi, retsmedicin. Bestemmelse af specifikke indikatorer - det stadium, der er nødvendigt for udvælgelsen af ​​lægemiddelordninger.

Fordele ved analysen

I diagnostikundersøgelsen indbefatter immunofluorescensanalyse og PCR. Ved hjælp af den første kan du bestemme koncentrationen af ​​immunglobuliner. Disse stoffer fremstilles af en beskyttelsesmekanisme efter indtræden af ​​patogene virus i kroppen. I modsætning til PCR er ELISA ikke effektiv i inkubationsperioden. Ved hjælp af polymerasekædereaktion kan hepatitis C detekteres i de første 7 dage efter infektion.

Denne kliniske undersøgelse har følgende egenskaber:

• Den mindste sandsynlighed for et falsk resultat.
• Høj effektivitet.
• Specificitet.
• Følsomhed.
• Alsidighed.
• Automatiser processen.
• Sikkerhed.
• Hastigheden for at opnå indikatorer.

Den eneste ulempe ved PCR er dens tekniske kompleksitet. Dette skyldes det faktum, at lægen skal vælge den rigtige sammensætning af nukleotider, hvis funktioner er DNA-syntese. På grund af den øgede følsomhed af metoden er det muligt at opnå falsk-positive eller falsk-negative resultater.

For at opnå nøjagtigheden af ​​signifikante indikatorer rengøres det biologiske materiale grundigt af stoffer og proteinforbindelser. For at bekræfte resultatet er det nødvendigt at sammenligne tidligere testede prøver. De faktorer, der fremkalder en fejl, omfatter:

Overtrædelse af prøvetagningsteknisk analyse

• Overtrædelse af analysemetoden.
• Ændringer i sekvensen af ​​RNA-fragmenter.
• Tilfældigheden af ​​de syntetiserede nukleotider og gener af patogene vira.

Sandsynligheden for at opnå et falskt resultat i hepatitis C er til stede på grund af umuligheden af ​​at bestemme sygdommens genetiske grundlag. PCR-diagnostik kan direkte identificere patogenet. Ved anvendelse af DNA-amplifikation detekteres patogener i fødevarer, vand og jord.

Begrænsningerne af denne metode mindsker ikke dens effektivitet og popularitet. Klinisk forskning udføres regelmæssigt. Dermed kan lægen vurdere effektiviteten af ​​de behandlede foranstaltninger. Behovet for dette skyldes, at hepatitis C-viruset er i stand til at mutere. Fraværet af en positiv effekt betyder tilpasningen af ​​viruset til de anvendte lægemidler.

Forberedelse til levering

For at udføre en polymerasekædereaktion hos en patient, der lider af hepatitis C, tages venøst ​​blod. Normalt kræves to portioner biologisk materiale til undersøgelse. Gennem en udføres PCR direkte, og den anden sendes til immunoassay.

Blod til PCR-analyse taget fra venen

Forberedelse er vigtig. Patienten donerer blod til PCR om morgenen på tom mave. Få dage før proceduren bliver nødt til at opgive skadelig mad, alkohol, nikotin og medicin. Patienten bør undgå seksuel kontakt, overdreven fysisk og følelsesmæssig stress. Swimmingpool og fitness er forbudt. Det vil være nødvendigt at forberede under alle omstændigheder.

Der er specifikke indikationer vedrørende medicinske lægemidler. Dette gælder for antibiotika og antidepressiva. Kvinder, der har startet menstruation, bør forsinke afprøvning af hepatitis C. Kolposkopi er også en grund til at nægte proceduren.

De nævnte regler er ret enkle. Takket være dem kan du opnå maksimal pålidelighed af denne diagnostiske metode. Dekrypter resultaterne skal være specialist. Uafhængigt fortolke dem i en patient er usandsynligt at lykkes.

Analyseprocessen

PCR diagnostik er som følger:

Blodet er placeret i en termostat.

• Først skal du tage det biologiske materiale. Blodet placeres i steriliserede enheder. Det krævede volumen overstiger ikke 1-1,5 ml. Hold blodet og dets komponenter skal ikke være længere end 24 timer. Opbevaringstemperaturen må ikke overstige 4 grader Celsius.
• Efter start af en klinisk undersøgelse. Det fremstillede blod placeres i en termostat sammen med amplifikationsblandingen. Normalt kræver det ikke mere end 25 ml af en speciel sammensætning. Amplifikation udføres automatisk i flere timer.
• Parallelt skal du foretage kontroltest. For at gøre dette skal du bruge biologiske materialer taget fra en sund person. Dette vil hjælpe med at undgå falske resultater.
• Afkodning og registrering af indikatorer. Genetisk materiale påvises ved anvendelse af ethidiumbromid. På grund af den specifikke virkning fremhæves DNA-fragmenter. Tilstedeværelsen (fravær) af viruset afsløres ved at fokusere på disse tabeller.

Afkodningsresultater

Kun en smitsomme sygeplejerske og en hepatolog kan bestemme værdien af ​​disse indikatorer. PCR-analyse indgives diagnostisk kompleks sammen med biokemiske blodprøver, ultralyd, ELISA og biopsi. Diagnosen er lavet på baggrund af alle resultater. Proceduren for afkodning af test afhænger af scenen af ​​den diagnostiske undersøgelse.

I det første trin af PCR er et positivt testresultat detektion af patogene virus-DNA-fragmenter. Ved udførelse af kvantitativ analyse bestemmer niveauet for viral belastning. Den kan være lav (mindre end 8 * 10 ^ 5 IE / ml), medium (fra 8 * 10 ^ 5 IE / ml), høj (mere end 2,4 * 10 ^ 7 IE / ml). Fraværet af specifikke antistoffer og partikler af viralt RNA betragtes som normen (negativt resultat). På genotypestadiet indikeres infektion med en infektion af RNA af en bestemt genotype.

Efter modtagelse af et positivt resultat foreskrives patienten et effektivt terapeutisk regime. Samtidig skal der tages hensyn til information om tilstedeværelsen af ​​viruset i blodet, aktivitetsgraden og genotypen. Prisen for proceduren afhænger af testmetoden, typen af ​​biologisk materiale. Omkostninger til at tage blod eller andre væsker kan lægges til de samlede omkostninger. Sidstnævnte skyldes det faktum, at patogenet ofte findes i urin, afføring og sæd.

Funktioner af tests for hepatitis C og de mest nøjagtige metoder

Hepatitis C er et af de mest skæmmende vira, da det måske ikke giver symptomer i årevis, og mange mennesker er ikke engang klar over forekomsten af ​​denne sygdom. Hepatitis C-virus diagnosticeres ofte under en generel undersøgelse, eller endda når det gav komplikationer i form af levercirrhose eller andre alvorlige komplikationer.

Advarsel! Hepatitis C er en af ​​de mest almindelige former. Oftere er kun hepatitis B diagnosticeret.

Det er længe blevet betragtet som ikke helt korrekt at sige, at hepatitis C er uhelbredelig, og nu er der mange ret effektive lægemidler og terapimetoder. Men ifølge de mest beskedne prognoser fra WHO i de næste to årtier kan hepatitis C blive en reel epidemi i de fleste lande.

Tid til at identificere infektionen og starte behandlingen vil hjælpe analysen, som kan gøres i enhver større by i vores land.

Hvornår og hvem skal testes for hepatitis C

Hepatitis test (alle former) anbefales for hver person hvert par år som en forebyggende foranstaltning.

Hvad er træk ved hepatitis C? Hvem anbefales til testning? Som du ved, sendes denne formular udelukkende gennem blodet, og det er umuligt at opfange infektionen, f.eks. Ved luftbårne dråber.

Men man bør ikke tro at hepatitis C kun er en masse stofmisbrugere. At være i fare kan være let, for eksempel at beslutte at få en piercing eller tatovering.

Tidligere har der været et stort antal tilfælde af infektion under transfusion af donorblod, men nu kontrolleres det hele, og test for hepatitis C foretages før transfusionsproceduren.

Testning af hepatitis C anbefales:

• før den kommende graviditet
• ændring af seksuelle partnere
• modtagelse af injektioner eller udskæringer med tvivlsomme objekter
• diagnosticere kroniske sygdomme
• med det forebyggende formål.

Nødvendigt, analysen af ​​hepatitis er manifestationen af ​​symptomer som:

• udseendet af gulsot hud og øjne;
• følelse af ubehag, tyngde, smerte under ribbenene på højre side af kroppen;
• negativ reaktion af kroppen til krydrede og fede fødevarer;
• misfarvning af urin til brun;
• blegning af afføring.

Testning af hepatitis er nødvendig for alle, der har brug for en lægebog, og dette er en enorm liste over erhverv. Desuden er de også obligatoriske for visse sociale lag, for eksempel registrerede stofbrugere eller i en hud- og veneral sygdomsklinik.

Blodprøve

Hvilke funktioner har en blodprøve for hepatitis C? Denne gruppe omfatter seks typer af virus. Derfor kræver en omfattende analyse for at gennemføre en komplet analyse.

Identificere antistoffer mod viruset, hvilket vil indikere infektion er muligt i de første 14 dage fra infektionsdagen. En sådan analyse giver imidlertid kun et kumulativt svar, og det er umuligt at lave en endelig diagnose, da dette kan være både begyndelsen af ​​den akutte form og tilstanden efter infektionen.

Hvilke tests har du for mistanke om hepatitis C

Testresultatet kan enten være positivt eller negativt. I andet tilfælde er der i løbet af laboratorieundersøgelser af blodserum ingen antistoffer mod viruset. Hvis resultatet er positivt, opdages sådanne antistoffer, hvilket indikerer:

• infektioner i den akutte periode
• kronisk vask;
• tidligere overført hepatitis C.

Derfor foretages en yderligere bekræftende test for at gøre den endelige diagnose, og arten af ​​de detekterede antistoffer bestemmes. En fuldstændig liste over tests er indstillet for hver patient individuelt.

PCR-metode til kvalitativ diagnostik

PCR står for polymerasekædereaktion og er i dag en af ​​de bedste metoder til detektering af hepatitis C, både kvalitativt og kvantitativt.

Hovedforskellen i PCR-metoden fra serologisk analyse er, at den ikke kun detekterer tilstedeværelsen af ​​antistoffer, men detekterer også RNA (ribonukleinsyre) af hepatitis C-viruset.

Som det er velkendt, er antistoffer mod hepatitis til stede ikke kun hos patienter med kronisk eller akut form, men også hos mennesker, som allerede har haft en infektion og genoprettet. Der er også tilfælde, hvor antistoffer kun påvises flere måneder efter infektion. Derfor siger PCR-diagnostik, at det er den mest informative. Det kan trods alt bruges til at producere en kvalitativ analyse baseret på hvilke konklusioner der kan drages om, hvordan viruset multiplicerer i kroppen og hvor effektivt den antivirale behandling udføres.

Hvad angår den analytiske følsomhed af denne metode, ligger den i området fra 50 til 100 virale partikler pr. 5 μl.

Hepatitis C kan detekteres ved PCR i de første dage og uger efter infektion, når serologiske markører stadig er helt fraværende. Samtidig kan sandsynligheden for et falsk-positivt testresultat ikke udelukkes. Andre undersøgelser er nødvendige for en endelig diagnose.

Advarsel! Der er specielle WHO anbefalinger, ifølge hvilke en diagnose af hepatitis C bør foretages ikke tidligere end efter 3 gange detektion af virus RNA.

PCR bruges også til:

• installation af pålideligheden af ​​serologiske undersøgelser, hvis der er grund til tvivl om deres resultater
• indstilling af den nøjagtige form for hepatitis
• identifikation af en flok af en sygdom eller en infektion, der allerede er overført
• overvågning af effektiviteten af ​​behandlingen.

PCR-metode til kvantitativ diagnose

Kvantitativ diagnose er fundamentalt forskellig fra den kvalitative og tjener til at bestemme intensiteten med hvilken hepatitis C udvikler sig i patientens krop. Det gør det også muligt at bedømme, hvor effektiv den valgte terapi er og for at finde ud af, at resistens over for et bestemt lægemiddel er begyndt at udvikle sig hos en patient.

Jo lavere niveauet af viremia identificeres, jo mere gunstige prognosen.

Derudover giver denne metode dig mulighed for præcist at bestemme subtype af hepatitis C, afhængigt af hvilke der kan være forskellige komplikationer, og der kan være forskelle i behandlingen.

Den farligste er undertype 1b, hvor den kroniske form udvikler sig i 90% af tilfældene, på trods af at subtyperne 2a og 3a flyder ind i kronisk form i ikke over 33-50% af de diagnosticerede tilfælde.

ELISA-metode

Forkortelsen ELISA står for enzymimmunoassay. Baseret på denne analyse er påvisningen af ​​hepatitis C-virus baseret på detektion af serologiske markører. Derfor er ELISA-anmeldelserne ikke så entydige, da det kan bestemme tilstedeværelsen af ​​antistoffer, men vil ikke give entydige oplysninger om patogenet.

Efter analysering af blodserum ved hjælp af ELISA, vil det være nødvendigt at udføre bekræftende tests og bestemme den specifikke type hepatitis, om infektionen er i akut form eller allerede er blevet overført tidligere mv.

Fordelen ved metoden er den meget høje nøjagtighed af antistofdetektering, og i dag fremstiller den medicinske industri mange testsystemer af denne art, så ELISA-tests er i modsætning til andre typer tilgængelige for alle. Du kan tage en sådan analyse i næsten enhver klinik eller et medicinsk center, og prisen er ekstremt lav.

PCR kvantitativt for hepatitis C

Hepatitis C-viruset kan formere sig i blodlegemer og forårsage lymfoproliferative sygdomme. På grund af flere mutationer svækker kroppens immunforsvar, genotyper og subtyper af viruset. Med den korrekte og rettidige bestemmelse af en bestemt type afhænger effektiviteten af ​​antiviral terapi. Faren for infektion er, at sygdommen er asymptomatisk. Kun 15 procent af 100 kan opleve kvalme og opkastning, vægttab og feber.

Hepatitis C virus detektion

Standardhastigheden for hepatitis C er i størrelser fra 40 til 60 nm, med de fleste lipider, leverskader som følge af et akut eller kronisk forløb af sygdommen. Hepatitis C, nemlig RNA-viruset fra Togaviridae-familien, er ekstremt resistent, overføres ved blodtransfusion eller brugen af ​​ikke-sterile genstande, utilstrækkelige hygiejneforsyninger mv. Kvantitativ analyse giver dig mulighed for at undersøge blodet og identificere den genetiske struktur af det inficerede virus.

Til hepatitis C og dens genotyper blev bestemt, foretage en kvantitativ analyse. Afhængigt af analysatoren kan bestemme de tre niveauer af forekomsten af ​​RNA-virus.

Undertyper kan producere forskellige modifikationer, så analysatorens specificitet og følsomhed skal være hundrede procent. Udover at detektere sygdommen hos en patient er det nødvendigt at bestemme graden af ​​dens sværhedsgrad. Nogle laboratorier har ikke alle data om RNA-virus dekodning, der er mulighed for falsk positivt svar.

Forskning på hepatitis C vil være mere præcis, når man studerer disse indikatorer:

AlAT, AsAT; Alkalisk skjold; LDH.

Ved at henlede opmærksomheden på resultaterne af disse indikatorer og kroppens generelle tilstand vises et resultat, der viser graden af ​​infektion, formen og antallet af hepatitis C-celler i blodet. Dette bidrager til helingsprocessen og effektiviteten af ​​antiviral terapi.

Typer af analyse for hepatitis C

En multidimensionel kædereaktion (PCR) giver en ide om antallet af DNA-partikler i patientanalyser taget under korrekt identifikation af det infektiøse middel.

Årsagsmidler til smitsomme sygdomme kan forekomme. En infektion i leveren, som hepatitis C, kan behandles i vores tid, når den påvises rettidigt. Hvis en virus er mistænkt, udføres PCR-analyse.

Da lang tid symptomerne på viruset kan maskeres, kan en person ikke mærke sygdommens begyndelse. Men med en grundig undersøgelse i 60-70% af tilfældene opdages hepatitis C, den første analyse, som er ELISA, følger PCR diagnosen. Analysen udføres i visse perioder for at bestemme sygdomsstadiet og foreskrive den passende behandling. At undvære det, uden at anvende alle disse procedurer, er det muligt at blive vaccineret mod hepatitis.

Analysen, herunder PCR-diagnostik, giver et billede af sygdommen, hvor aktiv virussen er i forskellige udviklingsperioder.

For det første er der en kvalitativ analyse, der kun bekræfter hypotesen om infektionen, og derefter en kvantitativ bestemmelse af belastningen på leveren. Den ideelle løsning ville være et negativt resultat for hepatitis C i patientens genetiske materiale.

Kvalitativ og kvantitativ analyse

Der er kvalitativ og kvantitativ analyse. Essensen af ​​den første er, at den bestemmer forekomsten af ​​infektion i blodet. Og det betyder, at virussen inficerer sunde leverceller. Når der findes antistoffer mod hepatitis C hos en patient, udføres en kvalitativ test straks. Den hastighed, som resultatet skal give, er "ikke detekteret i blodet". Ved bestemmelse af koncentrationen af ​​en virus er der behov for at kende følsomheden af ​​diagnosesystemet, da folk, der undergår antiviral terapi, kan foretage analysen. Analysatorens følsomhed bør ikke være mindre end 50 IE / ml.

Når der opdages en virus, foretages en kvantitativ analyse, det vil sige den virale belastning, som bestemmer virusets koncentration i blodet og sygdommens sværhedsgrad.

Viral RNA, som er i en vis mængde blod, defineres som normen i en hastighed på 1 ml pr. 1 cm kubisk. Efter kvantificering af viral belastning er det muligt at bedømme infektionsgraden i det stadig uinficerede miljø. Så snart koncentrationen af ​​hepatitis C stiger i blodet, er det nødvendigt at isolere fra miljøet.

Det er vigtigt i de tidlige stadier at opdage graden af ​​koncentration af hepatitis for at bestemme tempoet i rehabilitering. Hvis hyppigheden af ​​hepatitis C overskrides med mere end 800.000 IE / ml, anses den for høj med en stigning på op til en million kritisk. Hvis det kvantitative interval er mindre end 400 tusind IE / ml, anses det, at infektion af de omkringliggende vil være mindre sandsynligt. Denne figur gør det klart, at hepatitis C er til stede i kroppen i meget små doser. Analysen kunne ikke bestemme den kvantitative værdi af virusets RNA-partikler, så den blev genudnævnt flere gange for nøjagtigheden af ​​diagnosen.

Resultater af kvantitativ analyse

Opgaven med at bestemme mængden af ​​viral belastning i patientens blod er identifikation af graden af ​​infektion hos andre.

Hepatitis C test

giver dig mulighed for at vurdere effektiviteten af ​​antiviral terapi, niveauet af infektiøsitet og antallet af inficerede væv.

Det er vigtigt at forhindre sygdomens fremgang, tage forebyggende foranstaltninger i tide, ordinere den korrekte behandling baseret på PCR-diagnostik. Hvis resultaterne af virusbelastningen ifølge resultaterne er mindre end 400 tusind IE / ml, så kan koncentrationen være minimal, hvilket indikerer en mulig fuld genopretning. Normen for et positivt resultat er fraværet af infektion.

Resultaterne af PCR-analysen:

Et positivt svar betyder en infektion i det biologiske materiale. Analysen tillader at bestemme det nøjagtige antal inficerede celler. Et negativt svar angiver fraværet af infektion, som omhyggeligt søges i kroppen.

Metoden til kvantitativ bestemmelse af hepatitis C er nøjagtig og informativ, udført på udstyr med høj følsomhed. Dekryptere resultaterne af analysen giver dig mulighed for at finde ud af om infektionen og dens specificitet, for at se det mindste antal inficerede celler på meget følsomme analysatorer.

False-positive eller modsatte resultater er sjældent givet af analysen, oftere sker dette i immunanalysestudier.

Hepatitis C er en af ​​de mest farlige og vanskelige at diagnosticere virussygdomme. Til bestemmelse af sygdommen anvendes PCR-metoden for hepatitis C. Dette er en ny højteknologisk teknik, der gør det muligt at undersøge genetisk materiale for eksistensen af ​​liv i de mindste partikler (molekyler) og de mindste mængder. Hepatitisvirus er meget vedholdende, det kan i lang tid leve i miljøet og er veletableret i menneskekroppen.

Hvad er PCR?

I dag er der et stort antal forskellige sygdomme. Og ikke et mindre antal metoder til deres beslutsomhed. Da infektionsmidler har lært at slå rod i miljøet og udvikle sig let, bruges de nyeste teknologier til at diagnosticere dem. Polymerasekædereaktion (PCR) er en hurtigere og mere præcis metode, der søger at finde sygdomsfremkaldende middel ved at øge delen af ​​hepatitisvirus DNA i prøven signifikant. Om ham skriver ofte: leder efter en nål i en høstak og bygger derefter en stak nåle.

Typer af PCR-metode

Kvalitativ test vil hjælpe med at bestemme forekomsten af ​​hepatitis C-virus i kroppen.

Allokere kvalitativ og kvantitativ analyse af hepatitis. For at afgøre om viruset er i kroppen, og dem, der har fundet antistoffer mod hepatitis C, udfører test af høj kvalitet. Afkodningsanalyse giver resultatet: "positivt"; "Negative". Negativ betydning betyder: enten en person er sund eller der ikke er nok agenter i blodet, og de kan ikke findes. Derfor er det værd at foretage en re-undersøgelse efter et stykke tid.

Et positivt resultat indikerer eksistensen af ​​en infektion. Dette er næsten altid den nøjagtige værdi. Fejlagtige resultater afhænger normalt af den menneskelige faktor (ukorrekt opbevaring eller manglende overholdelse af procedurens regler). Når satsen er, er resultatet negativt. Før testning er der ingen særlige regler, skal du bare tage blod fra en vene.

Hvis det findes, udfør en kvantitativ analyse (viral belastning) - den giver numeriske værdier: hvor meget RNA af hepatitisvirus er på dette tidspunkt i det foreskrevne volumen af ​​det undersøgte materiale. Med den aktive udvikling af infektion kan det detekteres 1-2 uger i en inficeret person. Blod er også normalt undersøgt, fordi agenser cirkulerer frit i den.

Egenskaber ved kvantitativ PCR analyse

Kvantitativ PCR hjælper dig med at vælge den mest effektive behandling af hepatitis C.

Forskellen i kvantitativ analyse er, at ikke alt det går. Kvalitativ - bestemmer tilstedeværelsen og kvantitativ - hjælper med bekræftelse af konklusionen "hepatitisvirus", prognosen for sygdomsforløbet og bestemmelse af behandlingsforløbet. Hvor effektiv terapien er, er antallet af RNA'er før og under behandlingen. Også med dets hjælp bestemme udnævnelsen af ​​doser af stoffer.

Som regel produceres den inden behandlingens begyndelse. De vigtigste indikationer kan være:

bestemmelse af viral belastning og kontrol af antiviral terapi, højkvalitets PCR fundet antistoffer af hepatitis C, find akut og kronisk hepatitis C, eksistensen af ​​blandet hepatitis ved planlægning af behandling, hvis en kvalitativ undersøgelse stadig finder sygdommens tilstedeværelse efter den tolvte uge af behandlingen.

Se også, hvilken viral belastning i hepatitis: lav terapi udføres med held; øget - behandlingen er ikke effektiv og skal ændres.

Hvad udføres på forskellige stadier af sygdommen?

Analysen vil hjælpe med at overvåge resultaterne af terapi i alle stadier af behandlingen.

I forskellige faser af sygdommen udføres en undersøgelse for at give en gennemgang af fordelene ved behandling og planlægning af dens varighed. Med gode reaktioner på terapi er det forkortet. Ellers vil ved langsom tilbagetrækning af virussen forlænges. PCR for hepatitis gør 1,4, 12, 24 ugers behandling. Når indikatorer ikke falder efter 12 uger, konkluderer de, at terapi ikke er egnet til denne organisme. Denne analyse bruges til at bestemme, hvor aktiv infektionen er, og hvor sandsynlig det er at overføre det. For eksempel er der under graviditeten risiko for at inficere en baby. Efter terapi identificere risikoen for gentagelse af sygdommen.

udskrift

Efter undersøgelsen kan analysen dechifrere ikke i tal, men med ordene: "under måleområdet" og "ikke detekteret". Kvantitativ PCR er mere kvalitativ følsom. Konklusionen "ikke registreret" kan sige, at infektionen ikke blev fundet. "Under måleområdet" - testen fandt ikke viruset, men det er i en lille værdi. I denne situation skal du lave en anden undersøgelse.

Viral belastning er bestemmelsen af ​​antallet af infektiøse RNA i en foreskrevet mængde blod (1 ml = 1 kubikmeter kvantitativt). Formuleret i internationale målinger IE / ml. Separat laboratorier angiver kopier / ml. Forskellige testsystemer kan dechiffrere oversættelsen af ​​komponenter i internationale værdier på deres egen måde. Tabel 1. Dekryptering af kvantitativ analyse af virus RNA

Diagnose af hepatitis omfatter en række tests for at bestemme tilstedeværelsen af ​​en virus i blodet. En måde at opdage en sygdom på er en forskningsmetode som PCR for hepatitis C. Hvad er det, hvorfor er analysen af ​​PCR for hepatitis lige så vigtig som den udføres og afkodes?

Hvad er det

Polymerasekædereaktion eller PCR anvendes til at diagnosticere mavesår, colitis, enteritis. Men den største fordel er, at det hjælper med at opdage i kroppen både hepatitis C-viruset og antistoffer mod det, som har evnen til ikke at forårsage reaktioner i immunsystemet på grund af deres evne til at mutere.

Undersøgelsen og dens essens ligger i skabelsen af ​​visse betingelser under hvilke kædereaktionen af ​​hepatitis RNA forekommer. Hvis der i sammenligning med nukleotidsekvensen af ​​hepatitis C-viruset findes tilfældigheder, hvilket tyder på, at der er viruspartikler i blodet, og der opstår desintegrationsprocesser i leveren. Hvis mængden af ​​virus er under et bestemt niveau, laves en negativ diagnose, og hvis højere, en positiv en.

Der findes to typer blodprøver ved hjælp af PCR-metoden til hepatitis: kvantitativ analyse og kvalitativ analyse.

Kvantitativ PCR, som nævnt ovenfor, bestemmer koncentrationen af ​​RNA i hepatitisviruset. Desuden er han i stand til at give information om intensiteten med hvilken patologien udvikler sig og effektiviteten af ​​den foreskrevne behandling. En kvantitativ analyse af hepatitis C er yderst vigtig, fordi det løser modstand mod virkningen af ​​antivirale lægemidler og giver dig mulighed for at justere behandlingen.

Når patienten gennemgår et behandlingsforløb, hjælper PCR med at bestemme den videre rækkefølge af aftaler. I nogle tilfælde er behovet for yderligere undersøgelser. For eksempel, hvis niveauet af ALP er forøget (men ikke mere end 2 gange inden for seks måneder), og transskriptionen af ​​analysen indikerer en viral belastning over 105 IE / ml, ordineres patienten en biopsi. Hvis en kvantitativ analyse af PCR afslører svær inflammation og fibrose, ordineres patienten et behandlingsforløb med antivirale lægemidler.

I situationer hvor et stort antal virale partikler kombineres med et højt ALT, skal patienten straks behandles uden yderligere diagnostiske foranstaltninger.

Tag denne test og find ud af, om du har leverproblemer.

Kun kvalificerede og erfarne specialister kan tyde kvalitativt i kvantitativ analyse af blod til hepatitis, og moderne teknologier hjælper med at gøre dette med en lav koncentration af viruset i blodet.

Kvalitativ analyse af PCR er rettet mod at bestemme og bekræfte den faktiske tilstedeværelse af viruset i kroppen. Det udføres, når antistoffer mod hepatitis opdages i blodet. Det er en kvalitativ analyse af hepatitis, der garanterer nøjagtigheden af ​​resultatet med 100% og giver dig mulighed for at foretage en diagnose i de tidlige stadier af sygdommen, hvilket gør det muligt at starte kampen mod hepatitis allerede i de første uger efter infektion og øger chancerne for fuldstændig opsving (i tilfælde af sygdomstype B).

Fordele ved PCR

I undersøgelsen ved hjælp af PCR og dechifrering af en blodprøve for hepatitis, kan du også bestemme patogenens genotype. I alt er der 6 genotyper af viruset og et stort antal subtyper, men i vores region er 1, 2 og 3 genotyper blevet almindelige.

Andre fordele ved denne type diagnose er:

• høj nøjagtighed af de opnåede indikatorer og lav sandsynlighed for fejl i dem
• høj følsomhed over for virale partikler i blodet
• muligheden for at identificere flere patogener på én gang
• diagnose af intracellulære patogene mikroorganismer med høj antigenvariation;
• At arbejde med dekodningsanalysen for hepatitis gør det muligt at opdage skjulte strøminfektioner.

Hvem er udpeget

Følgende kategorier af mennesker skal passere PCR-analysen for hepatitis:

• gravide kvinder;
• sundhedspersonale;
• potentielle blod- og organdonorer;
• dem, der har karakteristiske tegn på sygdommen
• HIV-inficerede individer;
• misbrugere;
• promiskuøse sexarbejdere.

Hvordan udføres analysen og er det nødvendigt at forberede sig på det

Blodprøveudtagning til PCR udføres fra en vene. Som regel sker dette om morgenen, før personen har spist, for efter at have spist et måltid skal mindst 8 timer passere. I ekstreme tilfælde kan blod tages til undersøgelse om dagen eller om aftenen, men tidsgabet mellem analyse og fødeindtag skal være mindst 5 timer.

Den menneskelige faktor kan kvantitativt påvirke resultaterne: deres nøjagtighed i nogle tilfælde falder fra 100% til 95%, derfor er det nødvendigt at forberede sig på bloddonation på forhånd. Kvaliteten af ​​biomaterialet til analyse vil være hensigtsmæssigt, når patienten følger følgende regler:

• før du donerer blod, kan du kun drikke rent vand
• to dage før undersøgelsen er det nødvendigt at nægte at acceptere stegte og fede fødevarer samt alkoholholdige drikkevarer
• en dag før besøget på laboratoriet bør stoppe med at tage medicin. Hvis dette ikke er muligt, er det afgørende at underrette laboratorietekniker og den behandlende læge;
• dagen før du skal undgå stressede situationer og fysisk anstrengelse
• ultralyd, røntgen og instrumentale undersøgelser bør ikke udføres kort før bloddonation;
• i en time før analysen skal du afstå fra at ryge
• 20 minutter før du donerer blod, skal du blive distraheret, roen ned og trække vejret ud.

Hvis et barn under 5 år passerer undersøgelsen, skal forældrene sørge for, at han drikker kogt vand hvert 10. minut i en halv time, før man tager biomaterialet.

Dekryptering af de modtagne data

Afkodningen af ​​analysen kan repræsenteres i ord (i tilfælde af en kvalitativ undersøgelse), for eksempel "ikke detekteret" eller "under ændringsområdet". I det første tilfælde indikerer dette, at infektionen ikke blev registreret. I det andet - at viruset er til stede, men i små mængder. Denne situation kræver genforskning.

Viral belastning bestemmes af mængden af ​​infektiøs RNA og kaldes IE / ml eller kopier / ml.

En normal indikator (norm) for en kvantitativ analyse for hepatitis C er intervallet fra 1,8x102 til 2,4x107 IE / ml.

Koncentrationen af ​​virus i blodet kan være:

• lav: fra 600 IE / ml til 3x10 4 / ml;
• medium: fra 3x10 4 IE / ml til 8x10 5 IE / ml;
• høj: mere end 8x10 5 IE / ml.

Kvantitativ og kvalitativ analyse af PCR for hepatitis tillader at bestemme tilstedeværelsen af ​​viruset i kroppen og niveauet af dets koncentration. En multidimensionel kædereaktion er i stand til at diagnosticere sygdommen i sine tidlige stadier, men for dette er det nødvendigt, at patienter så hurtigt som muligt vender sig til lægeinstitutioner for hjælp og nøje følger henstillingerne fra den behandlende læge.

Hepatitis C-viruset kan formere sig i blodlegemer og forårsage lymfoproliferative sygdomme. På grund af flere mutationer svækker kroppens immunforsvar, genotyper og subtyper af viruset. Med den korrekte og rettidige bestemmelse af en bestemt type afhænger effektiviteten af ​​antiviral terapi. Faren for infektion er, at sygdommen er asymptomatisk. Kun 15 procent af 100 kan opleve kvalme og opkastning, vægttab og feber.

Hepatitis C virus detektion

Standardhastigheden for hepatitis C er i størrelser fra 40 til 60 nm, med de fleste lipider, leverskader som følge af et akut eller kronisk forløb af sygdommen. Hepatitis C, nemlig RNA-viruset fra Togaviridae-familien, er ekstremt resistent, overføres ved blodtransfusion eller brugen af ​​ikke-sterile genstande, utilstrækkelige hygiejneforsyninger mv. Kvantitativ analyse giver dig mulighed for at undersøge blodet og identificere den genetiske struktur af det inficerede virus.

Til hepatitis C og dens genotyper blev bestemt, foretage en kvantitativ analyse. Afhængigt af analysatoren kan bestemme de tre niveauer af forekomsten af ​​RNA-virus.

Undertyper kan producere forskellige modifikationer, så analysatorens specificitet og følsomhed skal være hundrede procent. Udover at detektere sygdommen hos en patient er det nødvendigt at bestemme graden af ​​dens sværhedsgrad. Nogle laboratorier har ikke alle data om RNA-virus dekodning, der er mulighed for falsk positivt svar.

Forskning på hepatitis C vil være mere præcis, når man studerer disse indikatorer:

Ved at henlede opmærksomheden på resultaterne af disse indikatorer og kroppens generelle tilstand vises et resultat, der viser graden af ​​infektion, formen og antallet af hepatitis C-celler i blodet. Dette bidrager til helingsprocessen og effektiviteten af ​​antiviral terapi.

Typer af analyse for hepatitis C

En multidimensionel kædereaktion (PCR) giver en ide om antallet af DNA-partikler i patientanalyser taget under korrekt identifikation af det infektiøse middel.

Årsagsmidler til smitsomme sygdomme kan forekomme. En infektion i leveren, som hepatitis C, kan behandles i vores tid, når den påvises rettidigt. Hvis en virus er mistænkt, udføres PCR-analyse.

Da lang tid symptomerne på viruset kan maskeres, kan en person ikke mærke sygdommens begyndelse. Men med en grundig undersøgelse i 60-70% af tilfældene opdages hepatitis C, den første analyse, som er ELISA, følger PCR diagnosen. Analysen udføres i visse perioder for at bestemme sygdomsstadiet og foreskrive den passende behandling. At undvære det, uden at anvende alle disse procedurer, er det muligt at blive vaccineret mod hepatitis.

Kvalitativ og kvantitativ analyse

Der er kvalitativ og kvantitativ analyse. Essensen af ​​den første er, at den bestemmer forekomsten af ​​infektion i blodet. Og det betyder, at virussen inficerer sunde leverceller. Når der findes antistoffer mod hepatitis C hos en patient, udføres en kvalitativ test straks. Den hastighed, som resultatet skal give, er "ikke detekteret i blodet". Ved bestemmelse af koncentrationen af ​​en virus er der behov for at kende følsomheden af ​​diagnosesystemet, da folk, der undergår antiviral terapi, kan foretage analysen. Analysatorens følsomhed bør ikke være mindre end 50 IE / ml.

Når der opdages en virus, foretages en kvantitativ analyse, det vil sige den virale belastning, som bestemmer virusets koncentration i blodet og sygdommens sværhedsgrad.

Viral RNA, som er i en vis mængde blod, defineres som normen i en hastighed på 1 ml pr. 1 cm kubisk. Efter kvantificering af viral belastning er det muligt at bedømme infektionsgraden i det stadig uinficerede miljø. Så snart koncentrationen af ​​hepatitis C stiger i blodet, er det nødvendigt at isolere fra miljøet.

Det er vigtigt i de tidlige stadier at opdage graden af ​​koncentration af hepatitis for at bestemme tempoet i rehabilitering. Hvis hyppigheden af ​​hepatitis C overskrides med mere end 800.000 IE / ml, anses den for høj med en stigning på op til en million kritisk. Hvis det kvantitative interval er mindre end 400 tusind IE / ml, anses det, at infektion af de omkringliggende vil være mindre sandsynligt. Denne figur gør det klart, at hepatitis C er til stede i kroppen i meget små doser. Analysen kunne ikke bestemme den kvantitative værdi af virusets RNA-partikler, så den blev genudnævnt flere gange for nøjagtigheden af ​​diagnosen.

Resultater af kvantitativ analyse

Opgaven med at bestemme mængden af ​​viral belastning i patientens blod er identifikation af graden af ​​infektion hos andre.

Resultaterne af PCR-analysen:

1. Et positivt svar betyder en infektion i det biologiske materiale. Analysen tillader at bestemme det nøjagtige antal inficerede celler.
2. Et negativt svar angiver fraværet af infektion, som omhyggeligt søges i kroppen.

Metoden til kvantitativ bestemmelse af hepatitis C er nøjagtig og informativ, udført på udstyr med høj følsomhed. Dekryptere resultaterne af analysen giver dig mulighed for at finde ud af om infektionen og dens specificitet, for at se det mindste antal inficerede celler på meget følsomme analysatorer.

False-positive eller modsatte resultater er sjældent givet af analysen, oftere sker dette i immunanalysestudier.

Hepatitis C-virus er en virus, der indeholder et RNA-molekyle. Han er i stand til at undgå immunrespons af kroppen på grund af sin høje evne til at mutere. Der er seks hovedgenotyper af viruset og mange subtyper. I vores region fordeles 1, 2 og 3 genotyper hovedsageligt.

I 75-80% bliver sygdommen kronisk, hvilket forårsager leverfibrose, en tilstand, hvor levervæv erstattes af bindevæv. Fibrose fører igen til kræft eller cirrose. Hovedformen for overførsel af sygdommen er gennem blodet. Hvis en person har indikationer for afprøvning af hepatitis C, får han to grundprøver. Antistoffer mod viruset bestemmes, og i deres fravær menes det, at han ikke har hepatitis. Hvis der forekommer tilstedeværelse af antistoffer mod hepatitisvirus i blodet, udføres PCR-analyse.

RNA ved denne metode bestemmes i blodet inden for 10-12 dage efter infektion og indikerer, at viruset reagerer aktivt i kroppen. I løbet af denne periode er det simpelthen umuligt at opdage viruset på en anden måde, da det stadig ikke producerer specifikke antistoffer, og leverskader er ikke synlige med biokemiske test og biopsier.

Forskellige typer af PCR-undersøgelser

Polymerase kædereaktionsanalyse har visse fordele:

1. I denne undersøgelse er viruset selv bestemt, og ikke dets metaboliske produkter. I dette tilfælde er det muligt at bestemme typen af ​​patogen.
2. Teknikken har høj specificitet på grund af det faktum, at kun en bestemt del af DNA bliver undersøgt, falder sandsynligheden for at få fejlagtige resultater.
3. Det har en meget høj følsomhed, det er bestemt selv den mindste mængde virus i blodet.

Der er to hovedmetoder til at teste blod for hepatitis C ved hjælp af PCR: kvalitativ og kvantitativ analyse af PCR. Den kvalitative metode bruges til at bestemme om en virus er til stede. Enhver med antistoffer mod hepatitis er blevet detekteret i blodet, sådan en analyse udføres. Resultatet kan kun være af to typer: "detekteret" og "ikke detekteret", sidstnævnte værdi betragtes som normen.

Et positivt testresultat betyder, at fragmenter af virus-RNA'et blev fundet i prøven, hvilket igen indikerer at personen var inficeret med hepatitis. I tilfælde af et negativt resultat er to muligheder mulige: Der var ingen infektion eller koncentrationen er så lav, at den ikke er påvist ved denne teknik.

Den kvantitative metode adskiller sig væsentligt fra forskningen, i dets opgaver og i indikationer. Ikke alle patienter med hepatitis gennemgår en sådan analyse. Som andre har han visse mål. Bestemmelse af virusbelastning eller kvantitativ analyse af PCR for virus-RNA anvendes:

• til bestemmelse af virus-RNA i blodet og diagnosen "viral hepatitis";
• at forudsige kroniskhed af hepatitis og sygdomsforløbet;
• at overvåge antiviral behandling og beslutte om forlængelse, reduktion eller ændring i behandlingstaktik.

Undersøgelsen udføres i nærværelse af sådanne indikationer:

• Hepatitis C blev påvist ved en kvalitativ undersøgelse, og antistoffer blev påvist i blodet;
• med blandet hepatitis;
• hvis antiviral terapi er planlagt
• under og efter behandling for hepatitis C;
• i nærvær af kronisk og akut hepatitis C.

Prøven udføres for at estimere antallet af virusenheder i et givet volumen af ​​en blodprøve på 1 cm3 eller 1 ml. Resultaterne er angivet i tal. Indikatorer anvendt: IE / ml, hvilket betyder international enhed pr. Milliliter og kopier pr. Ml, antallet af kopier af RNA i 1 ml af prøven. Jo højere kvantitative indikator for analysen er, jo større er sandsynligheden for overførsel af viruset til en anden person.

R-DNA er en forgrenet DNA-metode. Mere enkel og billig metode. Anvendes til flere prøver, har lav følsomhed, fra 500 IE / ml. Med sådan følsomhed er der en chance for ikke at identificere virussen, selv om den er til stede i blodet.

TMA er en transkriptionsforstærkningsmetode. Denne teknik registrerer nukleinsyrer i blodet. Det har lave omkostninger og høj følsomhed, fra 5-10 IE / ml. En forholdsvis ny teknik, der giver dig mulighed for at fremskynde og reducere omkostningerne ved testprocessen.

Resultaterne af den kvantitative analyse af definitionen af ​​RNA-virus, præsenteret af laboratoriet, fortolkes som følger: